一例黑颈天鹅疑似感染心包积液-肝炎综合征的病理学诊断报告

刘蕊，李富桂

（天津农学院 动物科学与动物医学学院，天津 300384）

心包积液-肝炎综合征（Hydropericardiumhepatitis Syndrome，HHS）首次发现于1987年的巴基斯坦安卡拉地区，故被命名为安卡拉病，且沿用至今[1]。引起该病的病原体是禽类I群腺病毒的血清4型（FAV-4），其名是对临床病死剖检鸡只眼观病变特征的一种描述。该病的宿主动物主要集中在20～40日龄肉鸡群体，发病时来势迅速，感染后4～8 d死亡率逐渐升高，临床症状为大量的心包积液和肝脏呈肿大变黄状态[2]。天津地区首次发现该病于2016年7月，经病毒分离鉴定，确诊引起天津地区 HHS的病原体为 TJ1607毒株（GenBank登录号为:KY885021），TJ1607毒株与FAV-4的亲缘关系最近[3]。HHS主要的宿主动物为3～5周龄肉鸡群体，但也可感染麻鸡、杂交鸡、蛋鸡和种鸡，肉鸭也可发生[4]。此次病例发生在黑颈天鹅身上，是除上述易感宿主外的首次报道，应引起畜牧业工作者广泛重视。组织病理学检查是兽医病理学常规的诊断方式，检查组织所发生的病变，探讨病变产生的原因、发病机理、病变的发生发展过程，最后做出病理诊断。此项技术已经广泛应用于临床工作和科学研究。

1 病例简介

1.1 发病情况

某动物园于2018年2月1日送检病例，病例号为180201。送检组织为病死幼雏黑颈天鹅的心脏、肝脏、肠道等固定组织。问诊结果表明于2018年1月30日开始发病，于2018年2月1日开始出现死亡。

1.2 临床症状

发病天鹅表现为精神沉郁，嗜睡；排泄物呈黄色稀便样；羽毛蓬乱，逆立，无光泽。但采食量和饮水量未见明显异常，且不影响生长发育。

1.3 剖检变化

大体剖检可见肝脏质脆，肿胀，颜色呈浅黄至深黄色，呈现部分坏死灶特征；心脏松弛柔软，心包内积有淡黄色渗出性液体；脾脏有不同程度出血点。

2 实验室检查

2.1 细菌检查

取送检病料接种于 LB琼脂培养基和血平板上，37 ℃ 培养48 h，观察平板上有无细菌生长。

2.2 组织病理检查

将固定好的肝脏、心脏、肠道修整，随后进行冲水、脱水、透明、包埋、3 µm切片、HE染色、封片等处理，具体操作步骤参考文献[5]。

3 结果分析

3.1 细菌检查结果

将送检病料接种于 LB琼脂培养基和血平板培养基上，37 ℃ 培养48 h后，取出平板观察，平板上无细菌生长。

3.2 病理检查结果

病变组织石蜡切片，HE染色观察发现:肝脏呈水肿状态，明显淤血且有少量出血现象（图1），部分区域呈现灶状炎细胞浸润，少量肝细胞发生变性坏死、并有少量嗜碱性核内包涵体存在（图2）；心脏的心肌纤维发生断裂，有明显充血现象，部分区域出血（图3），肌细胞浊肿，单核细胞和淋巴细胞发生浸润（图4）；肠道呈充血状态（图5）。

图1 （HE×40）肝脏水肿，淤血

图2 （HE×100）嗜碱性核内包涵体

图3 （HE×40）心肌纤维断裂

图4 （HE×100）单核细胞

图5 （HE×40）充血

4 诊断结果

综合问诊结果、大体剖检结果和病理检查结果表明，该黑颈天鹅为心肌炎和肝炎症状，初步诊断为疑似HHS。确诊仍需取病料进行分子生物学诊断检测病毒抗原。

5 讨论

心包积液-肝炎综合征（HHS）是以心包积液和包涵体肝炎为特征的一种高致病性传染病，首次发生于巴基斯坦安卡拉地区，中国于2013年首次报道出现此类病例[6]。随后，我国河南、山东、辽宁、吉林等相继报道出该地区的部分鸡群出现以心包积液和包涵体肝炎为特征的传染性疾病。经分离鉴定，引起上述地区该病的病原体均为血清4 型 I 群禽腺病毒。据文献报道，该病多发生于20～30日龄的肉鸡，发病的同时开始出现死亡，28～35日龄呈现死亡高峰期，且出现死亡的时间全程持续4～8 d，35～42日龄鸡只死亡数量开始减少，全程病程持续 8～15 d[7-8]，其死亡率约为20%～75%，最高可达80%左右[9]。该病从发现至今，给我国养禽业造成的经济损失十分严重，因此对该病的病理学深入研究，对于保护禽类和促进我国养禽业发展具有深远的意义。天津地区于2016年7月首次发现该疾病，随后进行了该病的病毒分离鉴定、疾病模型构建、后续抗体研制和免疫保护试验，为天津地区的HHS防治提供了重要参考。

此次病例诊断为疑似感染，主要是由于送检病料的局限性，导致后续病毒分离鉴定和基因组学研究未能进行，只能综合问诊情况、大体剖检状态和组织病理检查在一定程度上确诊疑似感染HHS。给予的建议是对环境进行消毒，注意病禽隔离；全群提高免疫力、防止继发感染；减少应激；调理肝肾功能。送检病料问题的出现也为后续试验过程中的病料采集和临床中的病理诊断敲醒了警钟。病料采集应注意及时性与准确性，患病畜禽死后应立即进行，时间过长会阻碍病原体的检验，对于病变部位要准确的采集，同时分别根据不同的试验需要进行不同方法的保存。采集病料过程中还应注意无菌操作，防止杂菌感染。

据报道，HHS主要感染于蛋鸡、杂交鸡、种鸡、麻鸡和肉鸭，此次诊断出黑颈天鹅疑似感染该疾病为除上述品种外的首次报道，在一定程度上使得HHS宿主的感染范围扩大。患病宿主范围的扩大，对于后续动物保护试验具有更加重要的意义。患病禽类群体主要表现为初期无明显临床症状，而中途突然发生倒地死亡的现象[10]，因此造成HHS的前期预判尤为困难，加强对该病的预防成为养殖工作者的重要任务。在预防疾病的过程中，应以净化种源为主，加强饲养管理，建设标准化养殖场。在养殖密度较大的养殖场使用0.1%甲醛溶液对饲养环境进行消毒，适当通风，科学饲养管理。后续对于HHS的免疫防治研究同样重要。此病例问题的出现也为研究HHS的致病机理和免疫防治提供了良好的疾病模型。