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宫颈癌组织EPB41L3 和骨膜蛋白表达及意义

2019-10-22林敏秀曹珊珊张隆英陈崇阳阮正英

浙江中西医结合杂志 2019年10期
关键词:骨膜台州市宫颈炎

林敏秀 张 琴 曹珊珊 张隆英 陈崇阳 阮正英

宫颈癌是预后较差的一种常见恶性肿瘤,5 年生存率较低[1]。宫颈癌缺乏明确的标志物来判定其不良预后,成为目前研究的热点之一。红细胞膜蛋白配体4.1 样3(EPB41L3)是4.1 蛋白家族中一个新发现的抑癌基因,具有抑制肿瘤细胞生长的功能[2-3]。骨膜蛋白为细胞外基质蛋白,与多种肿瘤的血管生成、细胞的恶性分化和不良预后相关[4-5]。EPB41L3 及骨膜蛋白是否参与宫颈癌的发病机制至今尚未清楚。本研究检测宫颈癌组织EPB41L3 及骨膜蛋白表达水平,探讨EPB41L3 和骨膜蛋白在宫颈癌发病机制中的作用,报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013 年5 月—2018 年3 月期间在浙江省台州市中西医结合医院(23 例)和浙江省台州市中心医院(47 例)手术切除的宫颈癌组织标本70 份为宫颈癌组,术后通过病理均确诊为宫颈癌[6]。其中伴有淋巴结转移31 例,不伴淋巴结转移39 例。选择取同期慢性宫颈炎活检组织(台州市中西医结合医院和台州市中心医院各25 份)50 份为慢性宫颈炎组。本研究经医院伦理委员会审核通过,并取得患者知情同意。

1.2 纳入、排除标准 纳入标准:(1)符合宫颈癌诊断标准;(2)术前未接受放疗或化疗;(3)均行宫颈癌切除术+盆腔淋巴结清扫术;(4)有完整的病理资料。排除标准:(1)患有急性妇科炎症或其他急性疾病;(2)1 个月内使用过免疫抑制剂。

1.3 主要试剂及方法 EPB41L3 和骨膜蛋白多克隆IgG 抗体均购自英国biorbyt 公司(批号A5790、E11788)。SP 免疫组化法测定EPB41L3 和骨膜蛋白的表达(抗体工作浓度为1:100)。结果判定:光镜下观察细胞着色情况,阳性细胞的胞浆呈棕黄色表达,阳性率=阳性例数/总例数,阳性强度参考文献[7]得出光密度(OD)值。

1.4 统计学方法 应用SPSS 16.0 统计软件,计量资料以均数±标准差(±s)表示,两组间比较采用成组资料t 检验;计数资料采用χ2检验。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 宫颈癌组患者年龄24~73岁,平均(46.50±13.16)岁。慢性宫颈炎组患者年龄23~67 岁,平均(43.60±10.11)岁。两组间年龄差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 两组EPB41L3 和骨膜蛋白表达水平比较 宫颈癌组EPB41L3 阳性率和表达强度均显著低于慢性宫颈炎组(P<0.05 或P<0.01),骨膜蛋白阳性率和表达强度均显著高于慢性宫颈炎组(P 均<0.01),见表1、插页图1-2。

图1 免疫组化法检测宫项组织EPB41L3 的表达(DAB 染色,200 倍)

图2 免疫组化法检测宫项组织骨膜蛋白的表达(DAB 染色,200 倍)

表1 慢性宫颈炎和宫颈癌患者EPB41L3 和骨膜蛋白表达水平比较(±s)

表1 慢性宫颈炎和宫颈癌患者EPB41L3 和骨膜蛋白表达水平比较(±s)

注:EPB41L3:红细胞膜蛋白配体4.1 样3;OD:光密度

表2 宫颈癌伴或不伴淋巴结转移EPB41L3 和骨膜蛋白表达水平比较(±s)

表2 宫颈癌伴或不伴淋巴结转移EPB41L3 和骨膜蛋白表达水平比较(±s)

注:EPB41L3:红细胞膜蛋白配体4.1 样3;OD:光密度

2.3 宫颈癌组织EPB41L3 和骨膜蛋白表达与淋巴结转移的关系 伴有淋巴结转移的宫颈癌组患者骨膜蛋白阳性率和表达强度均高于不伴有淋巴结转移组(P 均<0.05),EPB41L3 阳性率和表达强度在伴有与不伴有淋巴结转移组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。

3 讨论

EPB41 相关基因由四类基因组成,包括EPB41、EPB41L1、EPB41L2 和EPB41L3,在C-末端具有高度同源的特性,共同编码一组细胞支架蛋白质类(依次编码4.1R、4.1N、4.1G 和4.1B)[8]。EPB41L3 定位于人染色体18p11.3 区域,编码与细胞膜相关的4.1 蛋白家族,具有调节细胞生长的功能[2]。研究发现,EPB41L3 在癌组织表达下调或缺失,可能与淋巴结转移相关,被认为是一种抑癌基因[9-10]。

本研究发现,在宫颈癌及慢性宫颈炎组织均有EPB41L3 呈阳性表达的细胞,提示EPB41L3 均可表达于宫颈癌和慢性宫颈炎细胞。宫颈癌组织EPB41L3 的阳性表达率,还是其表达强度,均低于慢性宫颈炎组,提示在宫颈癌组织EPB41L3 表达下调,笔者推测可能由于EPB41L3 表达下调,其抑癌功能被减弱,从而诱发宫颈组织癌变。探讨EPB41L3与淋巴结转移相关性发现,EPB41L3 表达水平在伴有与不伴有淋巴结转移间无差别,提示EPB41L3 表达水平可能与宫颈癌的腹腔淋巴结转移无关。这与其他学者的报道不相同,其原因可能与不同组织的肿瘤有关[11],肿瘤组织不同EPB41L3 表达也不尽相同;此外,还可能与肿瘤的标本来源有关,本研究使用宫颈癌组织标本,而其它大多的研究使用细胞株并采用甲基化修饰方法来研究细胞的侵袭[12-13]。

骨膜蛋白为一种分泌型细胞粘附蛋白,属于成束蛋白家族成员之一,在促进细胞生长、细胞存活、上皮-间质的转变、侵入、肿瘤血管发生及转移方面起着重要的作用,涉及肿瘤组织的发生及发展[14-15]。本实验结果发现,宫颈癌组织骨膜蛋白表达水平高于慢性宫颈炎组织,表明过度表达的骨膜蛋白可能与宫颈癌组织的恶性分化相关;骨膜蛋白表达水平还与淋巴结转移相关,它在伴有淋巴结转移的宫颈癌组织表达水平高于不伴有淋巴结转移的组织,提示骨膜蛋白可能是宫颈癌预后不良的标志物。高表达的骨膜蛋白也见于子宫内膜癌组织,支持过表达的骨膜蛋白可能促进子宫组织的癌变[16]。

综上所述,宫颈癌组织EPB41L3 表达下调,骨膜蛋白表达增强,可能与宫颈癌的恶性分化相关,共同起到促进组织癌变的作用,有望成为一种治疗肿瘤的新靶点。

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