常用急性肝损伤动物模型研究进展

李若飞　于春萍　兰丁璇　付子杰

【摘  要】肝脏是人类重要的代谢器官，承担着维持生命的重要功能，还有解毒、造血和凝血作用，其中一些有损肝脏的物质也必须依靠肝脏解毒，故肝损伤的发生率极高，肝病的防治工作刻不容缓。寻找一种较为适合的肝损伤模型是进行肝病防治研究的必要前提，目前常用的肝损伤模型有化学性、免疫性、酒精性还有其他类肝损伤模型。本文将近几年常用的各种急性肝损伤的动物模型进行综述，为选择合适的造模方法提供思路。

【关键词】急性肝损伤;动物模型;方法

【中图分类号】R575       【文献标识码】A     【文章编号】1004-7484（2019）06-0323-01

化学性肝损伤

四氯化碳（CCl4）。四氯化碳是最常用的致化学性肝损伤的药物，其特异性高，能够有效造成肝脏发生脂质过氧化反应。 CCl4进入体内后，能够在肝药酶的催化作用下产生自由基，与细胞膜上的大分子物质共价结合，产生脂质过氧化反应，破坏细胞膜的结构和功能。周迎春[1]给小鼠灌胃1% CCl4（0.1 ml/10 g），24h后建立小鼠急性肝损伤模型，该模型重复性好，具有强烈的肝毒性，能使血清中ALT、AST含量迅速升高，是理想的造模药物。但CCI4挥发性强，可经多途径传播吸收，对实验人员有一定的危害。

对乙酰氨基酚（AP）。AP是目前临床常常用的解热镇痛药，但长期过量应用，会造成肝损伤疾病。AP在体内代谢产生的N-乙酰对苯醌亚胺（NAPQI）可与肝细胞内生物大分子共价结合，影响蛋白质的正常生理功能。吴洋东等[2]给昆明种系小鼠一次性腹腔注射AP 200mg/kg，40h后造成急性肝损伤模型，AP可造成肝损伤而不会损害其他组织器官，模型重复性好，是常用的肝损伤模型。

D-氨基半乳糖（D-GaIN）。D-氨基半乳糖（D-GaIN）可对肝细胞磷酸尿嘧啶产生干扰，可以损害质膜，形成肝细胞内复合物，消耗尿苷三磷酸，使肝细胞出现炎症和弥漫性坏死，其病理变化与病毒性肝炎相似。王超等给小鼠一次性腹腔注射10% D-GalN 生理盐水溶液，剂量为600 mg /kg ， 16h后造成急性肝损伤模型。也可以利用脂多糖联合D - 氨基半乳糖致急性肝损伤，肝细胞弥漫性坏死后，肝脏对内毒素（LPS）的解毒能力降低，使肝损伤加重。该模型的稳定性好，重复性高，且对实验人员无危害。但该模型具有不可逆性，且D-氨基半乳糖的价格较为昂贵，限制了其应用。

α- 萘基异硫氰酸酯（ANIT）。ANIT 可引起脂质过氧化，阻塞胆管，使血清中胆红素升高，导致动物急性黄疸型肝损伤。黄正明等一次性给予大鼠15%ANIT（50 mL/kg）成模。ANIT可导致动物急性黄疸型肝损伤，是研究退黄药物研究的理想模型。

异烟肼（INH）。异烟肼是临床上治疗结核的一线用药，大剂量应用可致肝损伤。INH可与肝脏大分子物质共价结合使细胞受损，其代谢产物还诱导自由基产生，发生脂质过氧化反应，从而损害肝细胞。禄保平等经实验得出，一次性灌胃80mg/Kg异烟肼，18h后可建立小鼠急性肝损伤模型。异烟肼联合利福平大剂量应用同样可以造成急性肝损伤。

免疫性肝损伤

刀豆蛋白A（Con A）。Con A是一种T细胞丝裂原，具有较强的嗜肝性，可激活T细胞分泌各种细胞因子，短时间内导致小鼠肝脏被大量中性粒细胞炎性细胞浸润，导致肝脏损伤。李红等给小鼠尾静脉注射剂量为12mg/kg的Con A 8h后造模成功。該模型是最为常用的致免疫性肝损伤模型药物，且简便快速，具有较强的特异性。

卡介苗（BCG）联合脂多糖（LPS）。BCG使致敏T淋巴细胞激活，并在肝脏中大量堆积，LPS进一步激活致敏的巨噬细胞，促使其释放大量细胞因子，导致肝组织的过氧化损伤[3]。BCG与LPS联合应用，还会使胞膜通透性改变， 细胞内外离子失衡，从而使肝细胞坏死。陈伟平等人给小鼠尾静脉注射BCG 5mg/2ml， 12 d后， 尾静脉注射LPS 7.5g/0.2ml，禁食12h后成模。BCG和LPS 的联合使用相较于卡介苗以及脂多糖的单独使用效果明显，简便易行且持续时间长久。

酒精性肝损伤

酒精性肝损伤的发生十分常见，乙醇在体内不能储存，主要由肝脏代谢为乙醛，进而在酶的催化下转化为乙酸，随尿液排出体外。当酒精摄入过量时，乙醇和乙醛在体内堆积，抑制三羧酸循环，损伤线粒体。乙醇过量摄入还会使机体产生大量细胞因子和炎症介质，使枯否细胞解毒能力受到抑制，进而出现内毒素血症。另外，乙醇导致的肝损伤还与脂质过氧化和氧化应激有关[4]。齐慧慧等给小鼠一次性灌胃50% 乙醇（6g/kg）成功造成急性酒精性肝损伤模型。酒精性肝损伤的发病机制复杂，目前对急性酒精性肝损伤多采用支持治疗等辅助治疗，还没有令人满意的治疗药物和方法，但效果往往不能达到满意的效果。注意饮食，戒酒才是避免形成急性酒精性肝损伤的根本方法。

其他类肝损伤

其他一些重金属离子也会造成肝损伤，作用机制大多与氧化应激及脂质过氧化有关。如镉离子进入体内，消耗GSH，与分子巯基蛋白结合，从而使活性氧化物增多，引发脂质过氧化反应。吴永琴等给予小鼠 4mg/kg CdCl2，18小时后成功建立急性肝损伤模型。此模型主要用于治疗重金属导致的肝损伤药物的筛选。

讨论：急性肝损伤的造模方法多种，已经取得巨大进展，然而要选择一种较为合适的模型却并不容易，因为肝损伤疾病的病理机制尚未完全阐明，且还有许多未知的药物作用靶点，所以，急性肝损伤模型还需更加深入研究。

参考文献：

[1]周迎春.四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤模型的实验研究[J].黑龙江中医药.2018，47（1）：90-91.

[2]吴洋东，虞涤霞，刘红艳，高潇，程勇卫，段瑞娴，郭燕，唐望先.肝泰胶囊保护对乙酰氨基酚所致急性肝损伤实验研究[J].中国药师杂志.2008，11（6）：628-630.

[3]邱英锋，缪晓辉，蔡雄，王俊学，张瑞祺，倪武.卡介苗加脂多糖建立的大鼠急性免疫性肝损伤模型的研究[J].西北国防医学杂志.2004，25：345-347.

[4]安红姬.酒精所致肝损伤作用机制的研究进展[J].中国药物经济学.2013，（9）：526-527.