HPV在子宫内膜癌中的阳性表达及基因分型

韦静，韦有生，马娅芬，欧婷瑜，徐喜凤，庞春红，邱锐#，余夏

南宁市第二人民医院1妇科，3检验科，南宁530000

2广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科，南宁530000

子宫内膜癌是好发于子宫内膜的一种上皮性恶性肿瘤，是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，对女性身体健康造成严重威胁。因此针对子宫内膜癌展开有效的筛查，给予及时干预及有效的治疗，降低子宫内膜癌的发病率，是目前临床研究的重点。人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染与多种肿瘤的发生、发展具有密切关系。研究指出，HPV感染与女性生殖器病变密切相关[1]。因此，本研究探讨HPV在子宫内膜癌患者中的阳性表达情况及基因分型，旨在为临床诊断与治疗子宫内膜癌提供参考，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2016年5月至2018年5月在南宁市第二人民医院进行子宫病变检查的女性640例。纳入标准：均进行子宫病变检查。排除标准：①宫颈脱落细胞检查异常者；②有宫颈手术史者；③妊娠期女性；④合并其他妇科肿瘤者。640例患者均为女性，年龄23～62岁，平均（39.42±7.98）岁。子宫病变筛查中，子宫病变患者362例（子宫内膜增生124例，子宫肌瘤176例，子宫内膜癌62例）；无子宫病变者278例。本研究经医院伦理委员会审批通过，所有研究对象及家属均对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.2 HPV检测方法

所有研究对象均进行HPV检测。检查前72 h内不能对外阴和阴道进行冲洗及使用药物，正在月经期的女性在月经结束后的72 h再进行检查，检查前24 h内无性行为。采用美国Digene公司的第2代杂交捕获试验的采样工具包收集受检者脱落的子宫内膜细胞，将其置入专用试管中，4℃保存待检测标本，7天内完成标本检测。检测方法：①将检测标本置入杂交液中进行HPV杂交，并加入显色剂进行显色，观察到蓝紫色圆点则表明HPV阳性表达。②提取阳性检测标本中的人类乳头状瘤病毒DNA（human papilloma virus DNA，HPV-DNA）。③应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）对阳性检测标本中的HPVDNA进行基因扩增；基因扩增后的HPV-DNA进行染色及洗膜等处理，最后采用凯普HPV-DNA试剂盒（广东凯普生物科技股份有限公司）与核酸分子快速杂交基因分型试剂盒（广东凯普生物科技股份有限公司）进行基因分型检测。

1.3 观察指标

比较不同类型子宫病变患者（子宫内膜增生、子宫肌瘤和子宫内膜癌）及无子宫病变者的HPV阳性率；统计不同年龄段（23～30岁、31～40岁、41～50岁、51～62岁）子宫病变患者的HPV阳性率，以及HPV阳性表达的子宫内膜癌患者的HPV基因分型。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0软件对数据进行统计学分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV阳性率的比较

278例无子宫病变者的HPV阳性率为7.55%（21/278），362例子宫病变患者的HPV阳性率为28.45%（103/362）；其中，子宫内膜增生患者的HPV阳性率为29.03%（36/124），子宫肌瘤患者的HPV阳性率为16.48%（29/176），子宫内膜癌患者的HPV阳性率为61.29%（38/62），3种类型子宫病变患者的HPV阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=6.756，P＜0.01）。子宫内膜癌患者的HPV阳性率明显高于无子宫病变者及子宫内膜增生和子宫肌瘤患者，差异均有统计学意义（χ2=102.069、17.954、45.522，P＜0.01）。不同类型子宫内膜增生、不同部位子宫肌瘤及不同分化程度子宫内膜癌患者的HPV阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。（表1）

表1 不同类型子宫病变患者的HPV阳性情况

2.2 不同年龄段子宫病变患者的HPV阳性率

362例子宫病变患者中，23～30岁患者的HPV阳性率为38.46%（30/78），31～40岁患者的HPV阳性率为25.78%（33/128），41～50岁患者的HPV阳性率为21.71%（28/129），51～62岁患者的HPV阳性率为44.44%（12/27），不同年龄段子宫病变患者的HPV阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=7.010，P＜0.01）。

2.3 HPV阳性表达的子宫内膜癌患者的HPV基因分型

38例HPV阳性子宫内膜癌患者的基因分型中，HPV16阳性率为73.68%（28/38），HPV52阳性率为44.74%（17/38），HPV58阳性率为 39.47%（15/38），HPV53阳性率为23.68%（9/38），HPV68阳性率为15.79%（6/38），HPV39阳性率为10.53%（4/38）。

3 讨论

HPV是一种没有包膜的小型双链环状DNA病毒，其致病范围较广（从泌尿生殖系统到头颈部）[2-3]，低危型HPV主要与尖锐湿疣等疾病有关，一般不会导致恶性病变，而高危型HPV如HPV16、18、52、58主要与子宫内膜癌、生殖器癌、皮肤癌和宫颈癌等恶性肿瘤有关[4-5]。HPV16是临床较为常见的高危型HPV，对子宫内膜细胞的黏附或浸润能力较强，HPV16阳性表达能够促进子宫内膜细胞的增殖，抑制其细胞凋亡，HPV58和HPV52的阳性表达也易引发子宫内膜癌[6-7]。研究报道，HPV的致癌性与其E6与E7基因编码蛋白促使抑癌基因失活及癌基因激活密切相关[8-9]。目前，研究证明HPV存在于子宫内膜组织中，HPV检测对早期发现和预防子宫内膜癌具有重要的临床意义[10-11]。研究显示，HPV阳性表达与子宫内膜癌的发生具有密切关系，可能是引发子宫内膜癌的重要因素[12]。本研究中，362例子宫病变患者的HPV阳性率为28.45%；其中，23～30岁患者的HPV阳性率为38.46%，31～40岁患者的HPV阳性率为25.78%，41～50岁患者的HPV阳性率为21.71%，51～62岁患者的HPV阳性率为44.44%，不同年龄段子宫病变患者的HPV阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。分析原因主要由于性接触是HPV感染的主要途径，因此HPV阳性率在23～30岁的女性中较高。而50岁以上的女性多处于绝经期，性激素水平显著降低，导致机体的免疫功能较弱，因此是HPV感染的第二个高峰期。

本研究结果显示，无子宫病变者的HPV阳性率为7.55%，子宫内膜增生患者的HPV阳性率为29.03%，子宫肌瘤患者的HPV阳性率为16.48%，子宫内膜癌患者的HPV阳性率为61.29%；子宫内膜癌患者的HPV阳性率明显高于无子宫病变者及子宫内膜增生患者和子宫肌瘤患者，差异均有统计学意义（P＜0.01）。但在不同类型子宫内膜增生、不同部位子宫肌瘤及不同分化程度子宫内膜癌患者的HPV阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。表明HPV可能只参与子宫病变的发生，对子宫病变的类型及进展无影响，但未来仍需进一步深入研究。子宫内膜癌患者中HPV阳性表达的基因分型中，HPV16阳性率最高（73.68%），表明HPV16在子宫内膜癌患者HPV阳性表达中具有高分布率。尽管目前对于子宫内膜癌与HPV阳性之间的相关性具有较大的争议，但加强HPV检测对预防及治疗女性生殖系统恶性肿瘤具有重要的意义。

综上所述，子宫内膜癌患者的HPV阳性率较高，且以HPV16分型为主，临床上应采取相应措施进行预防。