注射用伏立康唑细菌内毒素检查方法探究

郑州大学附属儿童医院 河南省儿童医院 郑州儿童医院（450000）许哲

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 样品 选取我院采购的不同生产厂家、不同生产批次的注射用伏立康唑共8种（商品名：辉瑞威凡，Pfizer Limited生产，国药准字H20040662、H20090717、针剂，规格：200mg/支；珠海亿邦制药有限公司生产，国药准字H20058964、H20052296针剂，规格：50mg/瓶；商品名：迪尔达宁，晋城海斯制药有限公司生产，国药准字H20160105、H200058963、H20052298针剂，规格：50mg/瓶；丽珠集团丽珠制药厂生产，国药准字H20064493针剂，规格：50mg/瓶）。

选取我院采购的鲎试剂2种，美洲鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate，LAL），美国CR恩度斯弗公司生产，生产批号1606072灵敏度为0.5EU/mL；LALII，厦门市鲎试剂厂生产，生产批号1602024灵敏度0.5EU/mL。选取我院采购的BET水（厦门市鲎试剂厂生产，生产批号1602025规格：每瓶50ml）。选取我院采购的细菌内毒素工作标准品（中国食品药品检定研究院产品，生产批号150601-201174，规格160EU/支）。

1.1.2 检验仪器 恒温水浴锅（北京斯普特科技有限公司生产，型号：HHS-21-4）；试管恒温仪（北京京晶科技有限公司，型号：TAL-40D）；旋涡混合器（德国IKA公司生产，型号：VORTEX2）；高温烘箱（上海喆图科学仪器有限公司型号：THG-9249A）等。实验使用的所有用具均高温消毒。

附表 复核实验结果

1.2 检验方法

1.2.1 确定注射用伏立康唑细菌内毒素检查的限值 由临床用量及静脉滴注时间可知细菌内毒素总量限值为1.68EU/mg，但根据相关要求[1]，应将限值下调为计算值的1/3～1/2，即其限值应为0.76EU/mg。

1.2.2 复核本次研究选取的鲎试剂的灵敏度 按2015年版药典通则部分可知细菌内毒素检查凝胶法[2]。

1.2.3 注射用伏立康唑干扰实验 首先对其进行预实验。然后再进行确认实验：将样品全部稀释为0.66mg/mL作为供试品A；将供试品A与BET水把内毒素标准品分别稀释为含内毒素2、1、0.5、0.25λ的溶液B、C；再取BET作为阴性对照组D；溶液配好后再按照最新版药典的细菌内毒素检查凝胶法进行检验。做4组平行的B溶液和2组平行的A、C、D溶液。

1.2.4 按照拟定的BET标准检查样品 按最新版中国药典通则-细菌内毒素检查凝胶限度实验法。

2 结果

2.1 两种鲎试剂的灵敏度复核符合要求（λ都为0.5～2）。见附表。

2.2 干扰实验结果 配制的A、D溶液经试验均为阴性结果，B、C溶液经试验证明均符合鲎试剂灵敏度复核要求，不仅说明实验有效，而且证明注射用伏立康唑稀释至0.66mg/mL后，再使用0.25EU/mL的鲎试剂进行BET，无干扰作用。

2.3 按BET标准检查样品结果 由上述结果可知伏立康唑细菌内毒素应该＜0.76EU/mg。采用鲎试剂对其进行检查，确定本次研究使用的8个样品均符合要求。

3 讨论

伏立康唑是临床上经常使用的一种抗真菌药物。临床使用的伏立康唑有多种药剂形式，例如：胶囊、片剂、注射剂等。目前，我们此次研究的伏立康唑为注射剂，优点为药品作用迅速，准确，但如何保证注射用伏立康唑的安全使用就成为我们必须要注重的问题。研究表明，细菌内毒素已成为多种并发症的致病原因。主要原因为细菌内毒素可以进入血液循环，从而引起机体的病理反应，即内毒素血症。但由于其不能得到及时有效的治疗，严重时导致微循环障碍或多器官功能衰竭等，此病的死亡率逐年上升。因此，严格把控注射用药的细菌内毒素含量、提高用药的安全性是极为重要的。通过对此研究的结果资料分析显示，采用2015年版《中华人民共和国药典：四部》通则规定的方法对注射用伏立康唑细菌内毒素进行检验，实验结果说明稀释至0.66mg/mL的样品对鲎试剂与细菌内毒素反应无干扰，且限值为0.76EU/mg的鲎试剂都可以对其进行BET。

综上所述，注射用伏立康唑细菌内毒素检查应严格按要求确定限值，确保其小于0.76EU/mg。