中药鸭公树子化学成分研究

1.湘潭医卫职业技术学院，湖南 湘潭 411102；2.南方医科大学，广东 广州 510515

鸭公树子为樟科植物鸭公树(NeolitseachuiiMerr.)成熟的种子。鸭公树主要分布于长江以南各大省区，其中以广东省、广西省、云南省、湖南省、江西省较为多见。传统中医认为鸭公树子的功效为行气止痛、利水消肿，临床常用于治疗胃脘胀痛、腹部水肿[1]。尚未见道有关鸭公树子化学成分的研究报道，其有效的活性成分、作用机制还不清楚。为了更好地开发利用鸭公树子药材，本研究以干燥处理后的鸭公树子为材料，经过乙醇提取、系统溶剂萃取、柱层析对鸭公树子药材的化学成分进行分离及结构鉴定，共分离和鉴定出7个化合物，分别为球松素(化合物1)、银松素(化合物2)、槲皮素(化合物3)、山柰酚(化合物4)、β-谷甾醇(化合物5)、苯甲酸(化合物6)、对羟基苯甲醛(化合物7)。

1 仪器与试药

1.1 仪器 DPX-400核磁共振仪(瑞典Bruker公司)；APEX Ⅱ型傅立叶变换离子回旋质谱仪(美国赛默飞公司)；X4显微熔点测定仪(天津广普光学仪器有限公司)；RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂生产)；YZF-6250型真空干燥箱(上海姚氏仪器设备有限公司)；BPG-9030BH型电热恒温鼓风干燥箱(上海和呈仪器制造有限公司)；SZF-2005B型循环水式多用真空泵(巩义市英华仪器有限公司)；J-HH-2A型精密数显恒温水浴锅(陆冠森生物科技上海有限公司)。

1.2 试剂 柱层析填料Toyopearl HW-40(日本TOSOH公司)；PharmadexLH-20安玛硅胶H(青岛海洋化工厂100-200目)；薄层层析硅胶G(岛海洋化工厂)，所用化学试剂均为分析纯(天津市化学试剂三厂)。

1.3 药材 研究所用的鸭公树子药材采自湖南省郴州市汝城县，经广东省药品食品检验研究院王华主任中药师鉴定为樟科植物鸭公树(NeolitseachuiiMerr.)的种子。药材标本保存于南方医科大学中医药学院中药标本室。

2 方法与结果

2.1 提取分离 取干燥鸭公树子药材5.0 kg，95%乙醇连续回流提取2次，第1次加乙醇10倍量回流2 h，第2次加乙醇5倍量回流2 h，分别过滤，合并滤液，浓缩至稠膏至无醇味，称其重量为398.2 g，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，分别的到石油醚部位(38.4 g)，乙酸乙酯部位(224.6 g)。将乙酸乙酯部位回收溶剂，浓缩，利用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20等柱层析及制备薄层层析等方法对各部位进行分离纯化得单体化合物。从鸭公树子乙酸乙酯部位中共分离得到7个化合物，利用传统的化学鉴定法结合各种光谱技术鉴定了7个化合物的结构。

2.2 结果 化合物1～7结构(a.球松素、b.银松素、c.槲皮素、d.山柰酚、e.β-谷甾醇、f.苯甲酸、g.对羟基苯甲醛),如图1所示。

化合物2：无色晶体，分子式为C14H12O2，易溶于丙酮。UV(365 nm)显天蓝色荧光，FeCl3-K3[ Fe(CN)6] 反应显蓝色。EI-MS(m/z)：296(M+)。1H-NMR(Acetone-d6)δ：7.52(2H，d，J=7.3 Hz，H-2′，6′)，7.41(2H，d，J=7.4 Hz，H-3′，5′)，7.11(1H，t，J=7.3 Hz，H-4′)，6.42(2H， d，J=2.0 Hz，H-2，6)，6.29(1H，t，J=2.0 Hz，H-4)。6.93(1H，t，J=6.5 Hz，H-8)。13C-NMR(Acetone-d6)δ：139.5(C-1)，104.3(C-2，6)，158.2(C-3，5)，101.5(C-4)，128.6(C-7)，129.0(C-8)，136.8(C-1′)，128.1(C-2′，6′)，127.1(C-3′，5′)， 127.5(C-4′)，以上数据与与报道的银松素数据[ 4]基本一致，鉴定为银松素。

化合物3：黄色晶体，分子式为C15H10O7，mp312～314 ℃，易溶于甲醇，FeCl3反应为阳性，盐酸-镁粉(Mg-Hcl)反应显红色。EI-MS(m/z)：302(M+)。1H-NMR(CDCl3)δ：12.10(1H，s，5-OH)，6.15(1H， d， J=2.4 Hz，H-6)，6.44(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，7.80(1H，d，J=2.5 Hz， H-2′)， 6.90(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，7.59(H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6′)。13C-NMR(CDCl3)δ：126.8(C-1)，146.6(C-2)，137.1(C-3)，176.3(C-4)，156.2(C-5)，98.9(C-6)，164.9(C-7)，95.3(C-8)，164.0(C-9)，104.1(C-10)，123.2(C-1′)，114.8(C-2′)，146.1(C-3′，4′)，115.8(C-5′)，122.2(C-6′)。以上数据与文献[5-6]报道基本一致，鉴定为槲皮素。

化合物4：淡黄色粉末，分子式为C15H10O6，mp.274～277 ℃，易溶于甲醇和乙醇。盐酸-镁粉反应阳性， 三氯化铁反应阳性， 浓硫酸-α萘酚(Molish)反应阴性。EI-MS(m/z)：286(M+)。1H-NM R(DMSO-d6)δ：6.16(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.36(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.90 (2H，d，J=8.9 Hz， H-3′，5′)，8.09(2H，d，J=8.9 Hz，H-2′，6′)，5.11(1H，d，J=7.2Hz，H-1′)。13C-NMR(DMSO-d6)δ：148.3(C-2)，135.8(C-3)，179.2(C-4)，161.5(C-5)，99.1(C-6)，165.8(C-7)，94.3(C-8)，126.8(C-1′)，104.3(C-4′)，129.1(C-2′，6′)，114.9(C-3′，5′)。以上光谱数据与文献[7-8]报道的山柰酚基本一致，故鉴定为山柰酚。

化合物5：白色粉末，分子式为C29H50O，mp.138～140 ℃，易溶于丙酮。硫酸-茴香醛反应显紫色。EI-MS(m/z)：414.7(M+)。1H-NM R(CDCl3)δ：3.47(1H，m，H-3)，5.32(1H，m，H-6)，0.63(3H，s，H-18)，1.01 (3H，s，H-19)，0.95(3H，d，J=6.3 Hz，H-21)，0.83(3H，d，J=6.3 Hz，H-27)，0.86(3H，t，J=7.2Hz，H-29)。13C-NMR(CDCl3)δ：36.9(C-1)，31.3(C-2)，71.7(C-3)，42.1(C-4)，141.1(C-5)，121.9(C-6)，31.3(C-7)，31.7(C-8)，49.8(C-9)，36.2(C-10)， 20.4(C-11)，40.2(C-12)，42.1(C-13)，57.2 (C-14)，22.9(C-15)，27.8(C-16)，55.9(C-17)，11.9(C-18)，19.6(C-19)，36.3 (C-20)，18.4(C-21)，34.6(C-22)，25.9(C-23)，46.1(C-24)，28.8(C-28)，12.1(C-29)。以上数据与文献[9-10]报道的β-谷甾醇数据一致，故鉴定化合物5为β-谷甾醇。

化合物6：白色针状晶结晶，分子式为C6H5COOH，mp.120～123 ℃，易溶于乙醇和乙醚。EI-MS(m/z)：122(M+)。1H-NMR(Me2CO-d6)δ：7.44(2H，t，J=7.5 Hz，H-3，5)，7.99(2H，d，J=7.5 Hz，H-2，6)，7.65(1H，t，J=7.5 Hz，H-4)。13C-NMR(Me2CO-d6)δ：129.8(C-1)，128.5(C-3，5)，134.9(C-4)，140.1(C-2，6)。以上数据与文献[11-12]报道的苯甲酸一致，故鉴定化合物6为苯甲酸。

化合物7：油状液体，分子式为C7H6O2，淡黄色，有气味。1H-NM R(CD3OD)δ：7.77(2H，d，J=9.0 Hz，H-2，6)，6.96(2H，d，J=8.5 Hz，H-3，5)，9.82(1H，s，H-7)。13C-NMR(CD3OD)δ：130.1(C-1)，117.3(C-3，5)，133.2(C-2，6)，165.0(C-4)。以上数据与文献[13-14]报道的对羟基苯甲醛一致，故鉴定化合物7为对羟基苯甲醛。

3 结论和讨论

研究从中药鸭公树子乙酸乙酯部位分离得到7个单体化合物，经分析化合物结构类型，其主要为黄酮类、二苯乙烯类、芳香族类、甾体类等；在分离得到的单体化合物中，化合物1、3、4为黄酮类化合物，化合物2为二苯乙烯类化合物，化合物5为甾体类化合物，化合物6和7为小分子芳香族类化合物，所有化合物1～7均为首次从鸭公树子中分离得到。

现代药理学研究表明，球松素能减轻脂多糖对细胞的损伤，抑制干细胞成脂分化，对消化性溃疡疾病(胃溃疡、十二指肠溃疡)的防治具有积极的意义[15]。本研究可为进一步阐明鸭公树子药材药效作用的物质基础和建立质量标准提供一定参考，同时也为鸭公树子药材资源的开发利用提供科学的依据。