Xpert MTB/RIF在肺结核诊断中的应用探究
2019-10-14陆小玲
陆小玲
214500江苏省靖江市第二人民医院结核科,江苏镇江
耐多药结核分枝杆菌的出现为临床治疗结核病增加了难度,治疗结核的药物选择依赖于药敏试验结果,因传统药敏试验所需要的时间较长,临床医生多采用常规一线抗结核药物进行治疗,在经验治疗过程中耐多药结核分枝杆菌应用常规抗结核药物无效,最终导致病情延误[1]。临床中急需快速准确的药敏试验筛查耐多药结核分枝杆菌,从而尽早制定有效的临床治疗方案。Xpert MTB/RIF也被简称为Xpert法,是一种基因扩增技术,被用于检测结核分枝杆菌DNA 和利福平耐药基因,检测过程在一个反应盒中进行,检测时间均不超过2 h,能够有效提高利福平耐药性的特异性和灵敏度[2]。本次研究收集80 例痰标本培养检出结核分枝杆菌菌株,用Xpert MTB/RIF和药敏试验进行检测,以药敏试验作为金标准评价Xpert法检测耐药性准确性。
资料与方法
收集我院2017年8月-2018年12月进行痰培养检出结核分枝杆菌菌株80例。
仪器和试剂:采用Xpert MTR/RIF反应盒、GeneXpert检测系统、SR痰培养处理液,检测仪器为全自动分枝杆菌检测药敏系统,MGIT 分枝杆菌培养管,MGIT药敏试剂盒。
检测方法:采用Xpert MTB/RIF检测和结核液体药敏试验检测,比较2 种诊断检测方法对利福平耐药性阳性检出率的一致性,利福平耐药结核杆菌诊断指标的可行性。患者充分漱口后用力咳痰,收集下呼吸道痰液并及时送样检查,一式三份,分别采用抗酸染色涂片镜检、Xpert MTB/RIF 技术检测、罗氏固体培养法检测。抗酸染色涂片和罗氏土体培养检测相关试剂均由仪器供应商提供,并参考《结核病实验室标准化操作与网络建设》中的相关规程[3],Xpert MTB/RIF 检测试剂由仪器厂家提供,参照说明书步骤严格操作。
临床观察:比较抗酸染色涂片镜检、Xpert MTB/RIF 技术检测、罗氏固体培养法检测利福平耐药性阳性检出率[4]。
统计学方法:数据应用SPSS 2.1软件处理;计数资料以[n(%)]表示,采用χ2检验;P<0.05为差异有统计学意义。
表1 3种检验方法检出阳性率比较
结 果
80 份痰样本,抗酸染色涂片法检测,阳性率为31.25%;罗氏固体培养法检测,阳性率为37.5%;Xpert MTR/RTF法检测,阳性率为41.25%。Xpert MTR/RTF 法阳性检出率明显高于抗酸染色涂片法和罗氏固体培养法,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
讨 论
肺结核为发病率较高的传染性疾病,全球的感染率和死亡率均较高,直接威胁人类健康和生命安全,是医学界关注的重点问题[5]。世界卫生组织在《全球结核病报告》中指出,我国肺结核患者数量在全球范围内较高,我国肺结核病的防治工作依然是我国公共卫生的重要部分。
结核分枝杆菌是导致结核病的主要病原微生物,其可侵犯全身各器官,以肺部感染患者数量最多。结核分枝杆菌的生长速度较慢,在感染后18 h 才能分裂一代,而大多数细菌在几分钟或几十分钟就可分裂一代,导致结核杆菌因起病较慢而被临床患者所忽略,结核杆菌这一特点为临床检验带来困难。目前对结核病检验的实验室方法多种多样,但临床检验效果并不一致,在《全国结核病防治规划》中指出[6],通过应用新方法和新技术提高患者临床检出水平,对结核病的传播和疾病管理起到重要作用。目前结核病的诊断倾向于“眼见为实”的细菌学检查和影像学检查方法。抗酸染色镜检查是最基础和最有效的诊断方法,但是该种方法的灵敏度较低,一般在20%~30%;荧光染色法镜下检测的灵敏度较高,但由于检测仪器价格较昂贵不能在临床中广泛普及。涂片镜下检测方法的特异性和敏感性波动较大,无法区别死菌或活菌。罗氏固体培养检测法是目前结核病诊断的金标准,通常临床检测多采用涂片镜下检测方法作为临床用药依据,但是涂片检测培养时间较长,需要4~8 周才能得出结果,临床实用型较差,并且阳性率仅在40%左右。另外细菌学检查还对检测人员和环境的生物安全构成威胁。
近些年随着分子生物学技术的不断发展,该技术给结核病的检查带来了新方向,Xpert MTB/RIF 检测作为结核病的主要诊断方法,通过荧光定量PCR技术,实现对结核杆菌的快速检测并进行定量分析,并且对利福平耐药情况给予参考,整个检测结果在2 h 内完成,人工操作时间不超过5 min,并且检测均在密封环境中进行,减少了检测操作者和对环境生物性的影响,提高了检测安全性。本次研究结果显示,80 份痰样本,Xpert MTR/RTF 法阳性检出率明显高于抗酸染色涂片法和罗氏固体培养法。说明Xpert MTR/RTF法在肺结核快速诊断中具有较好的效果,并且阳性检出率高于抗酸染色检测方法。
综上所述,Xpert MTB/RIF 检测肺结核患者痰样本的敏感性较高,效果明显优于罗氏固体培养法和抗酸染色涂片法,利于临床诊断和治疗,值得在临床中广泛应用。