α甲酰基辅酶A消旋酶在结直肠癌中的表达及临床意义

陈萍 万霞 刘琼茹

[摘要]目的 研究α甲酰基辅酶A消旋酶（P504S）在结直肠癌（CRC）和正常结直肠黏膜中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测江门市中心医院2017年1～12月共77例首发CRC手术根治切除标本和30例癌旁正常黏膜中P504S的表达水平。结果 P504S在CRC中的阳性表达率为76.6%（59/77），显著高于正常大肠黏膜组织的3.3%（1/30），差异有统计学意义（P<0.01）。P504S在高-中分化腺癌中的阳性表达率为93.1%（54/58），显著高于低-未分化腺癌中的26.3%（5/19），差异有统计学意义（P<0.01）;P504S在浸润深度为T1+T2中的阳性表达率为73.1%（19/26），在浸润深度为T3+T4中的阳性表达率为78.4（40/51），两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）;有淋巴结转移CRC中P504S的阳性表达率为83.3%（40/48），无淋巴结转移CRC中的阳性表达率为65.5%（19/29），两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 P504S参与介导CRC的发生发展进程，对CRC进展、预后及指导肿瘤的术后辅助治疗有重要的临床意义。

[关键词]结直肠肿瘤;P504S;免疫组织化学;临床意义

[中图分类号] R735.3+          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2019）7（c）-0012-03

[Abstract] Objective To study the expression and clinical significance of α-methylacyl-CoA racemase （P504S） in colorectal cancer （CRC） and normal colorectal mucosa. Methods Immunohistochemical method was used to detect the expression level of P504S in 77 specimens with primary CRC resection and 30 cases of adjacent normal mucosa from January to December 2017 in Jiangmen Central Hospital. Results The positive expression rate of P504S in CRC was 76.6% （59/77）， which was significantly higher than 3.3% （1/30） in normal colorectal mucosa， and the difference was statistically significant （P<0.01）. The positive expression rate of P504S in high-medium differentiated adenocarcinoma was 93.1% （54/58）， which was significantly higher than that in low-undifferentiated adenocarcinoma accounting for 26.3% （5/19）， and the difference was statistically significant （P<0.01）. The positive expression rate of P504S in infiltration depth of T1+T2 was 73.1% （19/26）， and the positive expression rate in infiltration depth of T3+T4 was 78.4 （40/51）， and the difference was not statistically significant （P>0.05）. The positive expression rate of P504S in CRC with lymph node metastasis was 83.3% （40/48）， the positive expression rate in CRC without lymph node metastasis was 65.5% （19/29）， and the difference was not statistically significant （P>0.05）. Conclusion P504S is involved in mediating the development of CRC， and it has important clinical significance for the progression， prognosis and postoperative adjuvant therapy of CRC.

[Key words] Colorectal neoplasms; P504S; Immunohistochemistry; Clinical significance

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一，近年来世界范围内的发病率逐年上升，位于恶性肿瘤的第3位[1-2]。随着人们饮食习惯、生活结构的变化以及环境的影响，其发病率和死亡率仍在继续增加[3-4]。多项研究证实CRC的发生和发展是多种因素及一系列基因共同作用的结果[5-7]，但其内在的发病机制和具体的信号转导通路仍未彻底阐明，還需要进一步探索。

α甲酰基輔酶A消旋酶（α-methylacyl-CoA racemase）也被称为P504S，其是胞质内一种参与脂肪酸的β氧化和衍生过程的蛋白质，是目前公认的用于前列腺癌诊断高度敏感和特异性的标志物[8-9]。多项研究表明，PS04S在其他许多正常组织和肿瘤组织中也呈阳性表达，但PS04s在正常结直肠黏膜及其肿瘤中的表达研究较少且研究结果不甚一致[10-12]。本研究应用免疫组化检测CRC中PS04s的表达及临床意义，现报道如下。

1材料与方法

1.1材料

收集江门市中心医院2017年1～12月首发CRC手术根治切除标本77例，且病理标本经HE染色确诊为CRC患者的石蜡切片和蜡块，术前均未接受化疗，其中男41例，女36例，年龄37～84岁，平均（58.0±5.7）岁。参照WHO推荐的分化分级标准[13]，其中高-中分化腺癌58例，低-未分化腺癌19例;浸润深度T1+T2 26例，T3+T4 51例;有淋巴结转移48例，无淋巴结转移29例。同时选取CRC周围正常黏膜组织30例。本研究经江门市中心医院医学伦理委员会审核批准。

1.2方法

所有标本经10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋。以4 μm厚度切片，1张行HE染色，1张以PBS溶液代替一抗进行阴性对照，1张行P504S免疫组化染色。选用确切阳性的前列腺癌组织切片作阳性对照，P504S单克隆抗体和SP免疫组化试剂盒均购自福州迈新公司，常规SP法染色。所有实验步骤均按说明书操作。

1.3染色结果判定标准

免疫组化阳性染色为细胞质内弥漫淡黄、棕黄色颗粒，采用半定量积分法判断结果[10]，具体如下。①阳性细胞数≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分;②阳性强度无色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。将①②两者积分相乘，0分为阴性（-），1～4分为弱阳性（+），5～8分为阳性（++），9～12分为强阳性（+++）。

1.4统计学方法

采用SPSS 16.0统计学软件进行数据分析，计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 P504S在正常大肠黏膜组织与CRC中的表达情况

P504S在CRC中的阳性表达率为76.6%（59/77），显著高于正常大肠黏膜组织的3.3%（1/30），差异有统计学意义（P<0.01）（表1、图1，见封三）。

2.2 P504S在各项不同临床病理特征CRC中的表达情况

P504S在高-中分化腺癌中的阳性表达率为93.1%（54/58），显著高于低-未分化腺癌中的26.3%（5/19），差异有统计学意义（P<0.01）;P504S在浸润深度为T1+T2中的阳性表达率为73.1%（19/26），在浸润深度为T3+T4中的阳性表达率为78.4（40/51），两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）;有淋巴结转移CRC中P504S的阳性表达率为83.3%（40/48），无淋巴结转移CRC中的阳性表达率为65.5%（19/29），两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表2）。

3讨论

P504S是一种存在线粒体和过氧化物酶体特异性分子标志物，在脂肪酸及其衍生物的β氧化过程中起作用，多项研究表明P504S可能与肿瘤的发生、发展存在密切关系[14-16]。P504S标志物最早应用于前列腺癌的免疫组织化学诊断，是目前公认前列腺癌的高度敏感和特异的标志物。越来越多研究显示，P504S在乳头状肾细胞癌、尿路上皮癌、乳腺癌、肺癌及喉癌等其他许多肿瘤组织中也呈阳性表达，而且其表达水平与肿瘤的生物学行为及预后有关[17-19]。

Jiang等[20]研究242例结肠肿瘤中P504s表达水平，发现P504S在高、中分化结肠腺癌和腺瘤中表达阳性率分别是76%、75%和79%，在增生性息肉和正常黏膜中呈低表达，阳性率只有4%。国内文献报道显示，P504S在CRC高中分化组和低分化组表达率分别为85.7%和25.0%[11]。本研究结果显示，P504S在CRC和正常结直肠黏膜中的表达率分别为76.6%和3.3%，并且P504S在CRC高-中分化组和低-未分化组表达率分别为93.1%和26.3%，这与国内外文献报道相一致[11，15]，进一步提示P504S与CRC的发生发展密切相关。P504S在CRC低-未分化组的阳性表达率显著低于高中分化组可能存在以下两个原因：①P504S可能仅在CRC发生的起始阶段起作用，参与CRC早期癌变的细胞信号转导通路，一旦该信号因子启动，在肿瘤的发展进程中便不再发挥作用;②高-中分化CRC与低-未分化CRC的发生发展由各自不同的信号因子参与介导，并且P504S在高-中分化CRC中发生发展中作用更明显。

国内文献报道显示，P504S与CRC浸润深度和Duke′s分期有关，与淋巴结有无转移无关[10]，而本研究结果显示，P504S与CRC浸润深度、有无淋巴结转移均无关（P>0.05），其结果不甚一致提示可能与标本选择、检测方法以及肿瘤类型不同有关，其实际情况如何相信随着笔者研究的进一步深入会得以阐明。

综上所述，P504S在CRC发生发展进程中发挥重要作用，可应用于肿瘤早期诊断和筛查，判定肿瘤患者的预后及肿瘤复发等方面，并可作为CRC进展、预后及指导肿瘤的术后辅助治疗，并为肿瘤基因靶向治疗提供新的方向。

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（收稿日期：2019-01-11  本文編辑：任秀兰）