食品中着色剂的提取方法改进研究

□ 吴林阳 遂宁市检验检测有限公司

1 材料和方法

1.1 材料

碱性甲醇溶液（5%）：取950.0 mL甲醇溶液，加入50.0 mL氨水，混合均匀。

50%甲醇水溶液：取250.0 mL甲醇，加入250.0 mL超纯水，混合均匀。

1.2 方法

1.2.1 改进法

称取具有代表性的样品5 g于50 mL离心管中，加入10.00 mL碱性甲醇溶液，超声波提取15～20 min，6 000 r/min离心5 min收集提取液，重复提取2～3次，合并提取液，45 ℃氮气吹干，准确加入2.00 mL50%甲醇水溶液溶解定容，经0.45 μm微孔滤膜过滤，进高效液相色谱仪分析。

1.2.2 国标法

聚酰胺吸附法：样品溶液加柠檬酸溶液调pH到6，加热至60 ℃，将1 g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60 ℃ pH为4的水洗涤3～5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3～5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3～5次，直至色素完全解吸，收集解吸液，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5.0 mL。经0.45 μm微孔滤膜过滤，进高效液相色谱仪分析[1]。

1.3 色谱条件

流动相：A乙腈、B乙酸（1.0%）；柱温：35 ℃；波长：254 nm；流速：1.0 mL/min； 进 样 量：10 μL； 以1.0 mL/min的流速梯度洗脱；0～8 min，B：60%；8～18 min，B：0%；18～30 min，B：60%。

2 结果与讨论

2.1 两种方法的比较

对样品中6种着色剂（柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄及赤藓红）加标样0.50 μg，用两种提取方法做平行检测，其检测结果平均值见表1。由表1可见，改进方法好于国家标准方法的测定结果，柠檬黄加标回收率为94%～98%；胭脂红加标回收率在92%～104%；苋菜红加标回收率为9%4～100%；日落黄加标回收率为94%～106%；新红加标回收率为96%～102%；赤藓红加标回收率为98～102%。

表1 两种提取方法结果

2.2 讨论

用碱性甲醇溶液将提取的样品pH调成碱性有利于色素的提取。氨水加热氮吹时容易挥发分离，甲醇溶液可以使样品中蛋白质变性且絮凝沉淀，通过高速离心分离，着色剂易溶于甲醇中达到提取分离的目的，每次甲醇提取色素的量因产品不同而不同，提取次数还需根据实验情部而定。