富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长性能的影响

2019-09-02殷成港金楚砚

延边大学农学学报 2019年2期

殷成港，金楚砚，于磊，张敏

(延边大学农学院，吉林延吉 133000)

随着人们生活水平的提高，畜产品品质越来越受公众关注[1]。调查发现，使用抗生素会导致病原菌产生耐药性和抗药性，动物的免疫能力降低，同时也会影响未来畜禽及人类疫病的控制[2]。目前,市场上有很多种饲料添加剂可以改善猪的免疫系统，调节猪肠道微生物菌群，减少仔猪断奶环境应激[3]。断奶是仔猪生长发育过程中的一个重要环节，营养和环境等生长条件的改变对仔猪造成极大应激，断奶应激会造成仔猪胃肠道黏膜损伤[4]，引起消化吸收障碍和腹泻, 是现代养猪生产中面临的主要问题。近年来，国家饲料法规直接限制了抗生素在养殖业上的使用，因此抗生素替代产品的研究就备受关注。中药以天然性、多功能性、来源广泛、毒副作用低和不易产生耐药性等优点而得到医学界的普遍认可, 在饲料添加剂领域具有巨大潜力[5-6]。近年发现，负离子制剂是可以提高动物免疫力的新型矿物质，维生素C是一种常见的饲料添加剂，具有抗氧化和抗应激等功能[7]。此试验特将维生素C、中药和负离子矿物质制成复合制剂，添加于断奶仔猪饲料中，以研究其对断奶仔猪生产性能及相关指标的影响，以便于在生猪无抗养殖生产中应用推广。

1 材料与方法

1.1 材料

试验所用富维生素C中药负离子复合制剂由延边大学动物营养实验室自制。通过纳米技术对矿物质进行特殊加工，得到负离子制剂。所用中药主要有大枣、陈皮、白术和维生素C等，大枣∶陈皮∶白术∶维生素C∶负离子制剂比例为2∶3∶2∶1∶2，混合均匀制得富维生素C中药负离子复合制剂。

1.2 试验设计

试验在图们富岩生态养殖场完成。试验随机选取60头健康无病、日龄相近，血缘关系一致、体重为(8±0.77) kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪，按公母各半随机分为对照组和试验组，每组30头，设3个重复，每个重复10头。对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂基础日粮+0.5%富维生素C中药负离子复合制剂。试验期共49 d，预饲期7 d，正式试验期42 d，试验分3个阶段，每个阶段为14 d。基础日粮营养成分见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平Table 1 Basic dietary compostition and nutrient level

注：4%预混料含维生素A 154 000 IU/kg、维生素D323 000 IU/kg、维生素E 291 IU/kg、维生素B139 mg/kg、维生素B288 mg/kg、维生素B614.7 mg/kg、维生素B120.30 mg/kg、维生素K374 mg/kg、泛酸钙218 mg/kg、烟酰胺510 mg/kg、叶酸75 mg/kg、铁13 g/kg、铜3.5 g/kg、锌3.4 g/kg、锰3.3 g/kg、碘11.8 mg/kg。

1.3 饲养管理

在开始试验前，对猪舍的设备进行维修，对猪舍进行全面彻底的清扫、洗刷，最后进行消毒。试验期间仔猪自由饮水，确保水源清洁，水量充足。每天清扫圈舍2次，及时清扫漏粪地板及床下粪便，保持料槽清洁，保证圈内外清洁，圈舍自然通风，防止氨气味过大及舍内蚊虫的滋生。随时观测舍内温度，做好保暖措施。试验期间对各组仔猪采食情况进行记录，试验结束时对仔猪停食1次空腹称重，并记录相关数据。试验组除日粮中添加0.5%富维生素C中药负离子复合制剂外，其他饲养管理与对照组相同。

1.4 样品的采集与分析方法

1) 饲料样的采集：在换料前1 d用四分法采集适量饲料样品，连续采集3 d并在65 ℃烘干48 h，回潮24 h，然后粉碎过40目筛，并将其储存在密封袋后置于冰箱中，用于常规分析的检测。

2) 消化试验粪样的采集：采用全收粪法。从换料前1 d开始，从对照组及试验组猪随机选取4头猪(公母各半)，采取24 h全收粪，每天早晨定时收取粪样。每天收集的新鲜粪样置于灭菌管中，将鲜粪混合均匀后取总量的10%，加入15滴左右10%硫酸溶液固氮，置于烘干箱，以60～70 ℃鼓风烘干，粉碎后保存。

3) 菌群测定试验粪样的采集：在每种饲料饲喂结束时，将灭菌棉棒插入猪直肠中并内刮下内容物，置于灭菌后的容器中低温保存。

4) 血样的采集：仔猪采血前12 h，应清理料槽内剩余饲料，保证采血时仔猪处于空腹状态。从前腔静脉采15 mL血液，并将5 mL血液注入肝素钠抗凝采血管中。将10 mL注射到普通采血管中，静置30 min，然后以3 500 r/min于离心机中离心15 min，抽取血清，-20 ℃保存，用于血清指标的检测。每组各随机抽取5头进行取样。

1.5 测定指标及方法

1) 生长性能指标的测定：试验期间每天准确记录各组仔猪的采食量。于试验正式期的第1天、第14天、第28天和第42天对仔猪进行空腹称重，在试验结束时综合统计数据，结算各组饲料消耗量。相关公式如下：

2) 激素的测定：采用酶联免疫试剂盒测定，试剂盒采购于南京建成生物技术有限公司

3) 表观消化率的测定：通过采集的粪样以及饲料样品，对其中相关营养物质的表观消化率进行测定。测定方法及相关公式如下：

①水分的测定：105 ℃恒重法测定。

②粗蛋白的测定：半微量凯氏定氮法测定。

③粗脂肪的测定：索氏脂肪抽提法测定。

④灰分的测定：灼烧重量法测定。

4) 腹泻率及死亡率的测定：每天早、中、晚观测仔猪排粪情况，看粪便的外观(形状及颜色)、含水量都是否正常，记录腹泻仔猪头数。

5) 粪便中微生物菌群的测定：①稀释：将灭菌棉棒插入猪直肠中并内刮下内容物，放入无菌离心管，加10倍体积的无菌稀释液。剧烈震荡，充分溶解，逐级稀释至10-6。每个样品选择10-4、10-5、10-6等3个稀释度，由高稀释度开始稀释，配制成相应稀释液，每个稀释度3个平板。②培养：将粪样的稀释液接种于相应的选择性培养基中(乳酸菌用MRS培养基；大肠杆菌用麦康凯培养基)。大肠杆菌在37 ℃有氧培养24 h，乳酸菌在37 ℃有氧培养36 h。每个梯度重复3次后取平均值，细菌数用[1 g(CFU/g)]表示。

1.6 数据与分析

试验数据先用WPS2016工作表预处理，后采用SPSS22.0统计处理软件对所得数据进行单因素方差分析，试验数据用平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长性能的影响

富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长性能的影响见表2。

表2 富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长性能的影响Table 2 Effect of rich vitamin C traditional Chinese medicine anion compound preparation on growth performance of weaned piglets

注：同一行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，肩标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)，下同。

由表2可知，断奶仔猪平均日增重，试验组与对照组相比，在1～14 d相对提高18.07%,差异极显著(P<0.01)，29～42 d 相对提高6.65%,差异显著(P<0.05)，全期相对提高7.37%,差异显著(P<0.05)。试验组的料重比与对照组相比，1～14 d相对降低了5.4%,差异显著(P<0.05)，29～42 d 相对降低了9.35%,差异显著(P<0.05)，全期相对降低了7.07%,差异显著(P<0.05)。从断奶仔猪的平均日增重和料重比可以看出，富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长性能具有明显的促进作用。

2.2 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长激素的影响

由表3数据对比可知，与对照组相比，试验组生长激素GH含量提高了16.42%,呈极显著提高(P<0.01)；甲状腺素T4含量与对照组比，提高了5.59%,差异显著(P<0.05)。富维生素C中药负离子复合制剂具有促进断奶仔猪生长激素和甲状腺素T4提高的作用。

表3 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长激素影响

2.3 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪应激激素影响

由表4可知，试验组皮质醇COR与对照组相比降低了27.89%,差异极显著(P<0.01)，促肾上腺皮质激素ACTH、胰岛素INS、胰岛素生长因子IGF-1两组间均无显著性差异(P>0.05)。富维生素C中药负离子复合制剂可明显降低断奶仔猪的应激反应。

表4 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪应激激素的影响Table 4 Effect of dietary supplementation of vitamin C-rich Chinese medicine anion complex on stress hormone in weaned piglets

2.4 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪表观消化率的影响

由表5数据对比可知，与对照组相比，第1阶段试验组粗灰分表观消化率提高了13.40%，差异极显著(P<0.01)，试验组干物质表观消化率提高了8.75%，差异显著(P<0.05)。第2阶段试验组粗脂肪表观消化率提高了8.87%，差异显著(P<0.05)。说明富维生素C中药负离子复合制剂可明显提高矿物质、脂肪的消化率。

表5 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪表观消化率的影响Table 5 Apparent digestibility of traditional Chinese medicine anion complex preparations supplemented with vitamin C (%)

2.5 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪腹泻率及死亡率影响

由表6数据对比可知，整个试验阶段仔猪无死亡情况。与对照组相比，3个试验阶段中试验组腹泻率较对照组都有下降趋势，其中第2阶段试验组较对照组腹泻率降低了18.46%，差异极显著(P<0.01)。富维生素C中药负离子复合制剂具有降低断奶仔猪腹泻率的作用。

表6 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪腹泻率及死亡率影响Table 6 Effect of dietary supplementation of vitamin C-rich Chinese medicine anion complex on diarrhea rate and mortality in weaned piglets (%)

2.6 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪粪便菌群的影响

由表7数据对比可知，与对照组相比，乳酸菌在1～14 d提高了11.18%，15～28 d提高了13.87%，差异均极显著(P<0.01)。大肠杆菌在15～28 d降低了9.76%,差异显著(P<0.05)。富维生素C中药负离子复合制剂具有促进乳酸菌增殖、抑制大肠杆菌繁殖的作用。

表7 日粮中添加富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪粪便菌群的影响

3 讨论

赵红梅等[8]以党参、紫苏等中草药为原料,通过超微粉碎后添加到断奶仔猪日粮中，发现可以促进仔猪采食，降低料重比进而提高了断奶仔猪的日增重。孔祥峰等[9]利用早期断奶仔猪试验,研究了中药饲料添加剂对断奶仔猪血清生化指标和生长性能的影响,结果表明，该中药添加剂能够显著提高早期断奶仔猪的采食量，降低料重比。葛洪伟等[10]研究了中药饲料添加剂对早期断奶仔猪生长性能的影响,结果也表明中药饲料添加剂可降低料重比，对断奶仔猪增重有明显作用。本试验中的试验组仔猪平均日增重显著提高，料重比显著降低，平均日采食量也有增加趋势。与上述研究的结果一致，从断奶仔猪的平均日增重和料重比可以看出，富维生素C中药负离子复合制剂对断奶仔猪生长性能具有明显的促进作用。

生长激素GH可以促进动物发育以及细胞的增殖。翟向和等[11]利用中药添加剂饲喂“冀合白猪”，日粮中添加2%的中药时，试验组猪血清GH浓度显著高于对照组，同时甲状腺素含量也显著升高。本试验中的试验组生长激素GH含量呈极显著提高，甲状腺素T4含量呈显著提高，与上述报道结果一致，因此可以说明富维生素C中药负离子复合制剂具有促进断奶仔猪生长激素和甲状腺素T4提高的作用。

应激对动物的免疫机能产生广泛的影响[12]。断奶仔猪对周围环境、温度等因素的变化非常敏感，容易引起仔猪的应激反应,造成持续性腹泻、生长迟缓、营养不良等,严重时还会引起死亡。由于应激时血清皮质醇水平升高,抑制了甲状腺素、生长激素等促进淋巴细胞增殖、免疫系统发育类激素的合成和分泌[13]。本试验中的试验组皮质醇COR与对照组相比显著降低，促肾上腺皮质激素ACTH、胰岛素INS、胰岛素生长因子IGF～1两组间均无显著性差异，与上述报道结果一致。富维生素C中药负离子复合制剂可明显降低断奶仔猪的应激反应。

仔猪断奶时肠道结构尚未完全发育,消化腺分泌各种消化酶不足且活性较低,难以对饲料中的营养充分消化吸收[14];Van Beers-Schreurs等[15]研究表明,仔猪断奶会引起小肠形态结构发生变化,如隐窝深度，绒毛萎缩和绒毛长度的增加,这些变化会将肠道的吸收面积减少。中药制剂能够促进肠道蠕动,使肠壁绒毛增长,同时中药刺激消化腺,增加消化液的分泌量,激活蛋白酶、脂肪酶等酶的活性[16]。游玉波等[17]研究表明,将山楂、苍术、甘草以及神曲等中药粉剂按一定比例加入到饲粮中,可以提高生长猪对饲料干物质、粗蛋白、粗灰分以及粗纤维的表观消化率。本试验中第1阶段试验组粗灰分表观消化率极显著提高，试验组干物质表观消化率显著提高。第2阶段试验组粗脂肪表观消化率显著提高，与上述报道结果相似，富维生素C中药负离子复合制剂可明显提高矿物质、脂肪的消化率。

仔猪幼小,机体调节能力差,脾胃发育未成熟,易受湿邪侵袭,水湿纳运失常,湿热互结,可致肠道功能紊乱从而导致腹泻[18]。中草药饲料添加剂提高仔猪日增重,改善饲料的适口性，提高采食量，增强肠道酶活性，改善肠道内环境,以此提高仔猪消化吸收，从而降低腹泻率[19]。周学军采用复方中药配方，试验Ⅰ组,饲喂基础日粮2周+1%中药制剂,中草药含量10 g/kg。试验Ⅱ组,饲喂基础日粮+2%中药制剂2周,中草药含量20 g/kg。试验Ⅲ组,饲喂基础日粮。试验结果Ⅰ组、Ⅱ组仔猪腹泻率比试验Ⅲ组分别下降了32.73%(P<0.01)和22.40%(P<0.01),效果显著,差异均达0.01极显著水平[20]。本试验中，整个试验阶段仔猪无死亡情况。与对照组相比，3个试验阶段中试验组腹泻率较对照组都有下降趋势，其中第2阶段试验组较对照组腹泻率极显著降低，与上述报道结果一致。说明富维生素C中药负离子复合制剂具有降低断奶仔猪腹泻率的作用。

胃肠道健康是动物体吸收利用营养物质的先决条件。仔猪肠道作为机体的重要组成部分,承担着吸收和消化营养物质的作用,同时也能抵御病原微生物的入侵。研究表明,通过改善仔猪肠道菌群结构,达到最优化,可以有效促进机体有效吸收营养物质,降低仔猪的腹泻率[21]。本试验中，试验组乳酸菌在1～28 d极显著提高。大肠杆菌在15～28 d显著降低，与上述报道结果一致。富维生素C中药负离子复合制剂具有促进乳酸菌增殖，抑制大肠杆菌繁殖的作用。