花生油、橄榄油和猪油对小鼠血脂水平、肥胖及糖尿病易感性的影响研究

孔欠文,卫克昭,张世瑜,余宇婷,赵炎丽,张靖南,高建平

(上海中医药大学中药学院，上海 201203)

食用油是人们生活中必不可少的营养性物质，然而长期过量食用又会成为诱发心脑血管等慢性疾病的重要危险因素[1-2]。相关数据显示，与韩国、日本相比，中国高脂血症患病率占比较高，为13.1%[3]。与血脂密切相关的糖尿病同样受到关注，据国际糖尿病联盟(IDF)第六版《糖尿病指南》，2013年全球已有3.82亿糖尿病患者[4]，其中2型糖尿病(T2DM)占糖尿病90%以上[5]。在正常人与糖尿病之间存在一个可逆阶段称为糖尿病前期，研究发现该阶段人群合并有不同程度的脂代谢异常，其中以高甘油三酯血症为主[6],而血脂异常人群高血糖患病率会显著升高[7]。据统计，我国成年人血脂异常的患病率为23.1%～60.7%[8]，远高于2002年的全国水平(18.6%)[9]，并且高血脂在年轻人群也较为常见，严重影响其身体健康[10]。因此，合理膳食十分重要。日常生活中，消费者可以选择的食用油种类繁多，主要包括植物油和动物油，其中常用食用油中猪油、橄榄油和花生油是争议比较大的3种食用油。尤其是猪油因其较高的胆固醇含量、脂肪含量，被普遍认为是不好的食用油。除此外，人们对食用油的选择和进食的比例上还存在着城乡差异，城市居民植物油摄入量高于农村居民，农村居民动物油摄入量高于城市居民，尤其是贫困农村居民的动物油摄入量依然很高[11]。

基于以上问题，动物油和植物油对人类健康特别是肥胖、代谢性疾病、心血管等疾病的影响是否存在差异，以及每天摄入量与这些危害的关系，是本研究将要探明的问题。

1 材料与方法

1.1 实验材料

ICR清洁级小鼠110只，18～22 g，雄性，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，生产许可证号SCXK(沪)2012-0002，饲养在上海中医药大学动物实验中心，使用许可证号SYXK(沪)2014-0008，饲养条件温度20～26℃、湿度40%～70%、12 h/12 h阴暗光照周期。

T17-C003331倍捷型血糖仪；日立7080型全自动生化分析仪；TGL-16G-A型冷冻离心机；数显恒温水浴锅。

1.2 实验方法

1.2.1 食用油剂量选择的依据

根据《中国居民膳食指南(2016)》推荐的每天食用油的进食量不超过25～30 g的标准，但我国居民人均食用油日摄入量为42.1 g，远高于此标准，因此为研究超标准量食用油对机体的危害，本研究以该标准值及超过该标准的等效剂量作为小鼠的每天灌胃剂量。根据小鼠等效剂量计算公式(以体重计算)：小鼠等效剂量=人日摄入量(g)/60 kg×13.3，为5.5～6.7 g/(kg·d)，故设6 g/(kg·d)为本实验中的最小剂量，另设12 g/(kg·d)和18 g/(kg·d)为中、高剂量。

1.2.2 分组及模型建立

(1)动物分组和灌胃食用油：取小鼠110只，称重后随机分为11组，每组10只，分别为正常组和花生油、橄榄油、猪油各3个剂量(6、12、18 g/(kg·d))组，各剂量组每天灌胃相应量的食用油，正常组小鼠灌胃纯净水，连续灌胃64 d，期间给予动物正常进食，饮水。整个实验过程中，记录小鼠日常的一般活动状况，每周定时记录小鼠的进食量和进水量。每3 d称量体重1次，以调整灌胃量并观察体重变化。

(2)高血糖诱导：小鼠喂食64 d后，禁食不禁水12 h，测量血糖水平后，腹腔注射四氧嘧啶110 mg/kg诱导，5 h后对小鼠灌胃一次50%葡萄糖0.5 mL/只以防产生应激性低血糖。72 h后取标本测定各指标。

1.2.3 标本处理

小鼠禁食过夜，称量体重和测量体长，取血置入离心管中，4℃下3 500 r/min离心10 min，分离血清，-80℃条件下保存备用。分离肝脏、心脏称量其湿重，分离肾、睾丸和肠系膜3个脏器周围脂肪垫，并分别称重。

郡有名山水，灵运素所爱好，出守既不得志，遂肆意游遨，遍历诸县，动逾旬朔，民间听讼，不复关怀。所至辄为诗咏，以致其意焉。[10](《谢灵运传》，P1753-1754)

1.2.4 指标检测

(1)血脂水平：采用全自动生化仪测血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量，采用酶标仪检测LDL-C和HDL-C水平。

(2)肥胖：根据实验中每周测量的小鼠24 h进食量和饮水量，计算整个实验周期中平均每只小鼠的每天进食量和饮水量。计算小鼠体重指数(BMI)、肥胖指数(Lee’s指数)，肾、肠系膜和附睾周围脂肪系数。BMI=体重/体长的平方，Lee’s指数=(体重×1 000)1/3/体长，脂肪系数=脂肪垫质量/体重。

(3)心脏和肝脏相关指标：采用全自动生化仪测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性；计算肝脏指数(肝脏质量/体重)、心脏指数(心脏质量/体重)。

(4)血糖水平：采用血糖仪检测四氧嘧啶诱导前的血糖水平；采用全自动生化仪测四氧嘧啶诱导后血清中葡萄糖水平。

1.2.5 统计学处理

2 结果与讨论

2.1 3种食用油对小鼠进食量及进水量的影响(见表1)

表1 3种食用油对小鼠进食、进水量的影响

注：与正常组比较，##表示P<0.01。

从表1可见，与正常组相比，3种食用油组小鼠的进食量和进水量呈现剂量负相关，其中高剂量均使小鼠进食量明显减少(P<0.01)。

2.2 3种食用油对小鼠血脂的影响(见表2)

表2 3种食用油对小鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C含量的影响

注：与正常组比较，#表示P<0.05，##表示P<0.01，&表示0.05

从表2可见，与正常组相比，花生油对小鼠4个血脂指标无明显影响，而橄榄油除高剂量能够使小鼠TC显著降低(P<0.05)外，其对小鼠其他3个血脂指标无显著影响。猪油对血脂影响最明显，与正常组相比，中剂量和高剂量猪油能够使小鼠血清TG含量显著下降(P<0.05)，且存在明显的量效关系，低剂量猪油对小鼠血清LDL-C、TC含量具有显著降低作用(P<0.05，0.05

2.3 3种食用油对小鼠肥胖的影响(见表3、表4)

组别剂量/(g/(kg·d))体长/cm体重/gBMI/(kg/m2)Lee’s指数/(g1/3/cm)正常组-9.90±0.2933.23±0.893.39±0.203.26±0.09花生油组069.99±0.2133.44±1.123.35±0.063.24±0.041210.18±0.1334.54±0.733.33±0.133.20±0.051810.20±0.1434.33±1.833.29±0.113.18±0.03橄榄油组069.90±0.1831.95±0.933.27±0.083.21±0.04129.88±0.1132.39±0.923.28±0.073.23±0.03189.99±0.1331.90±0.613.20±0.073.18±0.04猪油组0610.29±0.1434.51±1.603.25±0.093.16±0.03129.86±0.1334.63±1.133.57±0.123.31±0.051810.00±0.1930.40±1.153.05±0.14#3.12±0.06&

表4 3种食用油对小鼠肾、肠系膜和附睾周围脂肪系数的影响

从表3可见，与正常组相比，3种食用油不同剂量组小鼠体重和体长未呈现明显差异，除高剂量猪油组小鼠的BMI和Lee’s指数与正常组相比显著下降(P<0.05,0.05

从表4可见，橄榄油对于小鼠肾、肠系膜和附睾周围脂肪系数无显著影响,而中剂量花生油和猪油均易造成小鼠附睾周围脂肪系数升高(P<0.05)，中剂量花生油组小鼠肾脏和肠系膜周围脂肪系数也有升高趋势(0.05

2.4 3种食用油对小鼠肝脏、心脏相关指标的影响(见表5)

表5 3种食用油对小鼠血清ALT、AST含量及肝脏指数、心脏指数的影响

由表5可见，与正常组相比，花生油低剂量组和猪油中剂量组小鼠血清中ALT活性均明显升高(P<0.01)，AST活性轻微升高(0.05

2.5 3种食用油对小鼠血糖的影响(见表6)

表6 灌胃64 d及四氧嘧啶诱导后小鼠的血糖水平

由表6可见，与正常组相比，经灌胃64 d后，3种食用油均引起了小鼠血糖不同程度的升高。而经过四氧嘧啶诱导后，各组血糖水平均较正常组高，其中花生油中剂量组血糖最高，其次是猪油中剂量组，但与正常组比统计学差异均不显著。说明高脂饮食造成小鼠的血糖以及对糖尿病诱发因素的敏感性升高。

2.6 讨论

不同种类油脂成分存在一定的差异，植物油含脂肪99%以上，不含胆固醇；而主要来源于猪、牛等动物油含脂肪90%左右，且含有胆固醇[12]。脂肪酸是构成食用油的重要成分，不同食用油中含有的脂肪酸种类和比例不同，故对血脂和健康影响可能存在不同。食用油中橄榄油和花生油备受推崇，认为这两种食用油富含单不饱和脂肪酸(如油酸等) 可以降低血脂[13]，而动物油中饱和脂肪酸的含量相对较高，被认为最易引起血脂升高[14]。评价血脂水平的重要指标是血清中HDL-C、LDL-C、TC和TG含量。本次实验结果显示，猪油能使小鼠血清HDL-C含量显著升高(P<0.05，0.05

对于肥胖的影响，本实验灌胃3种食用油后均未引起小鼠体重的明显增加，反而高剂量猪油引起小鼠BMI和Lee’s指数的降低(P<0.05,0.05

虽然大剂量摄入食用油并不一定会引起高血脂，但是对肝脏和心脏会造成一定的影响。花生油和猪油造成ALT和AST活性的升高较橄榄油明显，而连续大剂量进食3种食用油均容易造成心肌肥大，猪油作用最强，但量效关系不明显。提示无论是植物油还是动物油，长期超剂量食用，对心脏和肝脏都可能会造成一定的影响，特别是脂滴可能会在心脏内积聚。

流行病学资料显示，长期高脂饮食产生所谓“脂毒性(lipotoxicity) ”，促使胰岛素抵抗，糖耐量下降，由此引发了糖脂代谢紊乱，是诱发糖尿病的危险因素之一[15]。本研究中，长期高脂饮食后，小鼠血糖均升高，对糖尿病诱发因素的耐受性降低，其中橄榄油稍优于其他两种食用油，但是3种食用油没有本质区别，只要超量长期食用均能使小鼠患糖尿病的可能性增大，没有明显的量效关系。

3 结 论

通过对花生油、橄榄油和猪油影响小鼠血脂水平、肥胖及糖尿病易感性分析，得出过量进食食用油，并不一定均会引起小鼠血脂的升高和肥胖，进食量对其肥胖的影响不能忽视。长期大剂量摄入食用油，对小鼠心脏和肝脏可能会有一定的影响，易引起其心脏内脂滴积聚；高油饮食易引起其糖尿病的易感性增高。橄榄油在引起小鼠体内脂肪堆积、肥胖作用上较花生油和猪油稍弱，但这3种食用油没有本质区别，建议消费者每天除了摄入油总量不要超过25～30 g外，控制总能量的摄入及其他膳食脂肪和胆固醇的摄入非常重要。