艾滋病患者217例的骨髓细胞形态学特点
2019-08-06王晓梅白彬良
白 蕊,王 玥,黄 萱,李 宏,王晓梅,白彬良*
(1云南省红河州第一人民医院检验科,蒙自 661199;2大理学院护理部;*通讯作者,E-mail:2088313345@qq.com)
艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)又称为获得性免疫缺陷综合征。患者主要临床表现为出现全身性的机体功能衰竭症,且随着患者病程的延长,机体免疫功能逐渐降低,而导致各种感染的发生[1]。患者就诊时主要临床症状为血象表现,常见的血象表现包括血小板减少、贫血、血细胞减少等,研究表明,上述血象表现症状主要诱导因素均为感染,将进一步导致艾滋病患者机体骨髓造血功能的抑制,因此大部分艾滋病患者均存在非特异性的骨髓细胞异常现象[2,3]。马尔尼菲青霉病(Penicilliosis marneffei,PSM)是由于马尔尼菲青霉菌(PM)感染所引起,曾经是一种罕见的深部真菌病,但是随着目前AIDS患者的增多,AIDS合并PSM患者越来越多[4,5]。发生PM感染后,极容易对机体骨髓造血系统造成侵犯,引发AIDS患者骨髓细胞异常加剧,本研究对我院收治的217例AIDS患者进行回顾性分析,并对比分析合并PSM对AIDS患者骨髓细胞形态学特点的影响,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选择2015-04～2018-03我院收治的217例AIDS患者,对患者临床资料进行回顾性分析,患者治疗前血常规、骨髓细胞分析、血液/骨髓真菌培养以及CD4+淋巴细胞计数等临床检查资料完整,且骨髓取材满意;排除上述检查资料不完整、骨髓取材不满意以及合并血液性疾病、恶性肿瘤患者。艾滋病诊断标准均符合中华医学会“艾滋病诊疗指南(2011年版)”中相关诊断标准[6]。其中男性患者175例、女性患者42例,年龄23-72岁,平均年龄(43.97±10.94)岁。其中合并PSM患者58例作为合并组,其余159例作为非合并组。合并组中男性49例、女性9例,平均年龄(45.32±12.01)岁;非合并组中男性126例、女性33例,平均年龄(43.04±9.30)岁。经比较,两组性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)。
1.2 实验室检查
1.2.1 HIV检查 对于疑似艾滋病患者采用ELISA法对患者血清进行抗HIV抗体筛查,若我院开放实验室抗体筛查结果为阳性,将血清标本送至市疾病预防控制中心进行确认,采用免疫印迹(WB)法对患者血清进行抗HIV抗体试验,若WB实验结果为阳性者则确认为艾滋病患者。
1.2.2 血液/骨髓马尔尼菲青霉菌培养及鉴定 参照《微生物学操作规程》中血液/骨髓常规培养方法进行PM培养及鉴定。PM培养鉴别依据:①双相型真菌表现,25 ℃条件下培养表现为霉菌相,能够产生葡萄酒红色色素,25 ℃条件下培养表现为酵母相。②在显微镜下观察,25 ℃条件下可见典型的帚状枝,在35 ℃条件下可见卵圆形、圆形、两端顿圆略弯曲呈腊肠型且有横隔的菌体。
1.2.3 骨髓细胞学检查 参照《全国临床检验操作规程》中相关骨髓细胞学检查方法进行,在光学显微镜下观察经瑞氏染色的骨髓涂片,共计数200个骨髓有核细胞,对各类细胞比例进行计数并对各类细胞形态进行描述,并观察骨髓血细胞的形态学特点及其增生情况。
1.2.4 T淋巴细胞计数 采用美国BD-FACSCoumt流式细胞仪及其配套试剂进行外周血T淋巴细胞计数。
1.3 判断标准
贫血:男性血红蛋白(Hb)<120 g/L,女性Hb<110 g/L;白细胞(WBC)减少:WBC<4×109/L;血小板(PLT)减少症:PLT<100×109/L;“三少”:贫血、WBC减少、PLT减少。
1.4 观察指标
①比较两组艾滋病患者肝肾功能指标异常率,包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素、血尿素氮(BUN)以及血肌酐(SCr)。②比较分析两组艾滋病患者外周血细胞学特点。③比较分析两组艾滋病患者骨髓细胞学形态特征。
1.5 统计学分析
采用统计学软件SPSS 22.0进行数据处理分析,计数资料比较采用χ2检验,计量资料比较采用t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 两组艾滋病患者肝肾功能比较
合并组艾滋病患者肝肾各指标异常率明显高于未合并组患者(P<0.05,见表1)。
2.2 艾滋病患者外周血细胞学特点分析
合并组患者贫血、WBC减少、PLT减少、“三少”以及CD4+淋巴细胞<50个/μl患者比例均显著高于未合并组(P<0.05,见表2)。
表1 两组艾滋病患者肝肾功能指标异常率比较例(%)
组别nALT异常AST异常总胆红素异常BUN异常SCr异常合并组5830(51.72)38(65.52)16(27.59)14(24.14)10(17.24)非合并组15954(33.96)60(37.73)22(13.84)17(10.69)11(6.92) χ25.65113.2445.5626.2755.181 P0.017 0.0000.0180.0120.023
表2 两组艾滋病患者外周血细胞学特点分析例(%)
组别n贫血WBC减少PLT减少“三少”CD4+淋巴细胞<50个/μl合并组58 56(96.55)37(63.79)31(53.45)18(31.03)45(77.59)非合并组159139(87.42)72(45.28)56(35.22)24(15.09)97(61.01) χ23.8895.8245.8796.9185.165 P0.0490.0160.0150.0090.023
2.3 艾滋病患者骨髓细胞形态学特点分析
两组艾滋病患者红细胞核巨幼变、红细胞核畸形、成熟红细胞形态异常、中性粒细胞成熟延迟或障碍以及中性粒细胞浆发育失衡患者比例无显著差异(P>0.05),合并组患者骨髓组织细胞活化以及巨核细胞发育异常患者比例显著高于非合并组(P<0.05,见表3)。
表3 两组艾滋病患者骨髓细胞形态学特点分析例(%)
组别n红细胞核巨幼变红细胞核畸形成熟红细胞形态异常中性粒细胞成熟延迟或障碍中性粒细胞浆发育失衡骨髓组织细胞活化巨核细胞发育异常合并组5819(32.76)23(39.66) 58(100.00)41(70.69)14(24.14)35(60.34)33(56.90)非合并组15950(31.45)52(32.70)151(94.97) 98(61.64)34(21.38)45(28.30)47(29.56) χ20.0340.9083.0301.5130.18718.74713.645 P0.8540.3410.0820.2190.665 0.000 0.000
3 讨论
血液系统异常是艾滋病患者最常见并发症,可对机体各系血细胞造成影响,其影响因素主要包括由于HIV病毒对血细胞直接损伤、抑制、继发感染等对骨髓造血系统的影响[7]。HIV感染的艾滋病患者其骨髓形态学特征包括红细胞、中性粒细胞以及巨核细胞三系发育的异常,而在正常人群中,骨髓有核细胞形态正常且增生活跃,与正常人相比较,艾滋病患者骨髓细胞形态学可出现显著异常[8,9]。其中红细胞系统发育异常主要表现为异形、类巨变以及多核等,且补充叶酸、VB12后此类红细胞异常形态仍不能纠正[10]。中性粒细胞系统细胞异常主要变现为类巨变、胞浆颗粒缺少、异形核等[11]。巨核细胞异常主要表现为巨核细胞分叶减少或不能分叶以及小核巨核细胞等[12]。
PM是迄今为止发现的极少数能使人体致病的青霉菌之一,属于一种条件致病性、双相型真菌[13]。PMS主要通过感染免疫功能缺陷者,伴随着目前艾滋病人数的不断增长,PMS的发病率也显著升高[14]。PM具有着嗜单核-组织细胞系统倾向,PM进入机体后容易被细胞吞噬而形成吞噬细胞[15]。由于艾滋病患者机体免疫水平低下,不能完全清楚细胞各种的PM病原菌,从而导致PM随着吞噬细胞而进入血液循环并大量繁殖引发PMS[16]。关于艾滋病合并PMS患者其外周血细胞学特点以及骨髓细胞形态学特点,目前研究相对较少。本研究针对我院217例确诊艾滋病患者进行回顾性分析,研究艾滋病患者骨髓细胞形态学特征,同时对比分析艾滋病合并PMS患者与单纯艾滋病患者骨髓细胞形态学变化。
本研究结果显示,合并组艾滋病患者肝肾各指标异常率明显高于未合并组患者(P<0.05)。表明合并PMS后,对患者机体肝肾功能有明显影响,这与相关研究报道结果相似[17]。此外,分析两组艾滋病患者外周血细胞学特征,结果显示,合并组患者贫血、WBC减少、PLT减少、“三少”以及CD4+淋巴细胞<50个/μl患者比例均显著高于未合并组(P<0.05)。表明艾滋病合并PMS患者外周血细胞学异常较单纯艾滋病患者更为常见,提示合并PM感染后,可对机体外周血细胞学造成明显影响[18]。对比分析两组艾滋病患者骨髓细胞形态学特征,结果显示,两组艾滋病患者均表现为红细胞、中性粒细胞以及巨核细胞系统异常,其中两组红细胞、中性粒细胞系统异常比例无显著差异,而合并组患者巨核细胞发育异常比例以及骨髓组织细胞活化比例明显升高。HIV感染对骨髓造血系统造成明显影响,主要变现为红细胞、中性粒细胞以及巨核细胞三系发育异常,合并PM感染后,可引发巨核细胞异常比例升高。与相关研究结果相似[19,20],真菌感染可导致感染组骨髓巨核细胞胞体增大、空泡变性增加、核分叶增多等现象,可能与巨核细胞参与免疫应答有关。
综上所述,艾滋病患者可出现明显的肝肾功能异常、外周血细胞学异常以及骨髓细胞形态学异常,其中骨髓细胞形态学异常主要表现为红细胞、中性粒细胞以及巨核细胞三系发育异常,合并PMS患者巨核细胞异常比例明显增加,骨髓形态学检验对艾滋病合并马尔尼菲青霉病临床诊断具有重要意义。
