血循环肿瘤细胞检测在中晚期乳腺癌疗效评价及转移监测中的应用

崔海燕 王海涛

【摘 要】目的：探讨并分析血循环肿瘤细胞（CTCs）检测对中晚期乳腺癌疗效评价及转移监测中的应用价值。方法：抽选潍坊市中医院近3年来收治的90例中晚期乳腺癌患者，在1周期、第2周期和3周期分别抽取外周血，使用免疫磁珠阴性富集联合免疫荧光染色法完成CTCs检测;在3周期化療前评价影像学疗效，对化疗两个周期后各转归患者的CTCs情况进行对比;全部患者都在3周期化疗进行各月随访，一直到新增转移灶出现停止;在所有化疗完成后再次分别3个月、6个月、9个月进行CTCs检测以及影像学检查。结果：在第1个周期、2周期、3周期化疗前，中晚期乳腺癌患者化疗1周期、2周期后的阳性率以及CTCs数量都明显低于首次化疗前，p<0.05;所有化疗结束后，3个月、6个月、9个月，CTCs阳性患者的转移复发率都高于CTCs阴性患者，p<0.05。结论：在中晚期乳腺癌的化疗疗效评价及转移监测中可以运用外周血CTCs检测，对预测乳腺癌预后具有重要的作用。

【关键词】血循环肿瘤细胞检测;中晚期乳腺癌;疗效评价;转移监测

【中图分类号】R97【文献标识码】A【文章编号】1005-0019（2019）13--01

乳腺癌属于恶性肿瘤，多发病于女性身上，全球每年大概新增150万例女性乳腺癌患者，而60例妇女致死的原因是乳腺癌。现如今，尽管乳腺癌的诊断方式及治疗手段不断提升，但是尚未有效控制死亡率，而患者死亡的根本原因是肿瘤的错误治疗和转移复发。充分了解血液里CTCs的具体变化情况对诊断乳腺癌等具有重要的临床作用。本研究通过对中晚期乳腺癌患者外周血中的 CTCs进行动态监测，对患者实施化疗疗效和转移风险评价，最终目的在于为制定个性化治疗奠定坚实基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料 抽选抽选潍坊市中医院近3年来收治的90例中晚期乳腺癌患者，都是女性，年龄最小34岁，最大76岁，平均（38.24±2.4）岁。列入标准：①进组前告知患者有关内容主动进行研究，而且签订知情同意书，估计有5个月的生存期;②所有患者都经过空心针穿刺活检和乳腺影像学检查确诊，已经证实患者是中晚期乳腺癌;排除标准：①哺乳期及妊娠期乳腺癌患者;②伴有肝肾功能障碍者。剔除标准：①不能根据标准进行化疗或者化疗时间延迟超出3个星期的患者;②由于多种原因不能在规定时间内进行复查的患者。

1.2 方法

CTCs检测方式（1）免疫雌株阴性富集方法：在1周期、2周期、3周期化疗前3日内使用ACD抗凝剂真空采血管收集患者3.2ml肘正中静脉血，获得CTC检测标本后在室内温度（15摄氏度-30摄氏度）存放，而且在一天内进行CD45磁珠富集。（2）免疫荧光染色：添加根据比例配合制成的抗体工作液实施抗体孵育，DAPI复染。通过荧光显微镜判断及计数CTCs。

1.3 疗效评价和随访 在3周期化疗前科学评估影像学疗效，对化疗2周期后每个转归患者的CTCs情况进行对比;全部患者都在3周期化疗进行各月随访，一直到新增转移灶出现停止;在所有化疗完成后再次分别3个月、6个月、9个月进行CTCs检测以及影像学检查。

1.4 疗效评价标准 结合1.1版RECIST标准：其一，全部缓解：每个目标病灶都消失，没有出现新的病灶，而且肿瘤标志物显示正常，维持时间至少有5周;其二，局部缓解：基线病灶长径综合缩小超过35%，维持时间不少于5周;其三，进展：基线病灶长径综合缩小超过20%;其四，稳定：基线病灶长径综合缩小且没有达到局部缓解或者上升但没有达到进展。总有效率是+（局部缓解例数+全部缓解例数）/总例数×100%。

1.5 统计学分析 使用SPSS17.0统计学软件分析所获取的数据。用均数±标准差表示CTCs数量，各个时间点对比使用单因素方差分析;用n（%）表示计数治疗，使用x2进行检验，差异显著，具有统计学意义（p<0.05）。

2 结果

2.1 化疗前和化疗后CTCs所得的检测结果 在在第1个周期、第2个周期、第3个周期化疗前，中晚期乳腺癌患者的CTCs数量分别是（16.27±3.27）、（6.59±2.19）、（4.29±2.18），阳性差分别是67.00%、48.00%、17.00%;化疗1个周期、2个周期后的阳性率以及CTCs数量都明显减少，具有统计学意义（p<0.05）。

2.2 化疗结束后CTCs变化和转移复发之间的关系 随访中晚期癌症患者共90例，其中有效随访80例，失访10例。所有化疗结束后，3个月、6个月、9个月，CTCs阳性患者的转移复发率分别是4.28%、11.28%和27.00%，显著高于CTCs阳性患者。

3 讨论

随着全球医学技术的日益发展和新型肿瘤治疗药物的研发和应用，乳腺癌已经逐渐成为可以采用化疗、手术等不同治疗方法而取得很高的治愈率，特别是早期的乳腺癌。然而对于很多中晚期乳腺癌患者而言，经过手术等部分治疗后仍旧有相对较高的转移复发率，这些患者一般预后较差[1]。因此，当前临床上急迫需要的是可以预计死亡风险及疗效的检测因素，对治疗中晚期乳腺癌具有现实的意义。当前，在临床方面预计肿瘤患者的死亡风险及复发的关键是借助综合肿瘤病理学特点等等，但是这些检查方法都不能及时正确的找到肿瘤病灶的远处转移，很难缓解患者病情。CTCs是以细胞的血液播散学院为基础提出的概念年，出现转移的前提是CTCs的游走与产生。大量的研究结果显示，CTCs主要存在于各种恶性肿瘤患者的外周血内。

一般来说，治疗中晚期乳腺癌患者的主要手段是化疗。其疗效好坏关乎到患者的生存时间以及生存水平。现如今，判定临床评价疗效的常用方式是影像学检查，但是研究表示，影像学可以观察的肿瘤大小并不符合CTCs的侵袭能力。也有研究显示，CTCs对化疗反应较为敏感，具有检测方法简便、创伤较小等特征[2]。本研究结果表明：在1周期、2周期、3周期化疗前，中晚期乳腺癌患者化疗1周期、2周期后的阳性率以及CTCs数量都明显低于首次化疗前;所有化疗结束后，3个月、6个月、9个月，CTCs阳性患者的转移复发率都高于CTCs阴性患者，说明中晚期乳腺癌的化疗疗效评价及转移监测中可以运用外周血CTCs检测，对预后预测乳腺癌具有重要的作用。

综上所述，外周血CTCs检测可以适用于中晚期乳腺癌的化疗疗效评价及转移监测，对预后预测乳腺癌具有现实的意义，可以降低诊断失误率，确定治疗方案。

参考文献

吴江.乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞阴性富集法检测及其临床意义的研究[D].南京医科大学，2018.

单海琳，邵清，苏瑛，周斌，邹润龙.乳腺癌术前外周血循环肿瘤细胞计数的临床应用价值研究[J].东南大学学报（医学版），2018，37（02）：272-276.