QuEChERS-三重四级杆气质法测定香菇酱中农药残留

景赞，刘超，胡丹，刘晓碧

(乐山市食品药品检验检测中心，四川 乐山 614000)

香菇在全国分布广泛，以营养丰富、味道鲜美著称，深受人们喜爱，有很高的食用和药用价值[1-4]。除了成为餐桌上的佳肴，近几年为了丰富大众的饮食，香菇也被开发成各种产品，其中香菇酱颇受大家喜爱[5-8]，然而农产品农药残留超标问题一直困扰着消费者和生产者，无论是在出口创汇，还是在日常消费中造成的损失都不容忽视。虽然国家在农药残留方面制定了相关标准，但和欧美、日韩等国家比较，由于生产方式和标准指标差异等原因，我国食用菌产品在出口中往往遭受贸易壁垒，另外国内生产者滥用、超标超范围使用农药的现象也比较严重[9]。

液相色谱法、液质联用法、气相色谱法、气质联用法常被用于农药残留的检测，提取方法集中在液液萃取、固相萃取、QuEChERS 等方法，其中QuEChERS以高效、简便、易操作等优势应用广泛[10-13]。香菇酱中农药残留的检测少有报道，本文基于QuEChERS法开发了气质联用检测香菇酱中多种农药残留的方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

五氯硝基苯、马拉硫磷、毒死蜱、腐霉利、氰戊菊酯标准品：100 μg/mL，购于农业部环境保护科研监测所；乙腈、丙酮：均为色谱纯，购于百灵威科技有限公司。

1.2 仪器与设备

TQ-8030气质联用仪 岛津(中国)有限公司；T10均质器 IKA仪器设备有限公司；TGL-16冷冻离心机 四川蜀科仪器有限公司。

1.3 农残混合标准溶液的配制

取5种农药标准品各1支，用丙酮反复转移并定容至10 mL混匀，配制成浓度为10 μg/mL的标准储备溶液，冷藏备用。按照样品制备处理方法，提取空白基质溶液，用于不同浓度标准系列工作溶液的配制。

1.4 样品提取液的制备

将样品混匀后取出部分样品，用制样机打碎，准确称取1 g(精确至0.01 g)，加入色谱纯乙腈5 mL，高速均质1 min，5000 r/min冷冻离心5 min，将乙腈层转移至玻璃试管中，重复提取1次，移取4 mL提取液加入50 mg C18粉和50 mg PSA粉，漩涡5 min。取1 mL上层溶液经氮吹浓缩至近干加入1 mL丙酮，过0.22 μm滤膜上机分析。

1.5 检测条件

进样口：250 ℃,不分流(高压进样)；毛细管柱：Rxi-5Sil MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm，柱温采用梯度升温：起始温度50 ℃(1 min)，以15 ℃/min升至280 ℃(10 min)。线速度：40 cm/s。进样体积：1 μL；载气：高纯氦气。

溶剂延迟：6 min；离子源为电子电离源，温度200 ℃；MS接口温度：260 ℃。

2 结果与分析

2.1 前处理及质谱条件的优化

样品前处理选择了现在广泛应用的QuEChERS方法，香菇酱中一般添加有较高含量的植物油，选用乙腈作为提取溶剂，同时冷冻高速离心减少了提取液中油脂成分的引入。C18粉和PSA 粉可以吸附提取液中有机酸、色素、维生素等干扰物质，实验证明其对农药残留的吸附作用较小，降低了样品的基质效应。结合质谱的高灵敏度、高选择性，对几种农药残留的检测更为准确。5种农药的碎片离子质谱图见图1～图5，选择质量数较大，响应较高的碎片离子进行二级碎裂，同时优化碰撞电压，建立质谱检测条件，见表1。

图1 五氯硝基苯碎片离子质谱图Fig.1 The mass spectrogram of pentachloronitrobenzene fragmentions

图2 马拉硫磷碎片离子质谱图Fig.2 The mass spectrogram of malathion fragmentions

图3 毒死蜱碎片离子质谱图Fig.3 The mass spectrogram of chlorpyrifos fragmentions

图4 腐霉利碎片离子质谱图Fig.4 The mass spectrogram of procymidone fragmentions

图5 氰戊菊酯碎片离子质谱图Fig.5 The mass spectrogram of fenvalerate fragmentions

表1 农残保留时间和质谱参数Table 1 Retention time and MRM parameters of pesticide residues

2.2 检测方法的线性范围与检出限

用空白基质将农残混合标准溶液稀释成0～1 μg/mL的标准系列工作溶液，以农残的质量浓度对应的定量离子色谱峰的峰面积，绘制标准曲线。

以3倍的S/N计算检测方法的检出限，结果见表2。

表2 5种农残线性范围和检出限Table 2 Linear ranges and detection limits of 5 kinds of pesticide residues

2.3 加标回收率

为验证方法的准确性，向香菇酱空白样品中添加5种农药标准溶液，添加浓度为0.02 mg/kg，依照上述样品提取方法制备提取液，同时平行测定 6次，结果见表3。

表3 5种农残加标回收率和相对标准偏差(n=6)Table 3 Recoveries and relative standard deviations of 5 kinds of pesticide residues (n=6)

加标样品色谱图见图6。

图6 加标样品总离子流色谱图Fig.6 Total ion current chromatogram of spiked samples

由表3可知，5种农残回收率在76.5%～99.6%之间，满足国家标准的有关要求。

2.4 精密度

采用浓度为0.1 μg/mL的混合基质标准溶液，平行测定6次，用于验证方法的精密度，结果见表4。

表4 精密度(n=6)Table 4 The precision (n=6)

由表4可知，该方法测定的5种农残的精密度范围为0.9%～2.2%，精密度满足要求。

3 讨论

我国是农药的生产消费大国，农药的使用范围和品种都有相关规定进行了严格的限制，但农药残留问题还是较为突出，一方面部分农药的分解周期比较长，另一方面滥用、超范围使用的现象也时有发生，目前国内外农产品贸易越发频繁，对检测技术的要求也越来越高。香菇酱的主要原料是香菇，本文针对该产品建立了5种农药残留的检测方法，并进行了方法学论证，结果表明该方法测定准确，检测周期短，为香菇酱的安全生产提供了技术支撑。