辣椒叶斑病病原学及分子检测研究

赵瑜萍

【摘要】辣椒叶斑病是我国新报道的植物病害，在保护地辣椒生产中，病害发生面积及其危害呈上升趋势。目前对于该病的发生危害、病原学、致病机理、病害发生规律乃至分子检测等均缺乏系统的研究，制约着病害防治策略的制定及病害的防控。本文针对这些问题，以夹江县土门乡辣椒种植中发现的叶斑病为研究对象，对其致病病原进行了鉴定，从病菌生物学特性、致病力分化、种群遗传多样性和侵染特性个方面进行了病原学的系统研究;对其病原菌致病机理进行了初步探讨;并建立了辣椒叶斑病菌的分子检测技术，以期为病害的早期诊断提供有效方法。

【关键词】辣椒种植;叶斑病;病原学

夹江县土门乡地处县城以北13公里，幅员面积达26.84平方公里，辖区有7个行政村、49个农业社、1个社区，属于浅丘地区。乡境内主要作物是海椒和茶叶，其中辣椒产业是本乡特色产业，种植面积5000多亩，年产辣椒1500多万斤。其中泡辣椒300多万斤，产品销往全国各地，被譽为“海椒特色产业之乡”。乡境内有两家泡菜加工厂，主要加工泡海椒，可见辣椒的种植和加工成为了当地的农民的主要收入来源，加强辣椒种植中的辣椒叶斑病病因分析与控制，对本乡辣椒产业的健康发展具有重要的意义。

一、关于辣椒叶斑病的危害简述

辣椒叶斑病主要危害成株，在辣椒结果期，处于高温高湿条件下，该病的发生率显著增加。病菌主要侵染辣椒叶片，有时危害果实。发病初期叶片上出现针尖大小的褪绿斑点，后逐渐扩展形成褐色、不规则型病斑，严重时病叶变黄，提早脱落。果实受害，形成近圆形病斑，病斑略四陷，斑面生出致密的橄榄绿色霉状物，严重影响果实的产量和品质。尖抱枝孢常见腐生或弱寄生于植物的莲叶上，少有报道其作为致病菌对植株进行侵染造成病害。中国曾报道云南省由尖孢枝孢引致香蕉霉污病。

鉴于辣椒叶斑病为我国辣椒生产上的新发生病害，且国内外均缺乏系统研究，明确其病原菌的遗传分化等生理生化性质具有十分重要的实用意义。本文选取采自夹江县土门乡辣椒病害标样对其进行病原菌的分离鉴定，确认其致病菌的以为深入研究病害、选育抗病品种、开展预测预报及病害的有效防治提供理论依据。

辣椒叶斑病菌侵染存在潜育期，这些潜在的病原菌难以观测到，从而影响对病害发生的及时监测，往往是在田间已经见到病斑明显显症时，才开始采取防治措施，但由于错过了病害防治的最佳时期，而造成人力物力的浪费。尤其对于此类人们尚未完全了解和认识的新见病害，如果能够对该病害进行早期预测预报，在病害尚未表现出明显症状时，即采取措施进行有效防治，防患于未然，对减少辣椒叶斑病所造成的经济损失具有重要意义。

二、辣椒叶斑病的症状分析

辣椒叶斑病的致病菌为尖孢枝孢。对该病的症状进行了描述，并对病菌的生物学特性进行了系统测定：病菌菌丝生长以V8汁培养基为最适;能有效利用多种糖和氮源，分别以山梨醇和麦芽浸膏最佳;菌丝适宜生长温度为20-25℃;最适pH6～8;光照可促进菌丝生长;菌丝致死温度为77℃。病菌分生孢子萌发适宜温度为20-30℃;最适pH7;光照对孢子萌发无明显的促进作用;分生孢子致死温度为48℃。初步探讨了辣椒叶斑病的侵染循环试验研究结果表明，辣椒叶斑病菌尖孢枝孢以菌丝体在植株残体上潜藏，随病残体残落于土壤越冬，作为病害翌年危害的初侵染源。温度和湿度是影响病害发生的最主要因素，病菌侵染植株的最适温度为20-25℃，潜育期为7-8d;在适温条件下，保湿时间越长，病害发病率越高。罹病辣椒叶片的显微及超微观察结果显示，病菌以菌丝通过表皮和气孔2种途径侵入寄主组织;接种后8h，即可观察到分生孢子萌发产生芽管，进而形成菌丝，在叶片组织中穿行扩展;老熟后的菌丝上产生分生孢子梗，其上产生大量产生分生孢子;分生孢子成熟后自然脱落，可经多次再侵染反复循环传播;病菌菌丝在寄主组织中不断扩展，导致受侵细胞被破坏，最终崩解。

三、辣椒叶斑病的侵染循环

温度和湿度是影响病害发生的最主要因素，病菌侵染植株的最适温度为。潜育期为在适温条件下，保湿时间越长，病害发病率越高。罹病辣椒叶片的显微及超微观察结果显示，病菌以菌丝通过表皮和气孔种途径侵入寄主组织;接种后即可观察到分生孢子萌发产生芽管，进而形成菌丝，在叶片组织中穿行扩展;老熟后的茵丝上产生分生孢子梗，其上产生大量产生分生孢子;分生孢子成熟后自然脱落，可经多次再侵染反复传播;病菌菌丝在寄主组织中不断扩展，导致受侵细胞被破坏，最终崩解。

四、辣椒叶斑病菌的致病机理

病菌最佳产毒条件一般置于黑暗条件下，持续振荡培养活体内外辣椒叶斑病菌产生的细胞壁降解酶活性测定结果表明，病菌能产生果胶酶纤维素酶、葡萄糖苷酶，人工培养条件下，果胶酶活性明显高于纤维素酶，是活体外病菌产生的主要细胞壁降解酶，辣椒叶片接种病菌后，果胶酶活性显著提高，在接种后达到活性高峰，推测其在病菌致病过程中先起作用，而纤维素酶活性逐渐增强，推测其参与病菌在寄主组织内的扩展。

结语

总之，辣椒叶斑病是我国新报道发生病害，在保护辣椒生产中，病害发生面积及其危害呈上升趋势。目前对于该病的发生危害、病原学、致病机理、病害发生规律乃至分子检测等均缺乏系统的研究，制约着病害防治策略的制定及病害的防控，所以作为一线的农业技术工作人员，必须结合实际，不断总结研究，找到防控的办法，促进辣椒产业的健康发展。