80%噁霉·福美双可湿性粉剂的高效液相色谱分析

杨爱华，吴贺，郝培培，侯娟，尹家楼

（天津市绿亨化工有限公司，天津300270）

80%噁霉·福美双可湿性粉剂是低毒、高效、广谱的内吸型杀菌剂，具有保护和治疗双重作用，可被土壤中的硅、铝离子吸附，可有效防治立枯病、烂秧病、枯萎病、土传病害和苗期病害。为了准确快速地检测有效成分含量，为工业化生产提供产品质量控制技术和条件，特研究此杀菌剂的高效液相色谱分析方法。

1 试验部分

1.1 试剂和仪器

噁霉灵标样（99.0%）、福美双标样（98.0%）；80%噁霉·福美双可湿性粉剂，由天津市绿亨化工有限公司提供；甲醇（色谱级），天津市康科德试剂有限公司；水（二次蒸馏水）；

液相色谱仪：岛津LC-20A，具有可变波长紫外检测器；色谱柱：Kromasil C18不锈钢柱（5μm，250mm×4.6mm）；柱温箱；超声波清洗器；过滤器：滤膜孔径约 0.45μm；微量进样器：100μL；定量进样阀：20μL。

1.2 色谱操作条件

流动相：甲醇+水（体积比为 60∶40）；流量：0.5mL/min；柱温：30℃；检测波长：230nm；进样体积：20μL。

1.3 定性分析

在上述色谱条件下分别测定噁霉灵、福美双标准品溶液的保留时间，进行80%噁霉·福美双可湿性粉剂样品溶液分析，与2个标准品对照保留时间，检测噁霉灵、福美双的分离情况。在相同的色谱操作条件下，试样溶液中某一色谱峰的保留时间与标样溶液中噁霉灵/福美双色谱峰的保留时间，其相对差值应在1.5%以内。

1.4 定量分析

1.4.1 标准样品的配制

称取噁霉灵标样0.05g、福美双标样0.07g（精确至0.0001g）分别置于50mL容量瓶中。噁霉灵标样用甲醇溶解并定容，摇匀，移取上述溶液10mL于福美双标样的容量瓶中，以甲醇定容，在超声波清洗器中超声溶解。

1.4.2 样品的配制

称取80%噁霉·福美双可湿性粉剂试样0.1g(精确至0.0001g)于50mL容量瓶，加入少量甲醇，在超声波清洗仪中超声溶解后，用甲醇定容，摇匀。使用前用0.45um孔径滤膜过滤。

1.4.3 样品测定

在上述色谱条件下，待仪器稳定后，先注入数针标样溶液，计算各针峰面积，直至相邻两针标样溶液峰面积变化小于1.5%后，按照标样、试样、试样、标样的顺序进样测定。

1.4.4 结果计算

杀菌剂样品中噁霉灵、福美双有效成分的质量分数X(%)按下式计算：

式中：X——杀菌剂中有效成分的含量；

A1——标样中噁霉灵（福美双）峰面积平均值；

A2——试样中噁霉灵（福美双）峰面积平均值；

m1——噁霉灵（福美双）标样的质量，单位为克（g）；

m2——试样的质量，单位为克（g）；

P——标样中噁霉灵（福美双）百分含量（%）；

d——稀释倍数。

1.4.5 允许差

两次平行测定结果之差应不大于0.5%，取其算术平均值作为测定结果。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

首先考察了流动相中甲醇和水不同比例对噁霉灵[1]和福美双[2]出峰的影响，发现当甲醇/水为60/40(v/v)时，噁霉灵和福美双出峰时间相对较短，响应值较高。

利用紫外可变波长检测器，在不同波长下对噁霉灵和福美双标样溶液进行分析，结果显示噁霉灵和福美双在230 nm处有相对最大吸收波长。因此，本实验选用检测波长为230 nm。

在选定的条件下，80%噁霉·福美双可湿性粉剂中噁霉灵和福美双可获得较好的分离。噁霉灵和福美双的保留时间分别为6.9 min和16.7 min。其典型色谱分离图见图1。

图1 80%噁霉·福美双可湿性粉剂典型色谱分离图

2.2 方法的线性相关性测定

分别称取不同质量的噁霉灵和福美双标样（精确至0.0001g），置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀过滤后待测。按1.4色谱条件进行测定，以质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制线性关系图，结果如图2所示。

图2 噁霉灵浓度与紫外检测器线性关系图

由图2可见，噁霉灵浓度在0.0081～0.1002g/50mL范围内时，噁霉灵浓度与对应的峰面积呈良好的线性关系。求得线性方程：y=22.615x+0.0286，R1=0.9996。结果表明：此方法完全可以满足噁霉灵定量分析要求。

福美双浓度与紫外检测器线性关系图如图3所示。由图3可见，福美双浓度在0.0079～0.1012g/50mL范围内时，福美双浓度与对应的峰面积呈良好的线性关系。求得线性方程：y=62.157x+0.0144，R2=0.9998。结果表明：此方法完全可以满足福美双定量分析要求。

2.3 方法的精密度试验[1]

在同一条件下，由同一操作者对同一批80%噁霉·福美双可湿性粉剂样品重复连续测定8次，其中噁霉灵和福美双分析方法的变异系数分别为1.60%和0.20%，表明该分析方法的精密度良好。数据分别见表1和表2。

图3 福美双浓度与紫外检测器线性关系图

表1 样品中噁霉灵分析方法的精密度数据

表2 样品中福美双分析方法的精密度数据

2.4 方法的准确度试验[2]

选取已知质量分数的80%噁霉·福美双可湿性粉剂样品，准确称取6组试样（精确至0.0001g），分别置于50mL容量瓶中，再加入不同质量的已知质量分数的噁霉灵和福美双标准品，做回收率试验，噁霉灵和福美双分析方法的回收率分别为99.7%和99.6%，表明该方法的准确度较高。数据分别见表3和表4。

表3 样品中噁霉灵分析方法的准确度数据

表4 样品中福美双分析方法的准确度数据

3 结论

综上所述，用本分析方法对80%噁霉·福美双可湿性粉剂中的噁霉灵和福美双同时进行测定分析，方法准确度和精密度较高，线性关系良好，而且分析方法简便、快速，适用于80%噁霉·福美双可湿性粉剂产品质量控制分析。