病毒性心肌炎患儿血清炎性细胞因子和高迁移率族蛋白1水平变化

王 茜,姜 红,朱 聚,熊海英

(华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院 儿科,湖北 武汉430022)

病毒性心肌炎是儿科常见疾病，近年的发病率有逐年增高趋势[1]。我国儿童病毒性心肌炎总发病率18.27/10万，患病率21.83/10万。在初生至17岁的猝死者中17%有心肌病理改变，在学龄儿童猝死者中有21%患有心肌炎。病毒性心肌炎的发病机制尚未完全阐明，目前认为与炎性细胞因子、免疫功能紊乱密切相关。高迁移率族蛋白1(HMGB1)是近年发现的一种重要的炎症介质和致炎细胞因子[2]，其与病毒性心肌炎的作用未见报道。本研究通过联合检测病毒性心肌炎患儿血清HMGB1和转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，探讨其在病毒性心肌炎发病中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年1月-2018年1月我科收治的病毒性心肌炎患儿共96例，均符合1999年9月昆明全国儿童心肌炎、心肌病学术会议修订的儿童病毒性心肌炎诊断标准，排除其他疾病引起的继发性心肌损害，发病前1-3周均有上呼吸道感染史。急性期组：48例，男26例，女22例，年龄6.5-13.0岁，平均9.6岁；36例柯萨奇病毒B组(lgM抗体阳性，12例腺病毒(ADV)IgM抗体阳性。恢复期组：48例，男25例，女23例，年龄6.3-13.7岁，平均9.5岁；37例柯萨奇病毒B组(lgM抗体阳性，11例腺病毒(ADV)IgM抗体阳性。选择40名正常健康儿童为对照组，其中男22例，女18例，年龄6.4-13.5岁，平均9.5岁；近期无感染、腹泻病史。

1.2 方法

急性期组：给予黄芪注射液：黄芪注射液10 ml(神威药业有限公司10 g/ml，批准文号：国药准字Z13020999)溶于5%葡萄糖200 ml，改良极化液(门冬氨酸钾镁10 ml、能量合剂0.5支溶于5%葡萄糖200 ml)静脉滴注，1次/d；口服辅酶Q10、维生素C，2周(14 d)为1个疗程。恢复期组：给予传统的抗病毒、改善心肌代谢、极化液、维生素C及其他对症诊疗[3]。

1.3 标本采集与检测

各组患儿在入院时采血，急性期在诊疗3 d、7 d、14 d时分别抽取清晨空腹静脉血3 ml，立即注入硅化玻璃试管，3 000 r/min离心10 min，吸取上清，将血清分装置于-70℃冰箱待测。

采用双抗体夹心酶联免疫分析法定量检测各组患儿血清中TGF-β1、TNF-α和HMGB1水平。TGF-β1和TNF-α的ELISA检测试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司，HMGB1检测ELISA试剂盒购自美国R&D公司，使用美国BIO-RAD伯乐680型全自动酶标仪测定450 nm波长下吸光度值，用SPSS软件绘出标准曲线，计算样本值[4]。操作严格按照试剂盒要求，所有样品设立复孔，由专人负责，在同一批内检测。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 各组血清TGF-β1、TNF-α和HMGB1水平比较

与对照组比较，急性期组的TGF-β1、HMGB1水平明显升高(P<0.05)，TNF-α升高更为显著(P<0.01)，恢复期组TGF-β1较急性期稍降低，差异无统计学意义；TNF-α、HMGB1明显低于急性期组，但仍高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 各组血清TGF-β1、TNF-α和HMGB1水平比较

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与急性期组比较，

▲P<0.05

2.2 急性期组患儿不同时间点血清TGF-β1、TNF-α和HMGB1水平比较

TGF-β1第3 d、7 d无显著变化，第14 d时明显降低(P<0.05)；TNF-α和HMGB1诊冶第3 d、7 d、14 d均依次降低，各时间点间差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 急性期组患儿诊疗不同时间点血清TGF-β1、TNF-α和HMGB1水平比较

注：与1 d比较，*P<0.05，**P<0.01；与7 d比较，▲P<0.05

3 讨论

病毒性心肌炎是由柯萨奇等嗜心肌病毒感染人体，心肌细胞发生炎性浸润、变性坏死或间质水肿的心血管疾病，以心肌代谢障碍和心功能改变为特点，严重危害儿童健康。目前认为，病毒性心肌炎的发病与病毒直接损伤、病毒诱发的免疫反应有关，细胞因子在诱发免疫病理过程中起到关键作用[5]。

本研究选择病毒性心肌炎患儿96例为研究对象，检测不同组患儿入院时血清TGF-β1、TNF-α及HMGB1的水平，结果显示：与对照组比较，急性期组的TGF-β1、HMGB1水平明显升高，TNF-α升高更显著，恢复期组TGF-β1较急性期稍降低，TNF-α、HMGB1则明显降低；结果提示：病毒性心肌炎急性期患儿血清炎性细胞因子明显升高，病毒诱发强烈的炎症反应，这与朱冰[6]等的研究结果一致。本研究中，恢复期组TNF-α和HMGB1均明显恢复，而TGF-β1恢复不明显，急性期组第14 d时仍较高，分析原因TGF-β1是重要的致纤维化细胞因子[7]，其在恢复期水平仍较高，提示病毒性心肌炎患儿炎症消退后仍存在心肌纤维化的危险[8]。本研究观察到急性期患儿在第3 d、7 d、14 d时血清HMGB1依次降低，提示随着诊疗进展，心肌的免疫病理损伤得到一定程度的恢复。TNF-α的变化趋势与HMGB1相同，提示病毒性心肌炎急性期时，单核巨噬细胞募集分泌TNF-α，使心肌炎性反应增强[9,10]；随诊治炎症反应及心脏自身免疫反应减弱，TNF-α也随之下降。总之，TGF-β1、TNF-α和HMGB1参与病毒性心肌炎的发病过程，联合检测有助于病情判断及预后评估。