糖化血红蛋白分析仪层析柱反向安装的应用价值

梁知锐，杨开洪，徐耀祥，林铭键

广东阳江市中医医院检验科 （广东阳江 529500）

糖化血红蛋白（HbA1c）是血糖控制的重要监控指标，其检测方法有高效液相色谱法、电泳法、免疫法、亲和层析法和酶法等。我院目前使用的糖化血红蛋白分析仪HLC-723G8，是基于高效液相色谱法原理的专门检测仪器，具有标本用量少、速度快、重复性好、准确度高、故障少等优点[1]。在使用过程中，试验人员按照仪器的操作规程使用仪器，仪器有专人负责保养，工程师会定期对仪器进行维护；随着仪器的长时间使用，仪器配件磨损导致仪器故障，影响仪器状态，直接影响检验结果的真实性和准确性[2]。为了保证结果的准确性和真实性，需要更换配件，排除故障。层析柱和过滤器都是原厂生产的消耗性配件，检验成本较高，经济效益较差，给科室的成本核算带来一定的压力。为了解决上述问题，我们在工作实践中通过反方向安装层析柱的方法，对达到或接近使用寿命的层析柱再生使用，解决了一些实际问题。现分析反方向安装糖化血红蛋白分析仪层析柱的基本情况，探讨其应用价值。

1 达到或接近预期寿命层析柱的故障现象

当层析柱检测次数接近或大于8 000检测次数时，仪器通常出现压力高警报，表现为柱压力升高及色谱图的峰异常，更换过滤器后，仪器工作状态未改善。或表现为多个样本色谱图的峰值特别是涂满HbA1c峰变宽或变成双峰。

2 方法

2.1 反向安装层析柱的步骤

关闭仪器，拔出电源线，戴手套，小心取出层析柱配件，见图1。检查见配件外观完好，清洗干净，然后将层析柱配件按拆卸前相反方向安装到仪器上，见图2，输送试剂，灌注层析柱并且进行计数器的复位，层析柱计数器回零。

图1 正常情况下安装层析柱方向

图2 反向安装层析柱

2.2 反向安装层析柱精密度批内测定试验

选取低值和高值标准品，由同一试验人员使用同一批号的试剂连续测定其HbA1c的水平20次，计算其变异系数。

2.3 反向安装层析柱精密度批间测定试验

选取低值和高值的标准品，由同一试验人员使用同一批号的试剂，分别测定HbA1c的水平，每天1次，连续测定20 d，计算其变异系数。

2.4 反向安装层析柱准确度的测定试验

选取低值和高值的标准品，由同一试验人员使用同一批号的试剂，连续测定其HbA1c的含量10次，计算其均值及其相对偏差，偏倚应＜3%[3]，运用t检验，判断反向安装层析柱检测标准品的结果与校准品的标准值是否存在差异。

3 结果

3.1 反向安装层析柱精密度试验结果

批内试验的变异系数均小于1%，批间试验的变异系数小于1%，说明反向安装层析柱测量的结果重复性好。见表1。

3.2 反向安装层析柱准确度试验结果

运用t检验对反向安装层析柱后检测校准品的结果与校准品的校准值进行比较，计算其偏倚，偏倚绝对值均小于1%。见表2。

4 讨论

血糖检测影响因素较多，且只能反映患者短时间的血糖情况。HbA1c是血红蛋白与糖类经非酶促结合而成的，其合成过程是缓慢且不可逆的，不受血糖浓度暂时波动的影响，能够反映患者近2～3个月的血糖控制情况。HbA1c水平变化和糖代谢控制状况以及糖尿病的相关并发症有密不可分的关联，能够协助监测血糖控制水平，因此作为糖尿病筛选、诊断、血糖控制、疗效评价的有效指标，在临床上已广泛使用，是监测糖尿病的金标准[4]。

表1 反向安装层析柱精密度试验结果

表2 反向安装层析柱准确度试验结果

通常，反向安装层析柱后，仪器压力显示及色谱图的峰值恢复正常，报警消除，仪器能再正常工作一段时间。其原理是层析柱长期累积的残留碎片颗粒，吸附能力下降，透过性减低，通过反向冲洗，部分微粒脱落，减小了阻力。

反向安装层析柱后，仪器的压力正常，色谱图的峰正常，精密度试验数据显示，高值与低值批内试验和批间试验的变异系数均小于1%，1/4允许误差范围为批内不精密度判断限（≤3.0%），1/3允许误差范围为批间不精密度判断限（≤4.0%），说明结果重复性良好，结果稳定，符合CLIA′88对室间评估的允许误差要求[3]。准确度试验数据表明，测定值与标准值不存在差异，其偏倚＜1%，说明反方向安装层析柱后的结果准确性能满足要求。

由于配件价格高，更换周期长，层析柱配件是不作为常规备用耗材库存的，于是常造成仪器报警后才发现层析柱耗尽，订购后较长一段时间机器不能正常工作等困扰。反向安装超期使用的层析柱，可能对于以下几种情况有实际意义：（1）临时解决层析柱因故不能及时更新时的问题，如订购后至到货前这段时间；（2）对于基层医疗单位，可通过本法延长层析柱的使用寿命，降低检验成本，提高科室效益。因为此法属于应用经验，未见于文献，不建议作为常规方法使用。