血浆与红细胞悬液上清液中抗体效价及血浆蛋白的含量分析

(郑州大学附属儿童医院 河南省儿童医院 郑州儿童医院，河南 郑州 45000)

ABO血型系统是一种常用血型评价标准，血型分类主要取决于红细胞膜上特异性抗原类型，A型者体内存在A型抗原，B型者体内存在B型抗原，AB型者存在两种抗原，而O型者体内不存在A型或B型抗原，但对这两种抗原产生抗体[1]。由于不同血型的血液可产生抗体抗原凝集反应，因此临床输血之前，必须进行交叉配血试验[2]。本研究通过分离献血者的血浆和红细胞悬浮液，比较二者的抗体效价和蛋白含量。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取河南省中心血站2016年12月～2017年5月期间无偿献血的180名献血者作为研究对象。根据ABO血型分类，A型63例，男30例，女33例，平均年龄(30.6±7.7)岁。B型组59例，男29例，女30例，平均年龄(29.2±8.2)岁。O型组58例，其中男29例，女29例，平均年龄(28.8±8.5)岁，3组献血者的例数、性别比例、年龄等基本资料无统计学差异(P>0.05)。纳入标准[3]：经相关检查为合格献血者；签署知情同意书。排除标准：贫血症患者；合并血液传播性疾病；妊娠期及哺乳期妇女。

1.2 方法

所有献血者均采用一次性血样采集器收集血样，并使用ACD保养液抗凝过滤，之后将离心机温度设置为4℃，离心力3 220 g，并将已收集的血液400 mL全血离心10 min，200 mL血液离心8 min。之后将分离出的血浆再次离心3次，每次8 min并留取标本进行备用。之后往浓缩的红细胞悬浊液中添加红细胞保存液并充分摇匀，保存，添加量约为全血总量的1/4。添加摇匀后，取已经混合好的悬浊液4 mL进行再次离心，并分离出上清液进行备用。再选取10例A型或B型献血人员的红细胞进行混合、洗涤2次，以生理盐水将上述A、B型红细胞配成浓度为3%的红细胞悬浊液进行备用。

抗体效价检测方法因血型不同而有一定差异。对O型血浆抗体效价的检测方法为:使用已经进行编号的试管，分别在1、2号试管中各加入血浆2滴；之后从第二管开始进行一定的倍比稀释，稀释后在分别加入对应的A、B血型红细胞进行充分摇匀后放入离心机进行1分钟离心。取出后观察结果，以不发生凝集的前一管作为标准记为抗体效价。对A、B行血浆抗体效价的检测方法与O型血液测定方法类似，差别在于，A型血浆中添加B细胞，B型血浆中添加A细胞，以不发生凝结的前一管作为标准记为抗体效价。

蛋白含量检测如下[4,5]：白蛋白测定采用溴甲酚绿法，总蛋白含量采用双缩脲法。

1.3 统计学方法

本次研究采用统计学软件SPSS 17.0进行分析，其中计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，多组间比较采用F检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 抗体效价评价结果(见表1)

表1 抗体效价评价结果比较

2.2 血浆蛋白含量分析(见表2)

表2 血浆蛋白含量分析 g/L

注：1)血浆与组内红细胞悬液中含量比较，P<0.05；2)白蛋白与组内球蛋白水平比较，P<0.05

3 讨论

ABO血型中的O型是指红细胞表面上既不含A抗原，也不含B抗原的血型，即人们所说的“万能血型”，被大量用于紧急情况下的匹配血液。但O型血者血浆中仍存在抗A、B、AB的抗体，若对患者进行大量输血时，其上清液中的抗A、抗B输送进入其他血型患者体内后会引发不同程度的输血不良反应，因此大量输血仍需要进行交叉配血试验[6]。一般情况下，正常血液不存在不规则抗体，但由于一些特殊情况如妊娠、输血、特殊免疫等则有可能产生不规则抗体，因此，目前国家在《临床输血技术规范》中已明确规定，输入全血、浓缩血红细胞、红细胞悬浊液、洗涤红细胞等患者均需进行交叉配血；无要求进行血浆输注的进行交叉配血实验。我国已经明确规定，对于血浆含量很少或者不含的红细胞悬液必须经过主侧配血后方可使用，而免疫蛋白的含量也对排斥反应有重要影响，因此，评价血浆与红细胞悬液上清液中抗体的效价以及测定蛋白含量有利于判断是否需进行主侧和次侧配血。本研究结果显示，各血型的献血者的血浆抗体效价明显高于红细胞悬液中抗体效价。同时，B型组献血者血浆和红细胞悬液中抗体效价均显著低于A型组和O型组献血者，另外，三种血型的献血者血浆中球蛋白、白蛋白的含量均显著高于红细胞悬液中的蛋白含量，差异有统计学意义(P<0.05)。可见相对于血浆，红细胞悬浮液更适合作为主侧配血，这与赵敏[7]的研究成果一致。目前我国要求根据同型血输注ABO型血液，血小板按照ABO同型输注；对于单采血小板则不需考虑血型而优先考虑是否与受血者红细胞血型相和；而与之相反的冷沉淀则对ABO血型适合。对需要进行洗涤红细胞和冰冻红细胞的则不需要进行次侧配血，这主要是由于在反复洗涤过程中，所有血浆蛋白和保存液均会被去除。这不仅能够运用于紧急情况，更能够在确保短时间完成作业的前提下有效节约资源。另外，还能考虑在进行全血和血小板进行交叉配血时进行主侧及次侧配血。

综上所述，血浆红细胞悬浮液的抗体效价明显低于血浆，且蛋白含量较少，临床交叉配血试验中可作为主侧配血。