50%绿麦隆·异丙隆可湿性粉剂的反相高效液相色谱分析

2019-04-09吴航俊俞霖洁孙小波吴伟东庞雯霏林梦佳唐利斌

浙江化工 2019年3期

吴航俊，俞霖洁，孙小波，吴伟东，庞雯霏，林梦佳，唐利斌

（浙江省化工研究院有限公司，浙江杭州 310023）

0 前言

绿麦隆（Chlorotoluron），中文别名 N-（3-氯-4-甲基苯基）-N'，N'-二甲基脲，是一种低毒、高效、广谱的的选择性内吸传导型麦田除草剂，多用于防除诸如看麦娘、风翦股颖、马唐、黑麦草、早熟禾、狗尾草、野燕麦等禾本科杂草，以及繁缕、藜、蓼、苋等阔叶杂草，但对田旋花、问荆、锦葵等杂草无效。异丙隆（Isoproturon），中文别名3-对-异丙苯基-1，1-二甲基脲，可防除一年生禾本以及双子叶杂草，如马唐、藜、早熟禾、看麦娘等，主要用于小麦、大麦等作物，亦可用于西红柿、马铃薯、育苗韭菜、甜（辣）椒、茄子、蚕豆、豌豆、葱头等部分菜田除草[1-2，5]。

50%绿麦隆·异丙隆可湿性粉剂是由绿麦隆原药、异丙隆原药和合适的助剂、填料按一定的比例以及加工方式加工而成的防治小麦田杂草的药剂。其分析方法未见报道，但异丙隆单剂及其它复配制剂的分析方法己有报道[2-5]。本文在已有文献的基础上，采用以甲醇/水的流动相体系，内装C18键合固定相的不锈钢柱作为分析柱的反相HPLC法，对试样中绿麦隆、异丙隆两个有效成分进行定量测定，获得了满意的结果。

1 实验部分

1.1 方法提要

试样用甲醇溶解并定容，采用以甲醇/水的流动相体系，内装C18键合固定相的不锈钢柱作为分析柱的反相HPLC法，对试样中绿麦隆、异丙隆两个有效成分进行分离，外标法定量。

1.2 试剂和溶液

甲醇：色谱纯，通过0.5 μm孔径油相膜过滤。

水：二次蒸馏水，通过0.5 μm孔径水相膜过滤。

绿麦隆已知样：含量98.8%，国家农药质检中心（定值）。

异丙隆已知样：含量98.9%，国家农药质检中心（定值）。

50%绿麦隆·异丙隆可湿性粉剂：江苏省苏科农化有限责任公司。

1.3 仪器

Dionex Ultimate 3000高效液相色谱仪：具DAD检测器和自动进样器，色谱处理工作站；

色谱柱：250 mm×4.6 mm （id），内装 Inertsil ODS-3 C18键合固定相5 μm不锈钢柱；

UV-1750紫外-可见分光光度计。

1.4 溶液配制

标准溶液：称取25 mg绿麦隆和25 mg异丙隆标样，分别置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀释，冷却至室温并定容，充分摇匀，配置成绿麦隆（25 mg/50 mL）和异丙隆（25 mg/50 mL）标准溶液，用0.45 μm微孔滤膜过滤后待用。

混合标准溶液：称取25 mg绿麦隆标样和25 mg异丙隆标样，置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀释，冷却至室温并定容，充分摇匀，配置成绿麦隆（25 mg/50 mL）、异丙隆（25 mg/50 mL）的混合标准溶液，用0.45 μm微孔滤膜过滤后待用。

样品溶液：称取约0.1 g样品（约含25 mg绿麦隆和25 mg异丙隆），置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀释，冷却至室温并定容，充分摇匀，用0.45 μm微孔滤膜过滤后待用。

1.5 色谱条件

色谱柱：250 mm×4.6 mm （id）Inertsil ODS-3 C18键合固定相5 μm不锈钢柱；柱温：35℃；检测波长：245 nm；流动相：甲醇+水=60+40；流速：1.0 mL/min；进样量：5 μL。

1.6 测定步骤

1.6.1 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后连续注入数针标准溶液，直至相邻2针的峰面积小于1.5%时，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行测定。

1.6.2 计算

将测得的2针试样溶液以及试样溶液前后2针标样溶液中绿麦隆（或异丙隆）的峰面积分别进行平均。试样中绿麦隆（或异丙隆）的质量分数X%按下式计算：

式中：

A1——2针标样溶液中绿麦隆（或异丙隆）峰面积的平均值；

A2——2针试样溶液中绿麦隆（或异丙隆）峰面积的平均值；

m1——标样的质量，g；

m2——试样的质量，g；

p——标样中绿麦隆（或异丙隆）的质量分数，%；

f——标样溶液的稀释比例，本文所述方法无稀释步骤，故绿麦隆、异丙隆均为1。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

采用紫外-可见分光光度计对1.4中配置的标样溶液进行光谱扫描，获得两者的紫外光谱图。如图1所示，实线为绿麦隆的紫外吸收曲线，虚线为异丙隆的紫外吸收曲线，由图1可知，绿麦隆在212 nm和246 nm处有较大吸收，异丙隆在204 nm和244 nm处有较大吸收。经过实验比较，选择245 nm作为检测波长，在此波长下峰形良好，绿麦隆和异丙隆吸收比例相当，无杂质影响。

图1 绿麦隆和异丙隆的紫外吸收光谱图

2.2 流动相的选择

绿麦隆、异丙隆两者结构相近，采用乙腈/水体系作为流动相对试样进行检测时，发现绿麦隆和异丙隆的液相色谱图主峰相互重叠、较难分离，因此采用分离度更好的甲醇作为流动相。经多次配比实验，最终确定流动相为甲醇∶水=60∶40，流速1.0 mL/min，绿麦隆和异丙隆两组分能得到较好的分离，如图2所示，峰型对称、尖锐，基线平稳，绿麦隆保留时间约为7.3 min，异丙隆保留时间约为8.2 min，绿麦隆峰宽为0.136 min，异丙隆峰宽为0.153 min，分离度为6。

图2 绿麦隆和异丙隆混合标准溶液的液相色谱图

2.3 线性关系

在1.5所述液相色谱操作条件下，调节混合标准溶液的进样体积分别为：2 μL、4 μL、6 μL、8 μL、10 μL，依次进行测定，以浓度为横坐标，绿麦隆（异丙隆）峰面积为纵坐标，制作出对应的峰面积/浓度关系图，线性拟合后得到图3。绿麦隆线性回归方程为y=68.6146x+2.5617（R=0.9998，n=5），异丙隆线性回归方程为y=72.4603x+1.9236（R=0.9999，n=5）。结果表明，该检测方法在测定浓度范围内呈现良好的线性关系。

图3 绿麦隆和异丙隆的线性关系图

2.4 准确性

称取5批次50%绿麦隆·异丙隆可湿性粉剂样品，分别准确加入一定量的标样，根据称取样品量和加入标样量计算出绿麦隆和异丙隆的理论含量进行分析，得到绿麦隆和异丙隆的实际含量，算出绿麦隆回收率在98.89%～99.21%之间，平均回收率为99.05%，异丙隆回收率在98.81%～99.20%之间，平均回收率为99.07%，均满足定量分析要求，结果见表1。