脉动真空压力灭菌器生物监测阳性的原因及对策

李丽仙，叶碧华

福建医科大学附属宁德市医院消毒供应中心 (福建宁德 352100)

生物监测是使用一类活的微生物制品与被灭菌的器械物品进行同步模拟对比测试，通过生物阅读器接收荧光物质转化光电信号来判断被灭菌物品器械表面微生物包括芽孢灭活情况，其是判断灭菌效果的金标准[1]。2015年7月至2018年7月我院3台脉动真空压力灭菌器共发现5例生物监测阳性情况，将其结果进行了系统的分析及验证，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

对2015年7月至2018年7月我院3台脉动真空压力灭菌器的生物监测结果进行研究。我院脉动真空压力灭菌器来自山东新华医疗器械股份有限公司器械股份有限公司，期间共进行了2 715次生物监测。

1.2 生物监测方法

采用美国3M1266压力蒸汽灭菌生物指示剂(快速型)及配套快速培养阅读器进行生物监测，将标准生物测试包置于灭菌器最难灭菌部位，一般置于排气口上方或物品中间，经过1个灭菌周期后取出，冷却10 min以上，在快速阅读器压碎孔挤破含培养液的玻璃安瓿，捏住生物指示剂帽端，在桌面上轻敲安瓿底部，使培养液与菌片混匀，与一支同一批号未经灭菌的对照管一起放于(56±1)℃培养锅内培养3 h后阅读结果。

1.3 生物监测结果判定

(1)在阅读器内培养阳性对照管和已灭菌的指示剂3 h，读出最终结果。阳性对照管必须得出荧光阳性结果(阅读器显示为红灯或“+”)；对于经过灭菌处理的指示剂荧光阴性(阅读器显示为绿灯或“-”)，表明灭菌过程合格。(2)如果通过颜色变化检测生物监测结果，应在阅读器内继续培养48 h，如培养液未发生颜色变化，仍为紫色，表明灭菌过程合格，黄色则表明有细菌生长，灭菌失败。

1.4 临床评价

分析脉动真空压力灭菌器生物监测阳性的原因及处理结果。

2 结果

3台脉动真空压力灭菌器共出现5例生物监测结果阳性，分析其原因，3例为生物指示剂培养液干涸，2例为生物阅读器荧光探测器故障。

3 讨论

3.1 生物监测阳性的可能原因

3.1.1灭菌器发生故障

新安装的灭菌器性能不稳定、旧的设备使用时间过长、减压阀和进排气阀等供蒸汽管路系统故障、门密封条和门传动等门系统故障、真空泵与空压机故障以及控制电路板和温度传感器等电控系统故障均可引起灭菌不合格[2]，导致生物监测阳性。

3.1.2阅读器自身故障

阅读器温度需保持56 ℃左右，当出现温度不当、阅读孔内存在异物、光学读取头长时间未检测与更换等状况时，会指出，给予乳腺癌患者保乳手术，可以显著提高患者的生命质量，有利于患者的正常生活。

直接影响阅读器工作状态，导致判读错误，引起假阳性状况。

3.1.3自含式生物指示剂问题

生物指示剂超过有效期；与对照生物指示剂不属于同一生产批号；培养液干涸；菌片与培养液未充分接触；溴甲酚紫未按规范配制影响菌片生长；生物指示剂灭菌前细菌已繁殖，颜色由紫变黄，即使通过灭菌处理芽孢已被灭活，改变的黄色也不能恢复到紫色[3]；生物指示剂含菌量超标指示菌抗力太强时，正常灭菌程序不能杀灭芽孢等。

3.1.4灭菌时工作人员操作不规范

灭菌物品清洁不彻底，不能清除有机物等污染物，使躲藏在有机物内的细菌不易被灭菌剂杀死；装载量超过90%内室容积时、装载物品排放不规范、待灭菌包体积与重量超过要求、包装材料选择不合适等影响蒸汽渗透，均可能引起灭菌失败，导致生物监测阳性。

3.1.5生物监测中培养操作不规范

工作人员的手接触过带有荧光标记的包装材料等物品，而后接触生物指示剂，致使生物指示剂沾染上荧光物质，操作过程中手指触摸生物指示剂阅读部分、指示剂帽未及时按下、未冷却至室温、玻璃安瓿压碎方式不当等均会直接影响生物指示剂状况，引起检测过程中污染，导致假阳性状况[4-5]。

3.2 脉动真空压力灭菌器故障的应急处理措施

脉动真空压力灭菌生物监测为阳性时，需立即启动应急预案。(1)通知临床各科室立即停止使用上次生物监测合格以来的所有灭菌物品。(2)紧急调配人员全力召回上次生物监测合格以来的所有灭菌物品，尽可能帮助相应科室寻找到替代物品使用将损失降到最低。(3)立即汇报院感科、医务部、护理部、分管院长并填写提交器械灭菌不完全召回记录表，说明召回原因，召回物品种类、数量、所在科室，使用了灭菌可能不合格物品的患者信息及处理经过与整改措施。(4)对于已经使用该灭菌器灭菌处理物品的患者，院感科联合护理部及医务科建立此类患者的档案，跟踪感染发生情况并对其感染源进行综合分析，实施对症处理。(5)灭菌器的问题排查。立即停用出现生物监测阳性相应灭菌器，通知厂家工程师与医院工程部维修人员第一时间赶到现场维修调试设备并进行3次物理监测、化学监测及生物监测复测验证，均未发现灭菌器问题。(6)组织脉动真空压力灭菌器操作人员、生物监测操作人员、灭菌器厂家、生物阅读器厂家工程师、生物指试剂厂家、消毒供应中心全体人员以及院感科人员参加专题讨论，逐一对灭菌器及相关操作、生物阅读器及操作、生物指示剂进行排查。

3.3 脉动真空压力灭菌器使用中的管理对策

由于脉动真空压力灭菌生物监测为阳性时，灭菌不合格物品的使用将会直接增加患者医院感染风险，严重时将威胁患者生命安全，引发医患纠纷，并影响医院正常运转，出现假阳性时在排查原因和验证过程中会消耗医院人力、物力、财力等资源，对医院的长远发展造成极大影响。在出现生物监测阳性结果时，不能片面判断，需综合评价并查找原因，否则不但影响器械及设备的周转，而且会增加不必要的维修成本及耗材成本。

为了更加有效地防范及控制医院感染发生的危险，我院对3年来生物监测的5例阳性结果进行了分析与研判，结果提示在使用脉动真空压力灭菌器使用中需加强管理，可从以下几点实施改进。(1)重视灭菌器的安全管理。严格把控灭菌设备的验收与质量审核，制定设备维护、保养制度，采取“日清洁、月维护、季保养、年全面检修”的预防性维护保养，由消毒工作人员每日清洁灭菌器的门密封圈、腔体内壁、装载架以及排气口滤网，及时对灭菌器进行保养，配合厂家工程师及时更换易损配件，定期对设备性能进行测试，并排查相关故障隐患，保持灭菌器正常运作。(2)保持生物阅读器处于持续通电状态，每周用95%乙醇清洁培养孔壁，保证培养孔盖完全关闭，防止灰尘或异物掉入，加强仪器日常维护，若出现异物或液体不慎污染漏入时及时用无菌棉签清洁培养孔，必要时联系专业维修人员，建议专业工程师每年定期检测生物阅读器是否正常工作。(3)在生物监测过程中，避免使用自制生物监测包，应采用专业一次性生物测试包；加强生物指示剂的质量监管，加强生物指示剂的保存管理，禁止将生物指示剂放在紫外线照射、气体熏蒸环境下保存，避免影响菌株活性，并定期检查生物指示剂保质期，对于过期生物指示剂及时进行废弃[6-7]。严格按要求取同一生产批号的生物指示剂为对照管，以保证对比有效性。(4)在灭菌过程中需严格按照灭菌规程进行操作，向操作人员介绍灭菌不合格的危害，加强操作人员的重视。正确装载待灭菌物品：应使用专用灭菌架或篮筐装载灭菌物品，注意灭菌器柜室内的物品放置保持大小、松紧适宜；敷料包放置上层，金属包放下层等以利于蒸汽的进入与冷空气的排出；其装载量要求<90%且>5%的柜室容积；正确装载生物测试包，注意与化学测试包分开放置等。(5)定期对实施生物监测操作人员进行培训，严格按照操作标准进行监测。操作前按照六步法洗手，避免接触带有荧光剂的物品；操作时戴好手套；规范菌片采集及培养过程，采取无菌镊子先夹取灭菌菌片，后使用其他无菌镊子夹取对照菌片，以避免交叉污染，手指勿触及生物指示剂阅读部分等[8]。(6)WS310.3-2016医院消毒供应中心 第三部分提出：清洗消毒及灭菌效果监测标准要求生物监测应至少每周1次，遇有灭菌植入物时每锅进行生物监测，由于我院灭菌物品用量多、周转快，若每周生物监测1次，发生阳性情况时大部分灭菌物品已被患者使用，则带来很大的安全隐患，因此，我科制定每天每锅进行生物监测的措施，缩短时间，及时发现灭菌不合格物品，最大限度控制医院感染的发生。

综上所述，脉动真空压力灭菌器生物监测阳性时影响医院正常运转并易发生院内感染，威胁患者的安全，在使用中应加强管理，发生监测阳性时应综合分析、排查和确定阳性的原因，并针对原因实施正确有效的处理措施，积极控制院内感染发生。