云浮地区1 927名妇女HPV感染状况及基因分型情况分析

江炎章 温日葵 欧雅文

宫颈癌目前已成为威胁全世界女性健康的第二大恶性肿瘤，宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒(HPV)感染密切相关[1]。随着人们健康意识的提高，HPV的检测越来越受到临床医生的重视和女性的关注。由于人们生活方式的改变，宫颈癌的发病率有逐年升高的趋势[2]。根据相关调查资料显示，HPV 感染具有明显的地域性,不同国家或地区HPV的感染率及型别分布均存在差异[3]。全面掌握地区女性宫颈 HPV 感染的相关危险因素，对于 HPV 感染与宫颈癌病变的早期防治有着十分重要的意义[4]。本研究对云浮地区女性人群中HPV感染状况及基因分型情况进行调查分析，旨在发现本地区女性HPV感染率和感染的主要HPV基因型的分布及其流行病学特征，可为本地区宫颈癌的防治提供科学的依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析我院在2016年11月—2018年7月进行宫颈癌筛查的女性1 927例，所有就诊者均自愿进行HPV-DNA检测。

1.2 方法

1.2.1 采样方法 用亚能生物技术(深圳)有限公司生产的宫颈脱落细胞采集器(宫颈刷)进行采样。取出宫颈刷置于宫颈口，单方向旋转4～5周以获得足量的上皮细胞标本，然后将宫颈刷头部放入细胞保存液管中，沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断，旋紧管盖，做好标本标识。

1.2.2 标本保存 标本一经采集，应尽快送检；标本室温保存不超过12 h，2～8℃保存不超过7 d，-20℃以下保存不超过3个月。避免反复冻融。

1.2.3 主要仪器 亚能YN-H16分子杂交仪。

1.2.4 试剂 使用亚能生物技术(深圳)有限公司生产的人乳头瘤病毒基因分型(23型)检测试剂盒。

1.2.5 检测方法 PCR和DNA反向点杂交法。

1.2.6 实验原理 利用HPV的基因特点设计特异引物，可以扩增出23种HPV基因型的目的片段，再将扩增产物与固定在膜条上的包括17种高危型和6种低危型在内的分型探针进行杂交，依据杂交信号的有无来判断各HPV基因型的存在。

2 结果

1 927例女性的HPV-DNA结果中，检测HPV阳性的有465例，阳性率为24.13%；在感染 HPV 的 465 例女性中，感染高危型 HPV(包括16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、53型、56型、58型、59型、66型、68型、73型、82型) 者有 407 例，感染率为21.12%，占总感染者数的87.53% ；感染低危型HPV(包括6型、11型、42型、43型、81型、83型)者有 58 例，感染率为3.01%，占总感染者数的12.47% 。见表1。

表1 1 927例标本HPV DNA结果分析 (n,%)

注：1)多重高危型指含有至少一个或多个高危型HPV基因；2)多重低危型指所含基因型全为低危型HPV基因

其中感染单纯高危型HPV的主要基因型分别为HPV-58型、18型、56型、68型、66型等，分别占总感染者数的13.76%、11.40%、6.02%、4.73%、4.52%；感染单纯低危型HPV的主要基因型分别为HPV 11型、43型，分别占总感染者数的4.52%、3.66%。见表2。

表2 361例感染单纯型HPV的基因型结果分析 (n,%)

3 讨论

目前大量的研究与实践结果表明，严重危害女性健康的宫颈癌是惟一一种可以经过医学干预使发病率和死亡率下降的人类恶性肿瘤[5]。感染 HPV基因型在人群中的分布有近130多种亚型，根据在致宫颈癌的危险性不同,分为高危型HPV和低危型HPV两大类[6]，而且感染不同HPV-DNA亚型其致病性和后果也有不同[7-8]。研究证实，高危型 HPV的持续感染是宫颈癌发生的前提条件[9]。

本研究结果显示，云浮地区1 927名女性体检检测 HPV总阳性率为24.13%，其中高危型HPV感染率为21.12%，占总感染者数的87.53% ；低危型HPV感染率为3.01%，占总感染者数的12.47% 。感染单纯高危型HPV的主要基因型分别为HPV58型、18型、56型、68型、66型、59型和31型；感染单纯低危型HPV的主要基因型分别为HPV11型、43型；多重高危型感染率为5.29%，占总感染者数的21.94%，以携带高危HPV58型为主。HPV的多重高危型感染比单一高危型感染会增加宫颈病变的发展[10]。

由于HPV感染的分布有地域性，现行引入我国的宫颈癌疫苗不一定完全适合我国人群[11]。目前我国引入的宫颈癌疫苗有二价、四价和九价三种，其中二价疫苗包括HPV-16型和18型；四价疫苗包括HPV-6型、11型、16型和18型；九价疫苗包括HPV-6型、11型、16型、18型、31型、33型、45型、52型和58型。由此可见，目前的三类宫颈癌疫苗所包含的HPV-DNA类型与云浮地区女性感染的主要HPV-DNA类型不完全相符，接种这三类宫颈癌疫苗并未能完全很好地预防和保护本地区女性远离宫颈癌的危害，希望宫颈癌疫苗的研发可以向多组合HPV基因型的方向发展，可以根据不同地区女性感染主要HPV基因型进行选择性接种组合疫苗，从而能够更好地预防女性宫颈癌的发生。同时云浮属于广东省的粤西山区城市，居民经济收入不高，目前的宫颈癌疫苗价格相对比较昂贵，很多家庭都消费不起，希望政府能够在预防宫颈癌这方面投入更多的财政补贴，让更多的女性能够接种到宫颈癌疫苗，从而更好地预防宫颈癌的发生，提高女性的生活质量和幸福感。