全血标本肌钙蛋白I（TnI）应用AQT90FLEX分析仪检测的方法学评价

马军 张爱民 天津市中西医结合医院南开医院 （天津 300100）

内容提要： 目的：研究全血标本肌钙蛋白I（TnI）应用AQT90FLEX分析仪检测的方法学。方法：随机抽取2019年3月1日～5日本院急诊患者的静脉血标本63份。采用AQT90FLEX分析仪检测全血标本肌钙蛋白I，验证分析测量范围、携带污染率、功能灵敏度、参考区间。结果：0.010～16.0μg/L范围内的线性良好，携带污染率、功能灵敏度分别为0.018%、0.010μg/L，TnI浓度通过参考区间验证；63份全血标本中TnI浓度＜0.010μg/L的比例为80.95%，处于正常范围内，19.05%的全血标本存在TnI浓度偏高情况。结论：AQT90FLEX分析仪应用在全血标本肌钙蛋白I的检测中具有线性良好的优势，且携带污染率、功能灵敏度可达到质量要求且参考区间验证通过，针对全血标本TnI浓度高的患者应尽早进行心电图检查，便于早期发现及防治急性心肌梗死。

如何快速将急性心肌梗死患者与胸痛患者准确鉴别，对于及时进行对症治疗、改善预后具有重要作用。全血标本肌钙蛋白I（Troponin I，TnI）在急性心肌梗死的诊断中具有较高的特异性和敏感度，可作为快速辅助诊断心肌梗死突发的有效指标，但是在临床实际应用过程中，采用血浆标本对TnI进行检测具有检测耗时长的不足[1]，耽误患者的治疗时间。AQT90FLEX分析仪是一种全自动的床旁快速免疫分析仪，对全血标本TnI进行检测的时间较短，有利于患者尽快接受对症治疗，本文旨在分析应用AQT90FLEX分析仪检测TnI的方法学，正文详细内容如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

研究对象：来自本院急诊患者的静脉血标本63份（属于2019年3月1日～5日）。健康体检者的临床诊断结果正常，血液常规、免疫检验、生化、B超、心电图检查结果均正常。静脉血标本均经乙二胺四乙酸二钾（EDTA—K2）抗凝，静脉血标本对应者的一般信息为：男28例，女35例；年龄为18～97岁，平均65.38岁。

1.2 方法

（1）分析测量范围评价：以EP-6A文件为依据，将TnI浓度靠近线性范围上限的患者全血标本作为高值浓度（H），TnI浓度低则表示为低值浓度（H），形成系列检测标本，再使用AQT90FLEX分析仪检测TnI，取每个浓度检测两次的平均值，分析试验数据的可靠性之后，进行多项式回顾分析。

（2）携带污染率：对高浓度TnI全血标本、低浓度TnI全血标本分别检测三次，得到H1、H2、H3、L1、L2、L3测定值，携带污染率为（L1-L3）×（H3-L3）×100.00%。

（3）功能灵敏度：以EP-7A文件为依据反复测定TnI低值标本，得到±s、变异系数（CV），功能灵敏度即为CV不足20%的试验样品所具有的分析物水平。

（4）参考区间：从在本院进行体检的健康体检者中随机选择5例进行验证，均检测TnI，统计检测结果，当检测结果在参考区间（TnI＜0.023μg/L）内的数量在90%及以上，则说明可接受，已通过验证，针对未通过验证的情况，需进行参考区间确认试验。

1.3 观察指标

观察分析测量范围、携带污染率、功能灵敏度、参考区间。观察检测结果。

1.4 统计学分析

将观察指标数据录入统计学软件SPSS21.0、Microsoft Excel 2010中进行处理，用[n(%)]的形式表示计数资料，χ2检验，用±s的形式予以表示计量资料，t检验，采用多项式回归分析，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 分析测量评价结果

直线回归分析显示线性范围为0.010～16.0μg/L，提示线性良好（r=0.989）。

2.2 携带污染率

携带污染率为0.018%。

2.3 功能灵敏度

TnI浓度为0.010μg/L的CV值为16.00%，在20%以内，结果为可接受，表明TnI的功能灵敏度即为线性范围最低值（0.010μg/L）。

2.4 参考区间

5名健康体检者全血标本的TnI浓度为0.010μg/L以下，均在参考区间内，结果为通过。

2.5 检查结果

经AQT90FLEX分析仪检查结果显示，63例急诊患者的全血标本中TnI浓度＞0.010μg/L者有12例（19.05%），其余51例（80.95%）患者的全血标本中TnI浓度均＜0.010μg/L，提示51例患者的TnI浓度在正常区间内。

3.讨论

在临床全血肌钙蛋白I的检测中多采用免疫分析仪，且不同的厂家生产的免疫分析仪及配套的质控品存在差异，导致全血肌钙蛋白I的检测结果也出现差异，因此为了减少检测结果的误差，提高检测准确率，选择一种准确性高的仪器和检测方法十分重要。

全血肌钙蛋白I是诊断急性心肌梗死敏感性、特异性均较高的指标[2]，AQT90 FLEX分析仪应用在全血肌钙蛋白I检测中采用时间分辨荧光免疫分析法，其原理在于：预先固化生物素酰化的单克隆抗TnI抗体至检测杯里的链霉素蛋白表面，并在捕获抗体表面分别加入到分隔层和示踪抗体，于分析过程中将标本、分析液自动进入至含有特应试剂的试杯中，示踪抗体、捕获抗体与TnI抗体形成一个三明治样结构，孵育结束后利用时间分辨荧光免疫分析法对干燥试杯表面的铕标记示踪抗体信号进行测定，通过铕标记信号直接测定被分析物质，将测得的信号直接向浓度转化，便于工作人员直接观察和记录。同实验室的大项检验设备进行比较，AQT90 FLEX分析仪可为用户提供简便和安全的操作，能够连续随机进样，最快10min出结果，具有无污染的特点，特别适合应用在急诊胸痛TnI的检测中，从而有利于快速鉴别诊断胸痛、急性心肌梗死，便于患者及时接受对症治疗。

本文从多个方面对AQT90 FLEX分析仪的检测价值进行了分析，以NCCLS EP5-A文件为参照，整体评估各个批次后发现AQT90 FLEX分析仪的分析测量范围、携带污染率、功能灵敏度均能满足临床TnI检测需要，参考区间能够满足性能要求。本次研究中检出12例患者的TnI浓度不在正常范围内，提示其存在急性心肌梗死发生风险，应尽早进行心电图检查。另外易火春，朱建辉，王思瑜，等[3]在《AQT90 FLEX分析仪检测全血肌钙蛋白I的方法学评价》一文中还提到，不同浓度质控品的TnI总CV在规定的允许误差范围内，提示总不精密度处于可接受范围内；质评物检测结果在规定允许的误差范围内，证明了AQT90 FLEX分析仪用于检测全血肌钙蛋白I具有较高的精密度和准确度，而本次研究中由于尚无质控品及质评物，因此无法进行精密度和准确度检验。

总而言之，在全血肌钙蛋白I的检测中采用AQT90 FLEX分析仪具有较高的临床价值，可为临床检测急性心肌梗死提供科学、有效的参考依据。