ACL-200血凝仪检测凝血四项影响因素探究

2019-01-13郭吉王爱玮天津市黄河医院检验科天津300110

中国医疗器械信息 2019年10期

郭吉王爱玮天津市黄河医院检验科（天津 300110）

内容提要：凝血四项检验在临床应用十分广泛，尤其是血栓性疾病、出血性疾病，以及内源性或外源性凝血因子缺乏/减少等疾病中属于常规检验试验。凝血四项包括PT、APTT、TT、Fib，主要应用血凝分析仪检测，其中ACL-200血凝仪已有数十年的应用历史，在血凝四项检验中作用巨大。不过，因一些因素的影响，可能会影响其凝血四项检验结果，需加强重视。本文就ACL-200血凝仪检测凝血四项的影响因素进行了探讨，希望有助于相关工作开展。

凝血四项检验在临床疾病诊断中有着不错的价值，在临床应用十分广泛，包括凝血酶原时间（PT）、活性部分凝血酶原时间（APTT）、纤维蛋白原（Fib）及凝血酶时间（TT）。这四个指标相互独立，又可互相配合，比如APTT主要测定内源性凝血系统病变，而PT则主要应用在外源性凝血系统过筛试验，相比玻片法检测凝血时间优势明显[1]。ACL-200血凝仪已有多年应用历史，证实其性能稳定，故障发生率低，操作简单方便，且效率高，相比比浊离心法分析准确度高，重复性强。但是，从过去临床报道及本院实践来看，存在部分标本检验结果有误差，为此需要对影响ACL-200血凝仪检测凝血四项指标的因素进行分析，才能进一步提高检验结果。本文进行了如下分析。

1.影响因素之一：标本

ACL-200分析仪检测凝血四项影响因素最为常见的当属标本，而具体又主要囊括如下一些小因素：①采集标本方面：采集标本若进展不顺利，则可能导致PT与APTT假性延长。故而，确保采集规范就十分关键，一般选择大号针头，采血管则选择加用枸缘酸钠溶液的抗凝真空管；采集时务必一针见血，尽量不要发生淤血；避免损伤组织，减少外源性凝血因子进入；选择压力尽量小的止血带，因压力过大、束缚时间较长会对血液浓缩、内皮细胞释放t-PA造成影响，使得某些凝血因子的活性升高；采血务必平稳顺利进行，避免出现气泡；尽可能单独采血，若需和其他项目一起进行，则选择第一管最佳。②抗凝剂浓度及用量方面：抗凝剂浓度准确与否，直接影响试验结果准确性，一般推荐的枸缘酸钠：血液为1:9，而枸缘酸钠溶液的浓度则选择0.109mmol/L。确保抗凝剂与血液比例准确，因为抗凝剂在血液标本中的绝对含量会导致血浆钙离子水平改变，影响试验结果。但是，前面所说的抗凝剂与血液标本1:9比例，实际上指的是抗凝剂和正常压积血液间的比值[2]。为此，在实际操作中，应根据患者的红细胞比值（Hct）灵活调整抗凝剂用量。采血结束后及时混合均匀，但应避免过度用力震荡，影响血液标本。③标本制备方面：测定PT与APTT时一般宜缺乏血小板的血浆最佳，为此使用ACL-200血凝仪时，可用2500×g离心处理15min，将血小板去除后获取最低血小板含量的血浆，再进行PT与APTT检测。在这期间，应尽量避免标本收集、离心出现溶血，因溶血后红细胞磷脂表面有凝血活酶作用，排出的红细胞物质会导致血浆凝固时间发生变化，影响检验结果。④标本放置及保存方面：标本放置与保存影响凝血四项检验结果主要在其放置时间与温度两个方面，有报道对同一标本分成几份后放在室温、4°C下保存4h、8h、10h、24h进行了调查，均用血凝分析仪测定凝血四项，发现室温下标本放置8h PT差异不明显，放置4h APTT差异不明显，放置24h TT与Fib差异不明显，但在4°C下标本放置24h四项指标均无明显差异[3]。说明放置的温度、保存的时间主要对PT、APTT影响较大。结合有关文献及自身实践，笔者认为标本采集后尽量及时送检，要求采血到检验时间＜4h，因超过4h后凝血因子不稳定，放置时间越长，试验结果也随之延长。若未能及时检测，则可将标本放置在2～8°C下进行保存，保存时间不宜超过24h[4]。⑤脂血症标本方面：若标本来源者存在脂血症，因其标本存在混浊，容易干扰光散射，进而影响Fib真实含量，使得检测结果不准确。基于此，若患者有脂血症，则应严格控制其标本，先将血浆中的脂肪去除，之后再进行检测。

2.影响因素之二：试剂配制

试剂的选择对于检测结果影响也比较大，对于ACL-200血凝仪而言，尽量选择自身配套的原装试剂。原装试剂应及时检查是否在有效期内，看有无冷藏，尤其是氯化钙，若未冷藏，在空气中会受到二氧化碳的干扰，导致钙离子水平下降，暴露时间较长则会影响检测结果不准确，这就需要根据当日工作量及检测项目来进行试剂的配制。试剂配制尽可能选用无菌蒸馏水处理，轻轻摇匀，减少震荡，放置在15～25°C下0.5h后检测，检测前应再次摇匀，可使得微粒重新均匀悬浮，而不用的试剂则将其倒回瓶子，并且放置在冰箱内保存。

3.影响因素之三：定标血浆及质控

ACL-200血凝仪分析时采用的是定标血浆，主要是以此建立定标曲线，然后对整个仪器状况进行监控。ACL-200血凝仪多采取冻干血浆，用前则复溶，应按照说明书准确配置，放置在适合的温度下0.5h，应用前适当摇匀，减少剧烈震荡，影响检测结果。血凝仪凝血四项检验结果应做好质量控制，而室内质量控制也是保障实验室检验结果的关键，为此应每天做好质量控制，同时做好记录，以便后期可以核查。室内质控品应合理选择，要求其质量可靠、稳定性好，一旦选定，除非特殊情况，不能轻易更换；质控品应准确应用及保存，根据质控品的说明书严格操作与保存，超过质控品保质期的不能使用，使用时轻微摇匀，使得内容物可充分混合，切勿剧烈摇晃，避免泡沫生成[5]。若室内质控失控，则填写失控报告单，上交专业主管，经专业主管进行分析，查明原因，进一步整改。

4.影响因素之四：操作

和操作有关的因素也会影响ACL-200血凝仪凝血四项检验结果，比如环境因素，温度与湿度过大，电磁干扰严重等都会导致仪器的整体性能下降，从而造成检验结果不准确。结合文献及自身实践，发现与操作有关的影响因素最主要的还是在于其使用与保养方面。只有正确的使用与保养及维护，才能维持仪器正常运转。操作人员应培训、考核后持证上岗，操作务必按照仪器的说明书执行，每天工作开始与结束都应及时冲洗，将残留的标本与试剂充分冲洗干净，维持分析针与冲洗池清洁。仪器表面、样本盘与分析盘均采取纱布清洁，然后以蒸馏水擦拭干净，定期维护仪器，避免故障，保障其处于最佳工作状态，延长使用的寿命。