临床中微生物送检标本在培养前进行涂片镜检的临床意义

吕其凡

（丹东市妇女儿童医院，辽宁 丹东 118000）

随着临床医疗技术水平的提高，抗菌药物广泛应用，耐药性明显增加，为了保证用药安全性，国家相关部门加强了对抗菌药物的管理以及微生物检验工作的重视[1]。微生物送检标本质量好坏以及病原菌能否被准确检出，直接影响药敏试验准确性。因此研究一种有效筛查送检前不合格送检标本、提高病原菌检出准确率方法，是检验科研究主要方向。本次研究中，分析涂片镜检用于微生物标本送检前培养的临床价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取我院送检的微生物标本400份，其中分泌物标本240份、尿液标本80份、痰液标本30份、其他标本50份。

1.2 试剂及仪器：应用试剂为快速革兰染色液，检测仪器为微生物鉴定仪器以及配套鉴定板条。

1.3 方法：无菌标签蘸取适量脓液、痰液、分泌物标本，上述标本制做薄片。尿液以及胸腹水处理方法：取新鲜标本5～10 mL，置于无菌试管中，取沉渣制备涂片，涂片风干后，经革兰染色处理，并进行镜检。标本合格标准以及阳性判断标准，痰标准：镜检显示外观脓性，或检查显示血性存在，低倍镜下视野标准显示鳞状上皮细胞少于10个，白细胞超过25个，部分白细胞少于25个，但有显著的染色以及的形态特征，需进行培养，并跟踪检验结果；脓液、分泌物以及胸腹水标本：保持无菌状态，收集检验，镜检涂片显示鳞状上皮细胞标本曾有污染，需重现选取标本；尿标本：至少选择10个油镜视野，且视野中存在细菌，并注意观察细菌，区分不同种类，若检查细菌种类超过3种，则判断标本不合格，已被污染，需重新制取。涂片与培养结果符合：培养结果检出致病菌，与镜检显示疑似病原菌，基本相符，区分致病菌与污染菌，经镜下查看细菌或真菌情况。

1.3.3 培养及鉴定：痰液标本接种不同平面上，经24～48 h孵育；胸腹水标本接种于麦康凯平板、肉汤增菌及血平板上，放于恒温箱中，温度控制为（35±2）℃中，孵育24～48 h；脓液、尿液以及分泌物接种在麦康凯平板、血平板上。观察优势致病菌或纯培养菌，并取菌落经革兰染色、分离以及微生物检定仪鉴定。

1.4 统计学分析：本次研究数据以SPSS19.0软件分析，计数资料用百分率表示，独立样本用χ2检验，P＜0.05，有统计学意义。

2 结果

2.1 筛查不合格标本：依据标本合格判断标准：400份送检标本中不合格19份（痰液标本6份、尿液标本13份）。痰液培养阳性8份，其中肺炎克雷伯菌、白念珠菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、溶血葡萄球菌、其他分别为2、2、1、1、1、1份；尿液培养阳性52份，屎肠球菌、产气肠杆菌、恶臭假单胞菌、大肠埃希菌、白念珠菌则分别为28、6、6、6、6份；分泌物培养阳性33份，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白念珠菌、肺炎链球菌、其他则分别为20、4、3、3、1、1、1份；其他培养阳性10份，大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、木糖葡萄球菌、液化沙雷菌、金黄色葡萄球菌则分别为5、2、1、1、1份。

2.2 涂片镜检与培养阳性符合率对比：381份合格标本中检出致病菌103株，其中痰液标本8株，尿液标本52株，分泌物标本33株，其他10株。合格标本中，痰液、尿液、分泌物及其他标本镜检阳性率分别为62.5%（5/8）、76.9%（40/52）、87.9%（29/33）、80.0%（8/10），镜检结果与培养结果基本无差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨 论

临床中涂片镜检是通过将送检标本制作薄片，进行革兰染色，显微镜下观察微生物形态，具有早期诊断、鉴别细菌、判断标本合格与否、鉴定细菌的作用[2-3]。通过送检前镜检，不仅可以用于检验标本质量，还可用于指导临床医师用药治疗。

本次研究中，总结400份送检标本中，送检前镜检结果显示不合格19例，其中镜检显示6例为痰标本，镜检分析为鳞状上皮细胞检出超过25个低倍视野，白细胞水平低于10个低倍视野，判定结果为唾液；52例为尿液标本，镜检可见有革兰阳性球菌、革兰阳性杆菌以及革兰阴性杆菌，与培养结果基本相符，分析检出不合格是标本受污染。经镜检筛查分析，分析不合格标本具体情况，用于指导临床，临床可明确检验工作中存在的问题，并相应改善，提高检验标本的质量合格率，提高检验结果及时性以及准确性，同时减少经济损伤，避免因标本不合格，而影响诊断结果，出现临床误诊[4]。

381份合格标本中，培养结果显示检出10株3致病菌，涂片镜检阳性率为82例，两组对比无明显差异。分析涂片阴性培养阳性发生原因：①标本可能在接种过程中被污染；一些细菌镜下形态为格兰阴性球杆菌，类似奈瑟菌，容易混淆；②取材不适合，或制作的图片太薄，不能准确用于反映标本具体情况；③涂片经染色处理后，背景为红色，而镜检检出病菌也是红色，诊断时容易误诊漏诊，这种多发生于痰液标本中[5]。总结涂片阳性培养阴性原因：涂片检查，脓细胞吞噬细菌，不能准确检出细菌，再加上死亡后尸体和白细胞会释放抑制细菌繁殖的物质；标本中L型菌、缓慢生长菌或苛氧菌，会因培养环境、培养时间以及培养基营养不够，而停止生长；标本采集前仍应用抗菌药物，检查体内有明显的抗菌药物残留，导致细菌被杀灭或抑制，不利于检出细菌[6]。

经分析研究，标本培养前涂片镜检与培养结果密切相关，因此临床可通过染色镜检，提前将镜检结果告知临床，并为临床医师用药提供可参考依据，这对于提高检验结果准确具有重要意义，应引起临床足够重视。涂片染色镜检为一种方便有效的微生物检验方法，可提高微生物检出的速度以及准确率，用于临床具有重要的意义。微生物标本经镜检筛查合格标本，提高检验标本质量，避免培养结果准确率偏差太大，提高阳性检出率。