酶联法在家畜尿液及组织中检测瘦肉精的应用

杨 丹

（铁岭县市场流通事务服务中心，辽宁 铁岭 112000）

“瘦肉精”是一种类似白色的结晶体粉末，味微苦，无臭。化学性质相对稳定，只有温度达到172℃才会分解。因此，普通的加热方法难以将其毒性破坏。它并不是一种特殊的物质，而是一类简单的化学用品，是一种能加快瘦肉生长的廉价药物添加剂，只要是增加瘦肉率的物质都可以称做“瘦肉精”。目前，检测瘦肉精的方法有高效液相色谱法、酶联免疫吸附法、液相色谱质谱联用法和气相色谱质谱联用法等。其中，酶联免疫吸附实验是目前检测家畜饲料、产品以及组织、尿液中瘦肉精的最常用、最快速的方法，即利用免疫学中的抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用，经过化学方法将植物辣根过氧化物酶与克伦特罗结合，结合成酶偶联克伦特罗。大多实验室采用“筛选”和“确证”相结合的方法进行测定，通常以前两种作为“确认”方法，后两种作为“筛选”方法，既可提高测试结果的准确性和可靠性，又可处理数量较多的待测样品。“瘦肉精”在不同组织中的残留程度不同，注意测定时选取残留量较高的组织。一般来说，眼睛等组织的样品中含有极少的残留量，肌肉中的脂肪量相对较高，留量较高且容易处理，切记所有试剂及样品在开始检测前必须回升至室温。

1 酶联法检测家畜血液、尿液中的瘦肉精含量的测定

取新鲜血液，将其加入15毫升离心管，4000转/分钟，离心5分钟，取上清液。取1毫升血清样品于50毫升离心管中，加入1毫升蒸馏水，振荡5分钟，4000转/分钟，离心5分钟，取上清液。

采集尿液，过滤或离心5分钟，4000转/分钟，取上清液。

测定结果判定。判定阴阳性标准是以浓度1微克/升标准液的OD值，当测定数据小于标准值时，判定为疑似阳性，当测定数据大于等于标准值标准值时，判定为疑似阴性。判定为疑似阳性的样品须通过气相色谱-质谱法进行确证。大量数据表明尿液中可能含有瘦肉精，但并不能够排除是否含有人为因素，而血液却大不相同，血液是生物体内的“根本”，可以大部分排除人为因素，防止“掉包”事件的发生。

2 酶联法检测家畜组织中的瘦肉精含量的测定

肉组织中瘦肉精的检测，肉眼可以看出含瘦肉精的猪肉颜色较为鲜艳，颜色一般呈现出鲜红色，但符合食品安全生产标准的猪肉的颜色则是淡红色。含有瘦肉精的猪肉皮下脂肪层比健康的猪肉要薄很多，基本小于1厘米，因此切下来的肉也相对较软。

毛发中瘦肉精的检测，毛发较于其他部位的取材比较容易，且药物代谢较慢可长期存在，因此为毛发分析提供了一种扩展的追溯性检测了可能性。猪毛样品在进行盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解后，以盐酸二苯拉林为内标物质，采用液相色谱串联质谱可检测定量。结果显示此方法高灵敏度、强特异性，对完善瘦肉精检测技术具有非凡意义。

肝脏中瘦肉精测定，肝脏中瘦肉精测定必须在室温下进行操作（23℃为最适温度）。对于处理样品中带有低脂肪的组织肝或肉时，需进行均质、离心、混合、再离心等一系列步骤才可以获得最终样品。若样品没有完全粉碎，可能与盐酸等试剂没有进行充分地混合，使提取的“瘦肉精”丢失了小部分，将会导致实验结果偏低；在肝等实质器官，若在采样时采取了吸收“瘦肉精”能力较弱部位的样本，也会导致最终实验结果偏低，由于操作过程的主观原因，也可造成各种误差。例如，加样试剂不完全，一些试剂残留在微孔的边缘上，在加抗体溶液时不完全，加入标准或处理好的样品或基质时，显色底物试剂不完全，也可使最终结果不准确。若在加样时将液体溅入另一孔中，洗涤液溅入另一个位置，可能也会造成的酶标板孔之间互相污染，会对检测结果产生影响。

综上所述，要想使在养殖环节中真正的不再使用瘦肉精，就必要加强生猪在被宰前进行尿检工作，并对不符合食品质量安全的养殖户进行严重的惩罚，以加强社会以及政府的大力支持。只有这样才能将私自添加瘦肉精的违法行为被彻底制止，使人们所食用的猪肉变得愈加健康、安全。