儿童急性呼吸道感染病毒谱分析

范 雪，乐 原，李 静

1锦州医科大学附属第一医院，辽宁锦州 121000；2抚顺矿务局总医院，辽宁抚顺 113000

儿童是呼吸道病毒易感人群，约有80%的急性呼吸道感染是由呼吸道病毒引发[1]。由于性别、年龄、季节等因素的影响，呼吸道病毒种类存在差异[2-3]，不同病毒的易感人群也不同。呼吸道病毒感染后可以引起呼吸道组织器官病变，国内外常见的7种呼吸道病毒包括呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)、腺病毒 (adenovirus，ADV)、流感病毒A型(influenza virus type A，Flu-A)、Flu-B、(paroinfluenza virus type 1，PIV-Ⅰ )、PIV-Ⅱ、PIV-Ⅲ。为了解抚顺矿务局总医院儿童急性呼吸道感染病毒谱，开展呼吸道病毒性病原实验室检查，对7种常见呼吸道病毒进行检测分析，进一步探讨呼吸道病毒感染的相关因素，为临床诊疗病毒性感染提供参考。

对象和方法

1 对象 选择2017年2月- 2018年3月抚顺矿务局总医院儿科门诊及病房收治的急性呼吸道感染患儿860例，年龄0 ～ 14岁，男性345例，女性515例。入组要求：1)年龄＜14岁，病程＜7 d；2)符合急性呼吸道感染诊断，具体参考《褚福堂实用儿科学》(第8版)诊断标准[4]；3)每个患儿不重复入组。

2 标本采集 由专业临床医生或护士采集患儿入院当天或次日的鼻咽拭子，从患儿的鼻咽部取鼻咽分泌物，具体方法是将鼻咽拭子深入鼻腔3 ～ 4 cm处，并转动1周，将样本置于含0.9%氯化钠注射液2 ml的无菌收集管中，立即送到实验室待检。

3 病毒抗原检测 采用直接免疫荧光法，分别检测RSV、ADV、Flu-A、Flu-B、PIV-Ⅰ～Ⅲ7种病毒抗原。呼吸道病毒诊断试剂盒购自美国DHI公司，检测步骤及方法严格按说明书操作，用欧蒙荧光显微镜观察。

4 统计学方法 应用SPSS22.0统计软件，对不同季节、年龄、性别、不同临床诊断等病毒检出率进行χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 呼吸道7种病毒感染的总体检出情况 860例患儿中，鼻咽分泌物阳性病例为273例，总检出率为31.74%。排在首位是RSV阳性174例，检出率为20.23%；其次为ADV阳性45例，检出率为5.23%；排在第3位的PIV-Ⅲ阳性33例，检出率为3.84%；其余4项Flu-A、Flu-B、PIV-Ⅰ、PIV-Ⅱ的检出率分别为2.91%、1.28%、2.21%、1.98%。见表1。

2 不同性别呼吸道病毒感染率比较 本组男性患儿345例，病毒检出率31.30%(108/345)，女性患儿515例，病毒检出率为32.04%(165/515)，差异无统计学意义(χ2=0.051，P=0.881)。见表2。

3 不同年龄呼吸道病毒感染率比较 患儿按照年龄分为5组，分别为0 ～ 6个月组、7个月～ 1岁组、2 ～ 3岁组、4 ～ 6岁组、7 ～ 14岁组。呼吸道病毒的总检出率是随着年龄的增加而逐渐降低的，其中，病毒检出率最高的是0 ～ 6个月组，为28.94%；其次为2 ～ 3岁组，为27.11%；7 ～ 14岁组最低，为1.47%。RSV在各年龄组的检出率均为最高；ADV在1 ～ 3岁组的检出率较其在其他年龄组高。呼吸道病毒检出率在不同年龄组有统计学差异(χ2=67.642，P＜0.001)，其中6岁以下年龄组较6岁以上的年龄组高。见表3。

4 呼吸道病毒检出率与季节的关系 按照季节分为 3 ～ 5月 (春季)、6 ～ 8月(夏季 )、9 ～ 11月(秋季)、12 ～次年2月(冬季)。可以看出，抚顺地区冬季的呼吸道病毒检出率最高，为50.92%，夏季的检出率最低为7.69%。RSV在冬季的检出率(13.49%)最高，夏季的检出率(0.81%)最低，与PIV-Ⅰ型检出率的特点相同。ADV在春季的检出率(2.33%)最高，夏季的检出率(0.7%)最低，与PIV-Ⅱ型检出率的特点相同。呼吸道病毒检出率在不同季节上有统计学差异(χ2=115.927，P＜0.001)。其中冬春季节较多，夏秋季节较少。见图1。

表1 860例患儿鼻咽拭子病毒检出率Tab. 1 Detection rate of nasopharyngeal swab virus in 860 children

表2 不同性别病毒感染阳性检出结果Tab. 2 Detection of positive virus infection by gender (n)

图1 不同月份呼吸道病毒检出情况Fig. 1 Respiratory virus detection in different seasons

5 不同呼吸道感染性疾病病毒检出率比较 根据急性呼吸道感染病因的不同，我们将其分为上呼吸道感染、毛细支气管炎、急性支气管炎、支气管哮喘、肺炎。在273例阳性结果中，上呼吸道感染60例，毛细支气管炎48例，急性支气管炎21例，哮喘2例，肺炎142例(其中支气管哮喘合并肺炎7例)。排在病毒检出阳性率前3位的依次为毛细支气管炎(45.71%)、肺炎(32.87%)、上呼吸道感染(27.40%)，病毒检出阳性率最低的是支气管哮喘(8.33%)。见表4。

表3 不同年龄呼吸道病毒检出情况Tab. 3 Detection of respiratory viruses at different ages

6 呼吸道病毒混合感染情况 在860例中，单一感染225例(26.16%)，两种病毒感染45例(5.23%)，三种病毒感染3例(1.1%)。其中，RSV与其他病毒混合感染最多，占45.83%。

表4 不同呼吸道疾病病毒检出情况Tab. 4 Detection rate of virus in different respiratory diseases

讨 论

急性呼吸道感染是儿童常见病、多发病，其特点是传播速度快、传染性强，常导致儿童住院时间较长，甚至引发死亡，其中病毒感染是最主要的原因之一[5-7]。儿童对呼吸道病毒普遍易感，且病毒易发生变异，可以引发局部及暴发性流行，因此国家卫生机构将其设定为重点监测对象[8]。国内外对呼吸道感染病原的研究因地域、季节及年龄的不同存在差异[9]。随着儿童呼吸道感染抗菌药物的广泛使用，呼吸道细菌感染呈下降趋势，而呼吸道病毒感染率则逐渐升高。

通过对此次入组的860例急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物拭子检测，呼吸道病毒阳性总检出率为31.74%，与以往无锡(31.2%)的报到基本一致[10]，高于杭州(26.3%)[11]、深圳(23.6%)[12]，低于西安(34.8%)[13]、北京(67.4%)[14]。抚顺地区病毒检出率偏高考虑与本地属重工业区有关，城市大气污染较严重，对儿童呼吸系统有一定的影响，造成反复呼吸道感染，增加了家庭以及社会的经济负担。不同地区的检出率有差异，可能与各地区天气及研究选择的季节不同有关。

本研究发现，呼吸道病毒的总检出率随着年龄的增加而逐渐降低，不同年龄的病毒检出率不同，0 ～ 6个月组的病毒检出率最高(28.94%)，提示该阶段患儿为呼吸道病毒的易感人群，与自身抵抗力较低有关。1 ～ 3岁的病毒检出率排在第2位(27.11%)，可能与该阶段患儿由于范围扩大，出现交叉感染的概率增加。另外，患儿的免疫力随着年龄的增长不断增强，可能导致年龄越大的患儿，病毒阳性检出率越低。本研究发现RSV在呼吸道病毒感染者中检出率最高，这一结果与国内外大部分地区相同[15-16]，尤其是0 ～ 6个月的患儿，其检出率为47.62%，与安徽地区感染特点一致[17]。RSV是RNA病毒，具有很强的传染性，体内的抗体不能预防感染的发生，加上其呼吸道特异性及非特异性免疫均较差，故感染主要发生于婴幼儿。冬季是此病毒感染的高发季节，病毒检出率最高，为50.92%；夏季的检出率最低，为7.69%；与上海市的变化趋势一致[18]。RSV是抚顺地区各个季节最主要的呼吸道病毒，在冬季(13.49%)的检出率最高，PIV-Ⅰ也是在冬季的检出率最高，ADV、Flu-A和PIV-Ⅱ在春季的检出率最高，Flu-B和PIV-Ⅲ在秋季(0.58%)的检出率最高。流感病毒呈全年散发，以春冬季节为主，Flu-A主要集中在春季，Flu-B主要集中在秋季，副流感病毒在各个季节均可检出，在冬季检出率相对较高，应注意强化有关疫苗的接种问题。

将急性呼吸道感染分为上呼吸道感染、毛细支气管炎、急性支气管炎、支气管哮喘、肺炎。在273例阳性结果中，根据病毒检出率的不同，排在病毒检出阳性率前3位的依次为毛细支气管炎(45.71%)、肺炎(32.87%)、上呼吸道感染(27.40%)。其中，毛细支气管炎的病毒检出率最高，且主要以RSV(72.38%)所占比例最大，提示RSV是导致毛细支气管炎的主要病原体，与Miller等[19]对455例门诊及住院毛细支气管炎患儿进行病原学检测结果相近。上呼吸道感染最主要的病原是Flu-A，与浙江[20]报道相近。混合感染主要发生在婴儿阶段，可能与婴儿的免疫功能不健全、干扰机制未建立有关，其中以RSV合并感染最多，占45.83%，与北京地区[15]的报道基本一致。

本研究了解了抚顺地区儿童呼吸道疾病的病毒病原谱构成及呼吸道病毒流行规律，进一步探讨呼吸道病毒感染的相关因素，为临床上诊疗呼吸道病毒感染提供科学支持，弥补医生经验性诊断和治疗的缺陷，减少滥用抗生素的概率。本研究的不足之处在于未能将鼻病毒、冠状病毒、偏肺病毒等加入到病毒检测谱中，结果存在一定的局限性；不能全面反映本地儿童急性呼吸道感染的病毒谱，仅对7种常见呼吸道病毒进行分析。我们将继续深入对本地区的呼吸道病毒流行特点进行研究。