宽叶重楼的生药学研究

保山中医药高等专科学校中医药系，云南 保山 678000

重楼属植物全世界共有24种，分布于亚欧大陆的热带和温带地区，我国有19种，以西南各省区的种类和资源最为丰富[1-2]，云南重楼资源最为丰富，有计16种，其种类多样性居全国之首[3-4]。该属植物多以根茎入药，具有清热解毒、熄风定惊、消肿止痛之功效，在止血、抗肿瘤 、抗生育、免疫调节及心血管等方面也具有较好的生理活性[5-7]。但不同物种其化学成分和功用稍有差异，药材的真伪直接关系到医疗效果。2015年版中国药典收载的重楼为百合科植物云南重楼ParispolyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand. -Mazz.或七叶一枝花ParispolyphyllaSmith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎[8]，由于重楼自然生长速度十分缓慢，又长期依赖野生资源，加之主产区乱采滥挖，忽视对资源的保护和繁育，导致重楼资源匮乏，供需矛盾日益突出。为此寻找新药源作为重楼的替代品势在必行。宽叶重楼(ParispolyphyllaSmith var.latifoliaWangetChang)又名灯台七、漏芦(陕西)，蛇膀根(甘肃)，经查阅文献[9-11]，目前尚未见宽叶重楼的生药学研究。本文对宽叶重楼的药用部分进行系统的生药学研究，不仅有利于加强对药材重楼的生药鉴别，还为合理开发、利用和扩大重楼属植物的药用资源提供依据，及宽叶重楼能否作为重楼属基源植物的替代品种以提供科学依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 组织切片机(浙江金华无线电厂)，Olympus bx51TF生物数码摄影显微镜，GoodLook-2000型薄层色谱成像系统(上海科哲有限公司)。

1.2 材料 重楼皂苷I(批号：CLZI20160517)、重楼皂苷Ⅱ(批号：CLZII20151102)、重楼皂苷Ⅵ(批号：CLZVI20150715)、重楼皂苷Ⅶ(批号：为CLVII20161021)、重楼对照药材均购自南京春秋生物工程有限公司。所用试剂均为分析纯；水为超纯水。

宽叶重楼药材于2017年7月采集于云南省保山地区，样品编号为20170705，经云南中医药大学张洁副教授鉴定为百合科(Liliaceae)重楼属(Paris)植物宽叶重楼(ParispolyphyllaSmith var.latifoliaWangetChang)的根茎。

2 方法与结果

2.1 植物形态 多年生草本，植株高35～100 cm，无毛；根状茎粗厚，直径达1～2.5 cm，外面棕褐色，密生多数环节和许多须根。茎通常带紫红色，直径(0.8～)1～1.5 cm，基部有灰白色干膜质的鞘1～3枚。叶8～13(～22)枚，较宽，通常为倒卵状披针形或宽披针形，长12～15 cm，宽2～4(～6)cm，先端渐尖，基部楔形，具短叶柄。花梗长5～16(～30)cm；外轮花被片叶状，5～7枚，狭披针形或卵状披针形，长3～8 cm，宽(0.5～)1～1.5 cm，先端渐尖头，基部渐狭或短柄；内轮花被片狭条形，远比外轮花被片长；雄蕊7～14枚，花药长5～8 mm，与花丝近等长；药隔突出部分极短，长0.5～1 mm；子房近球形，暗紫色，花柱明显，长3～5 mm，顶端具4～5分枝，幼果外面有疣状突起，成熟后更为明显[12]。如图1所示。

2.2 性状鉴别 根茎短，长1～3.5 cm，直径0.5～1.5 cm，稍微弯曲，顶端残留有鳞叶和茎基。药材表面灰棕色或黄棕色，呈结节状扁圆柱形，有层状突起的环纹，多环节，结节上可见凹陷的茎痕及须根。质地较硬，断面粉性，呈白色或浅棕黄色。气微，味微苦、麻。如图2所示。

2.3 显微鉴别

2.3.1 横切面鉴别 表皮细胞1～2列，类圆形，外壁稍增厚，或稍向外凸出，排列比较整齐；皮层较宽，有时可见根迹维管束和叶迹维管束，细胞为不规则形或类圆形，细胞中充满淀粉粒，粘液细胞中可见草酸钙针晶束，皮层与中柱比为2∶1;内皮层1列，细胞比较小；维管束为周木型维管束，外轮维管束稀少，为类圆形或不规则形，呈散状排列，木质部细胞大，内分布有导管，呈连续环列或断续于韧皮部的四周，韧皮部细胞小，排列比较紧密。如图3所示。

2.3.2 粉末显微鉴别 粉末为浅灰白色。淀粉粒众多，多数为单粒，呈椭圆形、类圆形，有的脐点明显，多为星状、点状或人字形，直径约为2.20～13.67 μm；少数为复粒。草酸钙针晶多呈束状存在，比较细，少数为散状分布，长为14.22～70.18 μm。薄壁细胞不规则形或类长圆形，内富含淀粉粒。可见梯纹、螺纹、网纹导管，直径约为10.65～32.06 μm。如图4所示。

2.4 理化鉴别 取宽叶重楼粉末各0.5 g于圆底烧瓶中，加乙醇10 mL，加热回流30 min，滤液作为供试品溶液。取重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ对照品适量，精密称定，加甲醇制成0.8 mg/mL的溶液及混合溶液作为对照品溶液，照2015年版中国药典一部附录VIB薄层色谱法试验，分别取供试品溶液和对照品溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(15∶5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，在365 nm紫外下观察，随后喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，观察薄层板并拍照。

结果表明，在日光下观察，供试品溶液色谱中，与对照品溶液色谱相应位置上出现相同颜色的斑点；在紫外光下观察，与重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ对照品溶液色谱相应位置上出现相同颜色的荧光斑点，说明宽叶重楼中含有重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ这4种成分。如图5所示。

3 讨论

宽叶重楼药材的主要鉴别点有：①在植物形态上，宽叶重楼与狭叶重楼植物形态很像，它们的共同点在于药隔不外突或外突很短；花瓣丝状，通常长于萼片；叶基楔形，无柄或具短柄。不同点在于宽叶重楼叶较宽，宽2～4(～6)cm；子房和果有粒状小瘤。这也是宽叶重楼不同于其他重楼属植物的特征所在。②在性状鉴别上，主要的特征表现在表面颜色、形状、环纹、断面特征、气味5个方面。经查阅相关生药学研究文献。[13-15]，除了七叶一枝花具有斜向环节，跟其他重楼属药材没有太大的差异。③在组织构造上，重楼属药材的组织构造很相似，都由表皮、皮层、粘液细胞、草酸钙针晶与维管束构成。有的表皮细胞排列不整齐，内皮层不明显，但宽叶重楼的表皮细胞排列整齐，内皮层细胞明显，皮层与中柱比为2:1，文献[10]中，狭叶重楼、七叶一枝花、宽叶重楼的根状茎横切面的主要区别在于：狭叶重楼的上表皮多成圆形或棍棒状，七叶一枝花的是三角形，宽叶重楼的是长方形或方形。④在粉末特征上，重楼属药材很相似，都含有淀粉粒、草酸钙针晶与导管，无明显差异。⑤在理化鉴别上，宽叶重楼含有重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ这4种成分。文献说明[16-18]，含量上的差异是比较明显的，重楼属植物根茎中所含重楼皂苷有一定差异，其重楼皂苷含量还可能受产地的影响。根据查阅文献[19]，不同的产地可能特征又有差异，也就是环境改变着植物体的形态和结构。此研究可为快速鉴定出宽叶重楼植物提供参考，还可为扩大重楼属药用植物资源提供科学依据，是否能将宽叶重楼替代滇重楼或七叶一枝花入药，将有待进一步的科学验证。