一例仔猪水肿病的病原分离鉴定及药敏试验

刁富花

摘要：从大通县某规模养猪场患病仔猪分离病原菌，根据病原菌形态、培养特性和生化特性，鉴定为大肠杆菌。同时进行药敏试验表明该菌对氧氟沙星、丁胺卡那霉素和庆大霉素高度敏感，为临床用药提供科学依据。

关键词：仔猪；水肿病；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验

1发病情况

2017年2月，大通县某规模养猪场饲养的断乳仔猪陆续发病。临床症状主要是头、眼睑、颈部和腿部水肿，喜卧；个别病猪晚上食料，次日清晨死于栏舍，发病急，死亡快。猪场兽医人员使用青霉素等治疗，效果不明显，截止化验室就诊，发病猪总共30头，死亡16头。对病死猪剖检可见胃大弯、贲门部水肿，胃黏膜层与肌肉层间水肿，呈胶冻样，胃底弥漫性出血；结肠肠系膜及其淋巴结水肿；心包、腹腔和胸腔积液。为确定病原菌，对病死猪进行了病原分离鉴定与药敏试验。

2材料与方法

2.1实验材料

麦康凯培养基、伊红美蓝琼脂培养基、肉汤琼脂培养基、三糖铁琼脂培养基；糖发酵管、普通肉汤培养基、药敏纸片；实验仔猪由大通县某规模养猪场提供。

2.2病原菌分离鉴定

2.2.1细菌分离无菌采集病死仔猪大肠内容物、肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏等组织接种在麦康凯培养基，经37℃培养24h后，选取可疑菌落分别接种在肉汤琼脂培养基、伊红美蓝琼脂培养基上，于37℃培养12-24h，对菌落形态进行观察，并且选取培养菌落通过生理盐水稀释后涂片，革兰氏染色、镜检。

2.2.2生化鉴定将病原菌接种在三糖铁琼脂培养基、甘露醇、麦芽糖、葡萄糖、蔗糖、水杨苷、V-P、M.R.、乳糖、阿拉伯糖、果糖、木糖以及尿素酶反应管，经37℃反应72h。

2.2.3致病性实验选取该规模养猪场断乳仔猪8头，设实验组和对照组，每组4头。将分离的病原菌的普通肉汤培养物通过超声波破碎后离心，取上清液以一定剂量静脉注射给实验组断乳仔猪；采用生理盐水注射对照组断乳仔猪，临床观察结果。

2.2.4血清型鉴定在血琼脂平板上培养分离菌24h后，添加福尔马林3mL/L，经37℃灭活24h，选取适量菌液进行无菌检测，检验合格后，按0.3mL/只肌注于小白鼠腿部，10d后采集小白鼠血液并分离血清，同标准大肠杆菌0141K88菌液进行平板凝集试验。

2.3药敏试验

将致病性分离菌通过生理盐水稀释后，均匀地涂抹在营养肉汤琼脂平板上，然后将药敏纸片（氨苄西林、红霉素、头孢唑啉、庆大霉素、氧氟沙星、硫酸卡那霉素、丁胺卡那霉素、磺胺甲基异恶唑、头孢呋辛）平铺在肉琼脂培养基上，在37℃生化培养箱中培养24h，观察并记录药敏试验结果。依据有无抑菌圈和抑菌圈直径大小，判定病原菌对不同试验药物的敏感程度。

3结果

3.1培养特性

麦康凯培养基上的菌落通过肉眼观察可见表面光滑、湿润且圆整，呈粉红色；伊红美蓝琼脂培养基上可见圆整、暗黑色菌落；革兰氏染色镜检可见两端钝圆、成对或单个存在的革兰氏阴性小杆菌。

3.2生化试验结果

病原菌在三糖铁培养基上产酸产气，不产生H2S；病原菌的生化试验结果见（表1）。由表1可知，蔗糖、阿拉伯糖、果糖、木糖、乳糖、甘露醇发酵试验为阳性，葡萄糖产酸产气，M.R.试验为阳性，水杨苷、尿素酶试验和V-P试验为阴性，同大肠杆菌的生化特性相符合。

3.3致病性实验结果

實验组的4头断乳仔猪全部出现典型水肿病症状及病理变化；而对照组4头断乳仔猪没有异常症状。

3.4血清型鉴定结果

小白鼠血清同标准大肠杆菌0141K88菌液出现凝集。表明该菌血清型为0141。

3.5药敏试验结果

药敏试验结果见（表2）。病原菌对氧氟沙星、丁胺卡那霉素和庆大霉素高度敏感；对头孢唑啉、头孢呋辛中度敏感；对氨苄西林、红霉素、磺胺甲基异恶唑和硫酸卡那霉素具有耐药性。

4治疗

经药敏试验，选用高度敏感药物进行注射治疗，同时为达到利尿消肿和保肝解毒的目的，可采用葡萄糖、维生素等进行辅助治疗；为强化治疗效果，还可在饲料中添加中草药或微生态制剂。通过上述治疗方案，发病猪于7d后精神和食欲逐步恢复正常，水肿消失，2周后回访，未出现新病例，有效控制了猪场疫情。

5小结与讨论

1）猪水肿病是一种急性肠毒血症，多发于断奶仔猪，主要特征是发病突然，头部、耳部、颈部等处红肿，胃壁、肠系膜显著水肿。本病致死率高达90%以上，给养殖业造成严重的经济损失。

2）仔猪水肿病的血清型多样，具有易变性和地域性，对猪场定期进行病原菌的分离鉴定，旨在有针对性地使用常见的优势菌株制成自家灭活疫苗进行免疫，效果良好；通过对大通县该猪场仔猪水肿病进行细菌学和血清学调查，明确了仔猪水肿病病原的主要血清型（O141）和药物敏感性，为本地区仔猪水肿病的防治提供了科学依据。