动脉粥样硬化（AS）患者HCMV阳性率检测及洁罗维注射液的治疗效果观察

2018-12-26彭玲孙华罗迦肖开永王建平何元军杨庆

健康必读·下旬刊 2018年10期

彭玲　孙华　罗迦　肖开永　王建平　何元军　杨庆

【摘要】目的分析动脉粥样硬化（AS）患者人巨细胞病毒（HCMV）阳性率检出情况，同时观察洁罗维注射液治疗AS患者的临床疗效，为该类疾病的临床治疗提供新的参考依据。方法将我院2017年1月～12月136例AS患者列为观察对象，将136例AS患者以随机分配原则均分为两组（68例/组），且均给予HCMV-pp65 抗原检测法检测其HCMV阳性率；其中对照组给予常规治疗，观察组患者在常规治疗的基础上加用洁罗维注射液进行治疗；观察两组AS患者治疗前、后HCMV阳性率表达情况，并比较两组患者治疗前、后其AS斑块变化情况。结果 ①经统计显示，治疗前136例患者检出HCMV的总阳性率为85.29%（116/136），且两组比较无明显差异性（P>0.05），经治疗后，观察组患者HCMV阳性率显著低于对照组同期（P<0.05）；②经治疗后，观察组患者动脉最大内中膜厚度、斑块面积及MPO水平等方面改善情况显著优于对照组，P<0.05；但两组患者斑块数目治疗前后比较无明显变化，P>0.05；③经治疗后，观察组患者稳定性斑块所占比重明显高于对照组同期，易损斑块所占比重明显低于对照组同期（χ2=4.076，P=0.044）。结论对AS患者积极开展HCMV阳性检测并制定针对性治疗方案有着重要临床指导意义；应用洁罗维注射液治疗AS可有效降低AS患者HCMV阳性率，还可提高斑块稳定性，对减少临床心脑血管事件风险，有着极高的临床应用价值。

【关键词】：动脉粥样硬化；人巨细胞病毒；阳性率；斑块稳定性；洁罗维注射液

【中图分类号】R543.5 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2018）10-03--01

AS是冠心病、脑血管病和血栓栓塞性疾病等缺血性心脑血管病的主要病理基础，其病因与机制十分复杂，以往临床医学多认为高血压、高血糖及高血脂是诱导AS发病的高危因素[1]。但随着对AS研究的深入发现，占1/3以上的AS患者并无高血压、高血糖及高血脂等基础疾病，而是与患者感染性血管内皮炎症反应有关；为此国内外众多临床单位、学者对此展开了大量研究，研究结果表明人巨细胞病毒（HCMV）感染与AS的发病有密切联系，且参与了AS发生及发展全过程[2、3]。因此，检测AS患者是否被HCMV感染，以及HCMV的阳性率对指导临床进行针对性治疗有着重要意义。本研究通过对136例AS患者治疗前后进行HCMV阳性率检测并给予分组治疗，进而分析洁罗维注射液对AS患者HCMV阳性表达及斑块稳定性的影响，为临床医生治疗AS提供新的可行性参考依据，详细研究如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2017年1月～12月住院部136例AS患者列为观察对象，所有入选患者均符合AS相关入选标准，将136例AS患者以随机分配原则均分为两组（68例/组），其中对照组男性38例、女性30例；年龄49～70岁，平均（62.1±6.5）岁；观察组男性36例、女性32例；年龄48～71岁，平均为（62.3±6.8）岁；两组患者性别、平均年龄等一般基础资料比较无明显差异性，可进行对照研究。

1.2 方法

1.2.1 斑块检测及判定：全部患者均经彩色多普勒超声检查，观察并记录以管腔内膜面到中层与外膜交界处的垂直距离有无粥样硬化斑块及其部位、大小、回声强度和表面特征。斑块类型根据斑块稳定程度将扁平斑、软斑、混合斑纳入易损斑块，硬斑及内膜增厚納入稳定斑块，而溃疡斑和斑块内出血这两种类型由于技术条件所限暂不纳入本次观察。

1.2.2 HCMV阳性检测：采用HCMV-PP65抗原检测方法，于患者空腹状态下采集静脉血液样本2-5ml，采用抗凝剂乙二胺四乙酸二钠抗凝，而后采用离心机分离多形核白细胞、血浆提取白细胞悬液，以APES玻璃为载体将白细胞悬液置于37℃烘干箱中烘干，加入鼠抗人HCMV一抗培育40min后，再次加入羊抗鼠二抗培育30min后，采用二氨基联苯胺进行第一次染色，10min后采用苏木素进行复染，随后于光学显微镜（型号：日本OLYMPUSBX-41）下计数阳性白细胞；阳性细胞胞浆或胞核为棕黄色，阴性细胞为均匀一致的蓝紫色，以阳性细胞数>1/50000即判定为HCMV-PP65抗原阳性。

1.2.3 血清MPO的检测：MPO试剂盒由美国R&D;公司生产，检测操作步骤严格按照说明书进行。

1.2.4 治疗方法：对照组AS患者给予阿司匹林肠溶片50mg/d口服，每日1次；同时口服倍他乐克，2次/d，25mg/次；血栓通静滴治疗，1次/d，剂量为500mg ；以及其他常规对症治疗。观察组AS患者在对照组的基础上加用洁罗维注射液（通用名：阿昔洛韦氯化钠注射液（Ⅱ），生产企业：四川科伦药业有限公司，规格：0.1 g：100 mL/ 瓶，批准文号：国药准字H19990147）进行治疗，用法用量： 200ml/次，2次/天。

1.3 观察指标

①观察两组AS患者治疗前、后HCMV阳性率表达情况，并比较两组患者治疗前、后其AS斑块变化情况[4]。

②通过动脉超声检查斑块数目和动脉内膜-中膜厚度（IMT）及斑块面积统计斑块变化情况[5]；

③检测血清髓过氧化物酶（MPO）水平评定血管内炎症反应轻重程度[6]。

④采用动脉超声检查判别斑块类型，根据2003年发表的美国心脏协会的协定分为易损斑块和稳定斑块，进而综合评价斑块的稳定性[7]。

1.4 统计学分析

将本研究使用统计学软件SPSS 22.0进行相关统计分析，计数资料采用百分数（%）表示采用χ2检验，计量资料采用（）表示行t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前、后HCMV阳性率表达情况分析比较

检测结果显示：治疗前136例患者检出HCMV总阳性率为85.29%（116/136），其中对照组检出HCMV阳性患者57例，观察组59例，两组比较无明显差异性（P>0.05）；经治疗后，观察组患者HCMV阳性率显著低于对照组同期（P<0.05）；详见表1.

2.2 治疗前后斑块变化情况分析比较

经统计得出：两组患者治疗前其动脉最大内中膜厚度、斑块面积与数量及MPO水平比较均无明显差异，P>0.05；经治疗后，观察组患者动脉最大内中膜厚度、斑块面积及MPO水平等方面改善情况显著优于对照组，P<0.05；但两组患者斑块数目治疗前后比较无明显变化，P>0.05；详见表2。

2.3 治疗前后斑块稳定性斑块与易损斑块数量变化情况分析

经统计显示：治疗前两组稳定性斑块、不稳定性斑块所占比重无明显差异性，P>0.05；然经治疗后，观察组患者稳定性斑块所占比重明显高于对照组同期，不稳定斑块所占比重明显低于对照组同期（χ2=4.076，P=0.044）；详见表3.

3 讨论

近年来，随着AS研究的深入，发现动脉内壁炎症反应是AS发生、发展全过程最主要的表现，且该炎症反应多由感染病原微生物所致。相关研究表明[8]，HCMV是引发血管壁感染和血管外感染进而出现动脉内壁炎症反应的重要病因之一。HCMV属于人类β疱疹病毒亚家族，外观形态呈球形，其具有典型的疱疹病毒结构，且广泛分布于自然环境中，人类是其唯一的宿主。据流行病调查，HCMV在非洲、南美洲等发展中国家的感染阳性率较高，约为 70%～90%，在欧美等发达国家则相关较低，约为36.9%～68.3%，HCMV感染在我国也广泛流行[9]。当机体感染该病毒后，免疫机制启动可清除绝大部分病毒，但仍有部分病毒可长期潜伏于血管内皮细胞与平滑肌细胞中，当机体免疫力下降时被激活，其在增殖过程致血管内皮细胞结构受损，引起内皮细胞出现功能损伤，影响NO合成，导致NO分泌明显减少，NO分泌减少可使血小板从抗凝状态变为促凝状态，增加其在血管内皮的黏附，促使血栓形成；从而参与了AS的发生、发展全过程。因此，对AS患者积极展开HCMV阳性检测，进而判定有无HCMV感染或HCMV潜伏感染状态是否被激活对临床制定针对性抗病毒治疗有重要指导意义。

氧化应激和炎症是动脉粥样硬化发展的两个关键成分，是动脉粥样硬化从脂肪条纹形成到斑块破裂和血栓形成这一发展过程的主要因素[10]。氧化应激可引起内皮细胞膜稳定性和通透性平衡失调、内分泌和旁分泌功能受损、黏附分子表达增加及脂质过氧化等。HCMV病毒感染后人体往往处于慢性的氧化应激状态，这主要表现在两个方面[12]：一是病毒感染后宿主细胞会在病毒的诱导下发生氧化应激，释放出大量的自由基来推动氧化进程；二是大量活性氧自由基导致机体过氧化损伤，引起细胞膜磷脂层的脂质过氧化，从而进一步抑制和损伤机体免疫功能，导致机体耐药率增加。因此，ROS通常被视为病毒性疾病病理进程中引起细胞损伤的元凶。机体通过维持氧化物/抗氧化物平衡来保持正常状态，而病毒通过改变宿主细胞内前氧化物/抗氧化物的平衡，影响细胞凋亡过程。综上所述，氧化应激贯穿于As斑块的形成、发展以及破裂并触发临床事件的始终，因此抗氧化治疗也是防治As有效、最有希望的策略之一。

本研究中，通过对136例AS患者进行HCMV-pp65 抗原血症检测发现，136例患者检出HCMV阳性率为39.71%（54/136），与相关文献报道相近。基于上述检测结果对所有研究对象给予分组治疗，研究结果显示，经治疗后，观察组患者HCMV阳性率显著低于对照组同期（P<0.05）；提示洁罗维注射液应用于AS患者临床治疗可显著降低病毒总阈值，降低HCMV感染阳性率。众所周知，斑块稳定性是评定斑块是否发生脱落或破裂的重要指标；学者孔伟丽、谷聚贤等人认为[13]，局部炎症细胞的浸润以及全身急性炎症是导致斑块脱落或破裂的主要原因之一，MPO是中性粒细胞激活的标志物，MPO水平的高低表达出嗜中性多形核白细胞功能、活性状态，从而反应出机体炎症反应的轻重，是反映斑块稳定性的重要指标之一。本研究中，观察组患者动脉最大内中膜厚度、斑块面积及MPO水平等方面改善情况显著优于对照组，P<0.05；则表示洁罗维注射液可有效消退AS患者斑块面积、减轻动脉狭窄程度及控制炎症反应以降低斑块的易损性；此外，经治疗后，观察组患者稳定性斑块所占比重明显高于对照组同期，易损斑块所占比重明显低于对照组同期P<0.05，充分表明洁罗维注射液可有效将AS患者易损斑块转化为稳定性斑块，以减少不良血管事件的发生。

洁罗维注射液（阿昔洛韦氯化钠注射液Ⅱ）产品主要有效成分包括阿昔洛韦、甲硫氨酸、烟酰胺、甘氨酸、脯氨酸，其中阿昔洛韦可有效清除HCMV，降低HCMV含量总阈值，抑制其活跃程度，从而有效消退动脉粥样硬化斑块面积与控制炎症反应，进而提高斑块的稳定性，以减少临床心脑血管事件风险。此外，洁罗维中的甲硫氨酸可外源性的有效补充机体抗氧化物质的含量，甲硫氨酸是机体内合成谷胱甘肽的前体物质，而谷胱甘肽可保护细胞免受氧自由基的损伤。Grimmble等（1998）研究表明：甲硫氨酸的足量、规范补充可以迅速增加人体内谷胱甘肽（GSH）的合成，在还原型谷胱甘肽（GSH）与氧化型谷胱甘肽（GSSG）的循环过程中清除自由基，调节血管内皮细胞氧化应激状态，改善内皮细胞功能微环境，同时降低病毒耐药性，更为全面有效的抑制多种已知和未知病毒；而产品中的其他有效成分烟酰胺、甘氨酸、脯氨酸则可有效补充机体所需的营养物质，对缩短治疗周期及促进预后质量有着积极作用。

综上所述，对于心脑血管疾病的患者，在检测条件允许的情况下（等级医院），应该积极做HCMV的阳性率或滴度检测，以此檢测结果为临床的进一步治疗提供诊断依据；在不具备检测条件的情况下（基层医疗单位），在临床治疗时，根据HCMVG感染的生物特性，我们推荐把洁罗维注射液纳入基础治疗方案中，这对于患者住院周期、减少经济负担、促进预后，以及控制医保费用支出有着积极的临床意义，值得推荐。

参考文献

李婉珍，王明丽，赵俊等.巨细胞病毒参与动脉粥样硬化致病机制研究新进展[J].微生物与感染，2017，12（1）：50-56.

申广辉，曹丽娟，陈福祥等.人巨细胞病毒感染促动脉粥样硬化的机制[J].国际心血管病杂志，2017，44（5）：285-288.

杜立平，朱淑芬.冠心病患者动脉粥样硬化与人巨细胞病毒检测结果的相关性分析[J].标记免疫分析与临床，2016，23（12）：1379-1381，1412.

阮强，何蓉.人巨细胞病毒感染的实验室检测与诊断[J].实用儿科临床杂志，2012，27（10）：729-731.

王静，陈时芳，徐淑静等.2型糖尿病患者臂踝脉搏波传导速度与颈动脉内膜中层厚度及斑块的关系[J].重庆医学，2016，45（10）：1345-1347.

何倩，张蕾，郑美娟等.抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体相关性血管炎周围血中性粒细胞CD35表达的变化及意义[J].中华风湿病学杂志，2018，22（4）：251-256.

方芳，张伟，乔旭柏等.急性冠状动脉综合征患者易损斑块的临床病理分析[J].中华心血管病杂志，2011，39（9）：802-806.

郭洪平，王淑辉，郑金花等.人巨细胞病毒检测在动脉粥样硬化病变中的临床意义研究[J].中国医师进修杂志，2013，36（10）：11-13.

张雨，曾慧慧.人巨细胞病毒感染及母婴传播阻断临床研究进展[J].中华实验和临床感染病杂志（电子版），2017，11（6）：526-532.

孙龙飞.炎性信号通路在动脉粥样硬化中的机制与中医药干预作用研究进展[J].中国动脉硬化杂志，2015，23（11）：1177-1181.

脱厚珍，车晶晶，刘磊等.HCMV感染致培养脐静脉内皮细胞活化和氧化应激的作用[J].中华实验和临床病毒学杂志，2017，31（4）：298-301.