HPV—E6/E7mRNA有望成为宫颈病变的生物学标志物

邹艳红　周红林

【摘 要】 宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，99.7% 的宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒（HPV）特别是高危型 HPV 密切相关。早期预防、诊断以及治疗癌前病变是防控宫颈癌的关键，因此，需要采取合理的筛查方案。HPV—E6/E7 mRNA检测可以更好地反应体内病毒的复制及表达，是一种早期诊断宫颈癌有效的方法。本文就宫颈癌的基本情况、临床上检测HPV方法的缺陷以及HPV—E6/E7 mRNA检测的优点进行了综述。

【关键词】HPV—E6/E7 mRNA；；宫颈病变；生物学标志物

【中图分类号】R730.4 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2018）10-03--01

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，99.7% 的宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒（HPV）特别是高危型 HPV 密切相关[1]。早期预防、诊断以及治疗癌前病变是防控宫颈癌的关键，因此，需要采取合理的筛查方案。本文就宫颈癌的基本情况、临床上检测HPV方法的缺陷以及HPV—E6/E7 mRNA检测的优点进行了综述。

1 宫颈癌的发病机制

宫颈癌的发生、发展主要包括HPV的传播、病毒持续感染和复制、癌前病变以及浸润等，某些步骤以额可以在疾病的发生、发展过程中扭转。由宫颈上皮内瘤变发展为宫颈原位癌大约需要经过3-8年的时间，因此，可以采取及早的预防措施，以减少疾病的发生。

2 宫颈癌的诊断措施

目前，我国针对宫颈癌主要采用“三阶梯筛查”方案进行临床诊断，以“细胞学”为基础，依靠阴道镜检查或病理组织学检查等确诊。但是，上述检测结果是感染后HPV的结果，还由于部分细胞受到多种因素的影响，未能出现典型的症状，加上检测过程中的失误等原因，导致漏诊率较高。因此，临床上亟待一种客观的标志物能够尽早的检出宫颈病变，以改善患者的预后。

3 HPV致癌机制

HPV感染率较高，约99.7%的宫颈癌患者感染了HPV，另有超过90%的患者感染HPV后无临床症状或是暂时无临床症状，也可以在1-2年内通过自身免疫系统的清除作用自愈。HPV基因有8个编码基因，对细胞的生长刺激作用最大的是E6、E7基因，其编码的E6、E7癌蛋白可以干扰细胞周期，导致恶性肿瘤的发生与发展[2]。E6蛋白可以通过E6-AP与p53蛋白特异性的结合形成复合物，促使p53蛋白降解，其效应等同于p53突变。E7蛋白与pRb有较高的亲和性，使得G1期进入S期所需基因得以转录，细胞周期失控从而发生永生化。

4 HPV—E6/E7 mRNA检测

不论HPV病毒处于游离还是整合状态，只要转录出mRNA，均可以通过HPV—E6/E7 mRNA检测反应体内病毒的复制，能够准确的反映机体感染HPV后的状态。高危型HPV E6、E7 mRNA检测HPV—E6/E7 mRNA含量可以有效的反映HPV致癌基因 E6/E7的活动度，直观地对宫颈癌的发病风险以及预后做出评估。HPV—E6/E7 mRNA检测可以判断病毒基因是否整合入宿主基因组中以及区分HPV的状态，在早期筛查宫颈癌以及分类等方面具有重要的意义。当出现HPV假阳性时，患者会产生紧张、焦虑的不良情绪，造成心理负担及过度诊疗。近年来，新的检查技术 HR-HPV E6/ E7mRNA 的应用同时兼顾敏感度和特异度，与病理活检符合程度高。HPV—E6/E7 mRNA的出现就发挥了其独特的作用，是一项很有前途的、值得推广的检测技术，尤其是对高危型的HPV病毒持续性感染妇女的诊断更具有实际的临床应用价值。

与正常细胞比較，肿瘤细胞中 HPVE6、E7mRNA的含量较高，在正常细胞中，HPV E6、E7mRNA 的表达值为0.8～1.2灰度区间，>l即可诊断为阳性。E6、E7mRNA表达阳性提示：①宫颈细胞感染HPV；②E6、E7病毒癌基因处于活动期；③宫颈细胞处于活跃期；④患者的患癌风险较高[3]。

检测高危亚型的 HPVE6/ E7mRNA 的转录有利于宫颈癌的早期诊断、控制发展及预后监测。Massimo Origoni[4]等认为，在评估宫颈病变进展及风险方面，HPV E6、E7mRNA具有强大的潜力。E6与E7共同表达具有协同作用，可以显著增强转化能力，促使细胞过度增殖，导致患者发生宫颈癌，E6、E7mRNA检测在宫颈癌的诊断方面具有较高的价值[5]。王华等[6]检测了262例宫颈疾病妇女，发现宫颈病变的程度越高，HPVE6、E7mRNA的表达也越高。

HPV检测还可以作为宫颈高度病变手术疗效的判断以及随访的监测手段。研究表明，宫颈锥切术后检测HPV E6、E7mRNA，可以有效的预测残留CIN，灵敏度以及阴性预测值均较高。术后6-12个月，HPV E6、E7mRNA检测结果显示阴性，可以提示病灶清除比较彻底。宫颈组织中HPV E6/E7mRNA的表达说明HPV病毒活性较高，检测HR—HPV E6/E7 mRNA转录物能够发现HPV癌基因的活化状态，有利于HPV感染的诊断以及预测病变的进展风险。

5 展望

HR-HPV E6/E7 mRNA 的表达是导致宫颈细胞恶性转化并发展至宫颈癌的必要过程，因此，能够更加精确的预测细胞向高度病变和癌症转变的可能性。HRHPV E6/E7 mRNA 和 TCT 联合检测能提高阳性检出率， 防止漏诊。对宫颈病变的早期发现，早期治疗及治疗后随访均体现出它独有的生物学价值，有深远的临床价值，值得推广后使用。

参考文献

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熊旭光，李昌水，等.高危HPV DNA及其E6、ETmRNA对宫颈病 变的影响[J].上海预防医学，2015，27（2）：77-78.

Massimo O，Paolo C，Ouia C，et a1.Presence ofHigh一融sk HPV mRNA in Relation to Future High--Grade Lesions among High·-Risk HPV DNAPositive Women with Minor Cytological Abnormalities[J]. ecance92015，9：533.

江伟敏，姚有余.HPV E6、E7mRNA检测与宫颈病变发展的相关 性研究[J].安徽医药，2014，18（10）.

王华，陈亚宝，叶丽华，等.应用支链DNA技术检测人乳头瘤病 毒E6、ETmRNA在宫颈疾病筛查中的价值[J].中华临床医师杂志（电子版），2011，5（15）：4362—4366.