阿托伐他汀对心肌缺血再灌注大鼠心肌血液前向流动的影响

急性心肌梗死首选的治疗方法是冠状动脉介入治疗，在缺血再灌注过程中心肌会出现无血液灌注情况，即无复流现象[1-2]，使心肌细胞损伤加重，直接影响病人的预后，因此无复流成为目前冠状动脉介入治疗急性心肌梗死的难点[3-4]。近年来，有研究发现，他汀类药物具有降低胆固醇、改善心肌缺血再灌注病人的预后，降低无复流的发生率，保护心肌细胞等作用[5]。本研究通过建立大鼠心肌缺血再灌注模型，观察阿托伐他汀预处理对大鼠血流动力学的影响，为临床预防无复流的用药及治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取8周龄的健康清洁级SD大鼠45只，雌雄各半，体重250 g～280 g，由中国医科大学动物部提供。

1.2 分组 随机分为假手术组、模型组、实验组，各15只。假手术组与模型组于术前7 d给予生理盐水2 mL灌胃，每日1次，连续7 d。实验组于术前7 d给予阿托伐他汀15 mg/kg与2 mL生理盐水混合后灌胃，每日1次，连续7 d。正常饲料喂养7 d后造模。

1.3 造模方法 所有大鼠腹腔注射10%水合氯醛3 mL/kg麻醉后，将大鼠固定在操作台上，连接三导联心电图机，在第3、4气管环间切开后气管插管，连接小动物呼吸机。剪开胸腔，将5号线穿过冠状动脉前降支根部(在中间放置乳胶管作软垫)，其中假手术组不结扎，其余大鼠结扎60 min，在30 min时见心脏跳动减慢，心肌颜色变暗红，此时心电图示ST段抬高，预示造模成功[6]。松开结扎线再灌注120 min。缺血再灌注后无复流的标志：心肌轻度发绀，再灌注30 min时心电图示ST段下降<30%，硫磺素S染色可见缺血区[7]。

1.4 检测指标 造模结束后，经颈动脉采血1 mL，离心后用试剂盒(南京建成生物研究所)检测血清心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)。在生物实验台上，用VIVID7型号超声仪(美国GE公司生产)，由右颈总动脉入导管至左心室，动脉压呈大幅度波浪状，提示进入左心室，测量心率(HR)、左心室收缩末压(LVESP)、左心室舒张末压(LVEDP)、主动脉收缩压(SBP)、主动脉舒张压(DBP)。心肌染色计算心肌缺血风险率(AR/WH%)、心肌梗死率(IS/WH%)、心肌无复流率(AN/WH%)。将40 g/L硫磺素S注入大鼠尾静脉1 mL/kg，原位再次结扎冠状动脉前降支，将伊文蓝(evans blue)1 mL注入大鼠心房，10 min后摘取心脏冲洗干净，用刀片在心脏横切面切薄片约2 mm厚，放在紫外线仪下观察染色情况并拍照记录，再放入2，3，5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride，TTC)染色，电镜图像分析计算，AR/WH%=心肌缺血风险面积/心肌横切面面积×100%；IS/WH%=心肌梗死面积/心肌横切面面积×100%；AN/WH%=心肌无复流面积/心肌横切面面积×100%。

2 结 果

2.1 3组大鼠血清CK-MB、LDH水平比较 模型组和实验组CK-MB、LDH明显高于假手术组，差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组CK-MB、LDH明显低于模型组，差异均有统计学意义(P<0.01)。详见表1。

表1 3组大鼠血清CK-MB、LDH水平比较(±s) U/L

2.2 3组大鼠血流动力学指标比较 与假手术组比较，实验组、模型组HR、LVESP、LVEDP、SBP、DBP差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组HR、LVESP、LVEDP、SBP、DBP与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。详见表2。

表2 3组大鼠血流动力学指标比较(±s)

2.3 3组大鼠心肌AR/WH%、IS/WH%、AN/WH%比较 模型组与实验组AR/WH%比较，差异无统计学意义(P>0.05)。实验组IS/WH%、AN/WH%均明显小于模型组，差异均有统计学意义(P<0.05)。详见表3。

表3 3组大鼠心肌AR/WH%、IS/WH%、AN/WH%比较(±s) %

3 讨 论

心肌缺血再灌注后无复流是冠状动脉介入治疗的严重并发症，心肌梗死再发生率高，心源性猝死、恶性心律失常、心室重构等发生率均增高，积极纠正无复流现象能够明显改善预后[8-9]。本研究结果显示，阿托伐他汀能够明显改善血清CK-MB、LDH水平，说明阿托伐他汀减轻了心肌细胞损伤；且能明显改善HR、LVESP、LVEDP、SBP、DBP等血流动力压力，使血流前进动力增强，加快心肌缺血状态血液供应的恢复，减少心肌缺血及心肌梗死面积，减少无复流现象。硫磺素S是荧光染色剂，可准确显示内皮细胞无复流面积的大小[10]。TTC染色能更清楚地判断细胞是否存活[11]。本研究结果发现阿托伐他汀预处理后心肌缺血面积和梗死面积减少，无复流面积减少，考虑与阿托伐他汀能够降低血脂，减轻血脂颗粒阻塞血管，减少血小板聚集，恢复血液流动，改善内皮细胞功能，抑制心肌细胞内氧自由基产生，减少炎性因子损害，促进心肌细胞的血液前进流动，改善心肌细胞微循环障碍，加快心肌功能恢复有关。

长期应用阿托伐他汀能够调节血脂，抑制微血管内血栓形成，预防急性心肌梗死的发生[12-13]。有研究显示，首次大剂量应用阿托伐他汀80 mg，使超敏C反应蛋白明显减少，即心肌炎症反应减轻，同时预示心肌灌注明显改善，远期并发症减少，急性心肌梗死病人预后较好[14]。

综上所述，阿托伐他汀能够改善心肌缺血再灌注后血液流动，促进血液前向流动，减少无复流发生，减少心肌缺血和心肌梗死面积，改善预后，降低死亡率。其发生机制与阿托伐他汀调节血脂的功能密不可分[15]，确切的发生机制有待进一步研究。