甲胎蛋白阴性的肝癌血清标志物筛查及临床意义

沈科书，孙海英，孙颖

（吉林省肝胆病医院，吉林 长春 130062）

0 引言

原发性肝癌在全球范围内的发病率居所有恶性肿瘤种类中的第二位，同时具有极高的致死率[1-2]。肿瘤标志物是肿瘤细胞产生一些结构和数量异常的蛋白质或其他物质，针对肿瘤标志物的检测在临床上具有重要的意义，可应用于早期筛查、监测疗效及肿瘤分期等方面，因此，本次研究选择我院2年间收治的200例甲胎蛋白阴性肝癌患者，分析血清标志物筛查的临床意义，现将具体内容，汇总如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

择取我院自2016年1月至2018年1月收治的200例甲胎蛋白阴性肝癌患者，其中，男性125例，女性75例，年龄42～76岁，平均（52.5±3.5）岁；所有患者均通过肝脏增强CT或核磁，确诊为原发性肝癌，肿瘤结节单发且低于3cm，未发现血管侵袭与远处转移情况，同时其AFP低于7ng/mL，均在治疗前进行血清标本采集，选择2D-DIGE筛选验证，Child分级为A、B级，无其他肿瘤类型患者。原发性肝癌诊断参照全国肝癌协作会议制定的统一标准。甲胎蛋白采用罗氏试剂进行检测。

1.2 方法

（1）搜集患者临床资料，对每个样本进行T细胞亚群检测；（2）操作方法：选择去除人体14种高丰度蛋白的多种亲和排除系统（MARS），选择固相pH梯度（IPG）干胶条（24cm），同时选择5 nmol CyDye DIGE Fluor最小标记试剂盒、Ettan2D-clean up试剂盒、DeStreak TM溶胀液、载体两性电解质等等[3-4]；（3）开展图像分析，双向电泳得到蛋白质组图谱，选择相应的工具，进行分析研究[5-6]；（4）开展差异蛋白的胶内酶解与质谱鉴定，切割差异蛋白质斑点，提取蛋白，将其低温冻干，将蛋白样品点靶于MALDI金属上，给予4700MALDI-TOF/TOF串联飞行质谱仪鉴定结果[7]。

1.3 观察指标

观察甲胎蛋白阴性肝癌患者血清中高表达蛋白质谱鉴定类型，筛选蛋白质点上多余2/3的胶上出现，同时需满足，其差异超过1.4倍，分析血清转铁蛋白前体、抗原KW-4剪接变体、介于Prol锌糖蛋白、复合体晶体A链、锌α2糖蛋白、载脂蛋白原、免疫球蛋白（Fc）、Ssl7复合体A链、免疫球重链变异体各类型间，相对分子质量、等电点、覆盖率及差异倍数，以深入验证其内在联系[8]。

1.4 统计学方法

本研究数据均采用SPSS 18.0软件进行统计学分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，计数资料用率（%）表示，采用t和χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

经SameSpots软件分析，探究其斑点，筛选结果可见甲胎蛋白阴性肝癌患者血清中具有较高表达差异，血清中高蛋白表达类型共9种，且互有明显差异，具体内容详见表1。

表1 甲胎蛋白阴性肝癌患者血清中高表达蛋白质谱鉴定结果分析（n, %）

3 讨论

原发性肝癌的早期发现是困扰临床医生的难题，长久以来，AFP始终是公认的肝癌早期筛查的重要指标，相关资料显示，原发性肝癌患者中甲胎蛋白阳性者一般为70%左右，临床中仍有部分AFP阴性的原发性肝癌。因此，开展血清标志物研究，提高原发性肝癌早期诊断具有重要意义[9-10]。本次研究选择AFP阴性肝癌类型。本次研究发现，通过分析补体因子B、1r等差异蛋白分子，能够在肝癌早期的诊断中发挥良好的诊断效果，且T细胞亚群临床检测简便易行，可及性强，相关蛋白分子可作为生物标志物，提升甲胎蛋白阴性肝癌的早期诊断效果，临床应用前景十分理想。