唾液中IL-8的水平与复发性阿弗他溃疡的相关性

强 璐,王雨萌,徐 林

(北京中医药大学第三附属医院口腔科,北京 100029;*通讯作者,E-mail:shzhangrui@21cn.com)

复发性阿弗他溃疡(recurrent ahthous ulcer,RAU)是口腔黏膜疾病中最常见的、具有周期发作特点的非化脓性炎症性疾病[1]。RAU的发病率高达20%,且反复发作较难彻底治愈,严重影响患者的生活质量。细胞因子是由活化的免疫细胞及部分非免疫细胞分泌的具有调控免疫、炎症及细胞生长等功能的小分子蛋白质[2]。有研究表明,细胞因子广泛参与了RAU溃疡局部的炎症与免疫反应,在RAU的发生和发展中起着重要的作用[3]。白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)是细胞因子的一种,是调节机体对损伤及炎症反应的重要的趋化因子之一[4]。然而,IL-8在RAU患者唾液中的局部表达情况及其与RAU的关系仍然没有明确,本研究拟检测RAU患者唾液中IL-8水平并探讨其与RAU活动性的关系。

1 材料与方法

1.1 研究对象

本研究设计为前瞻性的横断面研究,2016年5月开始设计,2016年12月开始实施,研究对象为2016-12～2017-12在北京中医药大学第三附属医院口腔科确诊的轻型RAU患者117例,其中男性54例,女性63例,年龄15-65岁。诊断标准符合陈谦明[5]主编的《口腔黏膜病学》第三版复发性阿弗他溃疡的诊断标准。口腔中出现溃疡不超过3 d且未使用全身药物或局部药物者定义为RAU活动期(活动期组,n=61),既往有RAU病史,但10 d内至此次检查无溃疡发作者定义为RAU间歇期(间歇期组,n=56)。另外选取我院进行体检的年龄及性别匹配的健康成年人58例作为对照组。主要排除标准:①甲状腺功能亢进;②急慢性涎腺炎或涎腺结石;③牙周病及其他口腔黏膜疾病;④2型糖尿病;⑤严重的肝肾功能障碍;⑥恶性肿瘤。

1.2 研究方法

1.2.1 唾液样本采集 采用非刺激法采集RAU患者和对照组的唾液标本。所有患者均空腹,样本收集前嘱受试者用生理盐水漱口3次,然后嘱受试者坐于治疗椅上,头位端正,双眼平视前方,使口腔腺体分泌唾液自然流于口底,然后将空针注射器置于口底唾液中间,尽量不触碰黏膜,取1 ml唾液装入无菌EP管中,3 000 r/min离心5 min后置于-80 ℃冰箱中备用。

1.2.2 ELISA检测 IL-8水平采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,ELISA试剂盒购自美国Diagnostic Products公司,严格按照使用说明书进行操作,各组血清标本的吸光光度值由BIO-RAD680酶标仪检测。

1.3 统计分析

用Kolmogorov-Smirnov检验对各组数据进行正态性检验。正态分布的连续性变量采用均数±标准差表示,三组间比较采用方差分析及Tukey post-hoc检验。计数资料用百分率表示,两组及三组间比较采用卡方检验。采用多因素Logistic逐步回归法评价其各变量与RAU活动期的相关性。所有统计分析均采用SPSS22.0软件进行。以双侧P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基本临床资料及唾液IL-8水平

各组间年龄、性别等基本临床资料差异无统计学意义,而活动期组唾液IL-8水平显著高于间歇期组,间歇期组唾液IL-8水平显著高于对照组(见表1)。

2.2 各变量与RAU活动性的独立相关性

在RAU患者中,对各变量与RAU活动性的独立相关性进行分析,结果见表2。将各变量纳入多因素Logistic逐步回归分析,结果显示,唾液IL-8水平是RAU活动性的独立危险因子(优势比1.071,95%可信区间1.042-1.100;P<0.001)。

表1 各组的基本临床资料及唾液IL-8水平Table 1 Baseline characteristics and salivary IL-8 levels in RAU patients and controls

表2 RAU活动性的多元Logistic回归分析Table 2 Multiple Logistic regression analysis of active RAU

3 讨论

RAU的反复发作会影响患者说话、进食,严重影响患者的生活质量。因此,对RAU发病进行动态的监测和风险评估具有重要的意义。与血液标本相比,唾液标本具有无创、易采集、易于被患者接受等优点,因此,利用唾液标本来监测口腔健康和疾病状态,预测疾病的发生发展已成为近几年研究的热点。

本研究观察到,活动期RAU患者唾液IL-8水平较间歇期患者明显升高,而间歇期RAU患者唾液IL-8水平又较健康对照者显著升高。这一研究结果表明,RAU患者唾液内IL-8处于高表达状态,并可能与疾病活动性相关。单核巨噬细胞、T细胞、中性粒细胞、内皮细胞、成纤维细胞等在炎症刺激下均可以分泌IL-8[6,7]。而有研究表明,RAU患者口腔溃疡局部可以检测到CD4+及CD8+T细胞、B细胞、成熟的巨噬细胞、单核细胞的生成增多及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子的高表达[8,9]。而活动期RAU患者的外周血中也检测出了TNF-α的高表达[10],证明局部甚至全身炎症反应参与了RAU的病理生理过程。而这也能够解释本研究所观察到的结果。

在RAU患者中,我们进一步进行了多因素Logistic回归评价了唾液IL-8水平与RAU活动性的独立相关性,结果显示,在排除了年龄、性别、BMI及吸烟状态等混杂因素后,唾液IL-8水平是预测RAU活动性的独立危险因子,证明了唾液IL-8可以作为预测RAU发病及其活动性的重要的生物标记物。

本研究主要局限在实验设计方面,该小样本、单中心的横断面研究得出的结论在应用于临床实践前,尚需大样本、多中心前瞻性研究来证实。

综上所述,RAU患者溃疡期唾液IL-8水平显著升高,唾液IL-8水平是预测RAU活动性的独立危险因子。