自身免疫性溶血性贫血对血型鉴定及交叉配血结果的影响

黎海江，冯学冠，符晓玲，杨艺伟，黄 植

自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者的自身抗体可以引起红细胞的破坏，从而出现溶血性贫血。AIHA患者自身抗体包括温抗体、冷抗体和冷-热混合型抗体。这些自身抗体的存在，不仅凝集自身红细胞，同时也凝集供者红细胞，对AIHA患者的输血前鉴定试验带来巨大的干扰，影响着输血治疗的安全性和疗效[1]。本研究回顾性分析了128例AIHA患者的血清学特征及其对输血前血型鉴定及交叉配血的影响，为AIHA患者的安全输血提供参考。

1 资料与方法

1.1 病例资料 以2015年1月～2017年12月本院诊治的AIHA患者128例为观察对象，男性86例，女性 42 例，年龄 3～78（21.6±20.8）岁，未成年人82例，成年人46例。

1.2 试验方法

1.2.1 抗人球蛋白试验 取患者静脉血6 ml，2000 r/min离心10 min，分离血清与红细胞；生理盐水洗涤红细胞3次后，将红细胞配成30 ml/L的红细胞悬液，进行直接抗人球蛋白试验（DAT）及间接抗人球蛋白试验（IAT）。DAT/IAT试剂盒购自上海血液生物医药有限责任公司（国食药监械准字2008第2400311号），按照试剂盒说明书进行操作及结果判定。

1.2.2 血型鉴定及交叉配血试验 所有患者均在输血前6 h内采用EDTA抗凝真空采血管抽取静脉血2 ml，进行ABO、RH血型鉴定及交叉配血试验。ABO血型鉴定采用试管法，进行正反定型，抗A、抗B标准血清购自北京中联安华科技公司。交叉配血采用凝聚胺试验法，试剂盒购自上海博普生物技术有限公司，按照试剂盒说明书进行操作。对血型鉴定及交叉配血结果判定困难者，进行氯喹放散试验，具体操作及结果判定参照中国输血技术操作规程进行[2]。

1.3 统计学方法 应用SPSS16.0统计软件分析，计数资料以例及百分率表示，不同组间比较采用R×C列表χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 抗人球蛋白试验结果 128例AIHA患者DAT均阳性，强度在+～++++，以++和+++为主，占71.1%。IAT也均阳性，强度同DAT相似，抗体类型中以温抗体型为主，其次是混合抗体型，冷抗体型最少。见表1。

2.2 血型鉴定及交叉配血结果 128例AIHA患者中，ABO血型正反定型不符65例（50.8%），随着DAT阳性强度的增高，ABO血型正反定型血型不符的发生率显著升高（P＜0.05）；不同抗体类型的AIHA患者血型正反定型不符合的发生率亦不相同（P＜0.05），其中冷抗体型最高，其次为混合抗体型，温抗体型最低。128例患者中，72例（56.3%）交叉配血不相合，并且DAT阳性强度越高，交叉配血不相合的发生率越高（P＜0.05）；不同抗体类型的AIHA患者交叉配血不相合的发生率无显著差异（P＞0.05）。温抗体型血型正反不符者经氯喹分散试验后，正反定型均相符；冷抗体型及混合抗体型中，ABO血型正反定型不符者经37℃加热、再经氯喹分散试验后，正反定型均相符，见表2。

表1 AIHA患者抗人球蛋白试验结果(n=128)

表2 不同DAT强度及抗体类型AIHA患者血型及交叉配血结果［n(%)］

3 讨论

由于AIHA患者存在自身抗体，可与红细胞发生凝集而影响输血治疗，因此，原则上AIHA患者一般不进行输血治疗，但对于贫血严重而危及生命时，不得不输血治疗。也正是由于自身抗体的存在，AIHA患者输血前血型鉴定和交叉配血难度增加[4]。本研究首先对128例AIHA患者抗人球蛋白试验结果及抗体类型进行了回顾性分析，结果发现，所有患者DAT或IAT均阳性，阳性程度以++或+++为主，证实AIHA患者中存在较高滴度的自身抗体，与文献报道一致[5]。另外，AIHA患者中抗体类型以温抗体型为主，冷抗体型或混合抗体型较少，说明多数AIHA患者的这些抗体在35～40℃与红细胞发生反应，与文献报道一致[4]。

分析本组AIHA患者血型鉴定及交叉配血试验结果发现，血型鉴定正反定型不符合者占50.8%，交叉配血不合者占56.3%，可见AIHA患者容易造成血型鉴定困难及交叉配血不合，这直接影响着患者输血的安全性。这主要是由于AIHA患者体内存在自身抗体，这种抗体不仅造成自身红细胞的凝集，同时还可与供血红细胞凝集，影响着血型鉴定及交叉配血结果[6]。另外，本研究还发现，DAT阳性强度越高，血型正反定型不符合及交叉配血不合的发生率越高，表明DAT阳性强度与血型定型不符合及交叉配血不合相关，与文献报道一致[4]。AIHA患者DAT阳性强度越高，在一定程度上反映自身抗体的水平越高，越容易造成自身或供血红细胞的凝集，从而越容易影响血型定型及交叉配血结果。由于本组资料中无RH阴性标本，故对RH定型的影响未纳入研究。

发现血型正反鉴定不符合或交叉配血结果不合时，如何处理以保证结果的可靠性，是对输血科工作人员的考验。对温抗体型患者，采用氯喹分散试验可有效去除红细胞表面的自身抗体，从而减少和抑制红细胞凝集，从而保证血型正反定型相符[1,4]。本组对温抗体型血型正反定型不符合的AIHA患者进行了氯喹分散试验后，均正反定型相符，排除了自身抗体对血型鉴定的影响。对于冷抗体型或混合抗体型，由于冷抗体的存在，选择37℃温浴或红细胞热洗涤等方式，可去除自身抗体对交叉配血或血型鉴定的影响[7]。本组对冷抗体型或混合抗体型AIHA患者在37℃水浴后再进行氯喹分散试验，能够有效清除对血型鉴定和交叉配血结果的影响。

综上所述，AIHA患者自身抗体类型以温抗体型为主，容易造成血型正反定型不符合及交叉配血不合，并且DAT强度与血型不符及交叉配血不合相关。采取氯喹分散试验或37℃温浴去除自身抗体的影响，可减少血型不符及交叉配血不合发生率。