不同肺炎患儿降钙素原、超敏C反应蛋白及T细胞亚群变化的临床意义

庄金宝，刘天明，刘彩红，马淑红，王江元

(吉林大学第一医院二部 检验科，吉林 长春130031)

呼吸道感染是儿科临床最常见、最多发的疾病之一，是仅次于早产的导致5岁一下儿童死亡的第二位原因，发达国家以病毒为主要病原菌，发展中国家以细菌为主[1]。细菌、病毒、支原体、真菌和原虫是引起儿童社区获得性肺炎的常见病原菌[2,3]。儿童呼吸道感染在年龄越小的患儿中表现越严重，并发症及死亡率均较高。本文旨在研究外周血超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)、T淋巴细胞亚群，在不同类型肺炎患儿中的变化情况，指导临床诊断和鉴别诊断患儿肺炎。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择2014年5月6日-2016年11月23日我院收治的肺炎患儿，其中细菌性肺炎32例、支原体肺炎25例、病毒性肺炎30例、健康对照38例。通过病史、体格检查、X线摄片和实验室检查，均符合小儿肺炎诊断标准[4]的住院患儿，且无心、肝、 肾等重要脏器疾患及其他基础疾病。细菌性肺炎组，男15例、女17例，平均年龄(5.9±3.8)，均经痰或咽拭子细菌培养证实；支原体性肺炎组，男12例、女13例，平均年龄(6.1±2.8)，肺炎支原体IgM抗体均为阳性；病毒性肺炎组，男13例、女17例，平均年龄(4.9±4.2)；健康对照组，男18例、女20例，平均年龄(5.2±3.5)。各组之间性别、年龄统计学差异(P均>0.05)。

1.2 方法

1.2.1样本采集 采集肺炎患儿和健康对照儿童2 ml EDTA-K2抗凝静脉血用于流式细胞仪检测；含分离胶试管分离血清用于检测hs-CRP、PCT。肺炎患儿均于接受治疗前采血。

1.2.2hs-CRP检测 采用免疫散射比浊法，由BN II(型号，国家)全自动蛋白分析仪进行检测，试剂购自西门子医学诊断产品有限公司。

1.2.3PCT检测 采用化学发光法，于Smart Line分析仪上进行，试剂为Thermo的降钙素原检测试剂盒，>5 mg/L为阳性。

1.2.4流式细胞仪检测

采用FACSCalibur全自动流式细胞分析仪，定量检测外周血T淋巴细胞亚群。向管中加入混匀的全血50 μl，之后加入CD4+CD8+CD3联合抗体5 μl，充分涡旋混匀后，避光静止15 min。再向管中加入2 ml的1×溶血素，避光放置7 min。向管中加入2 ml的PBS缓冲液，涡旋混匀后离心(300 g，5 min)后，倒去上清液，将管底剩余液体涡旋混匀后，在加入2 ml PBS缓冲液，再次离心(300 g，5 min)。倒去上清液，将管底剩余液体涡旋混匀，加入0.5 ml PBS缓冲液，即可上机检测。T淋巴细胞CD4+CD8+CD3单克隆抗体购自BD公司。

1.3 统计学分析

采用SPSS19.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差(x—±s) 表示，多组间比较采用方差分析，两组比较采用t检验； 计数资料采用χ2检验；P<0.05为有统计学差异。

2 结果

2.1 三组肺炎于健康儿童hs-CRP的比较

与健康对照组比较，细菌性肺炎组、支原体性肺炎组患儿hs-CRP水平均较高，且有统计学差异(分别t为13.99，8.13；P均<0.05)。细菌性肺炎组与支原体性肺炎组、病毒性肺炎组与健康对照组比较，hs-CRP水平无统计学差异(分别t为1.77，0.50；P均>0.05)，见表1。

2.2 三组肺炎于健康儿童T细胞亚群的比较

细菌性肺炎组、支原体性肺炎组、病毒性肺炎组患儿CD3+、 CD3+CD4+T淋巴细胞水平均低于对照儿童，差异均有统计学意义 (分别t为6.12、4.86，6.33、5.44，5.72、5.26；P均<0.05)； 三组肺炎患儿之间的差异则均无统计学意义(P均>0.05)。

表1 各组hs-CRP水平比较(x—±s)

注：与正常对照组比较aP<0.05，bP>0.05；与细菌性肺炎组比较cP<0.05，dP>0.05

细菌性肺炎组、支原体性肺炎组患儿CD3+CD8+T淋巴细胞水平均低于对照儿童，差异均有统计学意义 (分别t为5.64，5.51；P均<0.05)； 细菌性肺炎组与支原体性肺炎组、病毒性肺炎组与健康对照组比较，CD3+CD8+水平无统计学差异(分别t为0.05，1.12；P均>0.05)。

细菌性肺炎组、支原体性肺炎组、病毒性肺炎组患儿的CD4+/CD8+均低于对照儿童，差异均有统计学意义(分别t为7.03，6.30，6.69；P均<0.05)； 三组肺炎患儿之间的差异无统计学意义 (P>0.05)，见表1。

2.3 三组肺炎于健康儿童PCT的比较

细菌性肺炎组PCT水平高于支原体性肺炎组、病毒性肺炎组和健康对照组，差异有统计学意义(分别t为16.68、18.45、21.27；P均<0.05)。而支原体性肺炎组、病毒性肺炎组与健康对照组比较PCT水平无显著统计学差异(P均>0.05)。细菌性肺炎组PCT阳性率高于其他两组肺炎患儿和正常组，差异有统计学意义(分别χ2为32.25、40.51、55.42；P均<0.05)，见表2。

表2 各组PCT水平比较

注：与细菌性肺炎组相比eP<0.05。

3 讨论

C反应蛋白是由肝脏合成的一种全身性炎症反应急性期的非特异性标志物，提高检测精度所测的CRP，称为超敏CRP[5]。在炎症反应阶段4-6 h内，hs-CRP水平迅速升高，其升高幅度与细菌感染的严重程度相关，感染越重，hs-CRP升高幅度越大，但在非细菌性感染时，hs-CRP的升高并不明显[6]，已逐渐成为诊断、鉴别诊断细菌感染的可靠指标。本研究中，细菌性肺炎和支原体性肺炎hs-CRP均较正常儿童升高明显，病毒性肺炎与正常儿童hs-CRP无明显差异，表明hs-CRP高效、灵敏，为早期诊断细菌性和非细菌性儿童肺炎提供了非常重要的依据[7]。而细菌性PCT水平、PCT阳性率明显高于支原体性肺炎、病毒性肺炎和正常儿童，可见PCT可鉴别诊断细菌性肺炎和支原体性肺炎。其机制为，PCT由甲状腺滤泡旁细胞分泌，细菌及其毒素是促进PCT升高的主要物质，在细菌感染，尤其是全身性感染时PCT会逐渐升高[5,8]。

T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞，在胸腺激素的诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的T细胞，它既是机体的免疫反应的效应细胞，又是免疫调节细胞。目前，评价细胞免疫功能的常用方法是T淋巴细胞亚群检测[9]。外周成熟的T临床细胞均表达CD3，再分为CD4+和CD8+亚群[10]。CD4+T细胞是辅助诱导性T细胞亚群(Th细胞)，其减少说明B细胞产生免疫球蛋白减少，细胞免疫功能下降；CD8+T细胞是抑制性细胞亚群，其数量增多，表示免疫受到抑制。CD4+/CD8+是人体内环境稳定的最重要指标，比值降低，则提示细胞免疫受抑制。当致病因子侵入人体后，会导致正常免疫平衡失调，T淋巴细胞大量凋亡，数量减少，CD4+/CD8+比例失衡，导致机体免疫功能紊乱[11]。

本研究中，三组肺炎患儿CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+水平均明显低于健康对照儿童；细菌性、支原体性肺炎组患儿CD3+CD8+T淋巴细胞水平均显著高于对照儿童，表明儿童肺炎存在一定程度的免疫失调，有研究发现免疫佐剂联合常规治疗可有效治疗儿童反复的呼吸道感染[12]。

综上所述，hs-CRP、PCT为早期诊断、鉴别诊断细菌性肺炎、支原体性肺炎和病毒性肺炎有较高的临床价值；且儿童肺炎存在一定程度的免疫功能失调，临床应将恢复免疫功能和常规抗感染治疗相结合，为临床治疗儿童肺炎提供新思路。