子宫内膜异位症患者血清VEGF、HE4及MMP-9的表达及意义

陈志华,李爱军,白 晶,乔玉环

(郑州大学第一附属医院 妇科,河南 郑州450000)

子宫内膜异位症(EMT)属于妇科临床常见的良性疾病，主要是子宫内膜组织出现在卵巢、盆腔腹膜、子宫直肠凹等子宫体以外部位所引起的病变，多表现为痛经、性交痛以及不孕不育等[1]。据统计[2,3]，EMT的发病率高达10%-15%，且呈逐年上升趋势，严重影响女性的生活健康。由于EMT病因复杂、发病机制尚不清楚、治疗难度高、易复发原因，导致该病成为目前妇产科医师研究的重点课题。国内外研究[4,5]表明，多种细胞因子参与EMT的发病和进展过程。本研究检测分析了EMT患者血清内皮生长因子(VEGF)、人附睾分泌蛋白4(HE4)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平，并与健康体检者进行对比，旨在探索血清VEGF、HE4及MMP-9水平检测在EMT诊断及病情判断中的价值。现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年6月至2017年6月本院收治的100例EMT患者为EMT组，入选标准：(1)经腹腔镜手术或病理检测确诊为EMT患者[6]；(2)年龄21-55岁，月经规律；(3)同意参加本研究，依从性良好。排除标准：排除心肝肺肾等重要脏器功能异常者；排除患有自身免疫疾病、急性炎症或生殖器官发育不良者；排除肝炎、结合以及恶性肿瘤患者；排除近期服用过激素类药物患者。EMT组患者年龄21-48岁，平均(37.52±6.81)岁；根据美国生育协会修订EMT评分标准分期：Ⅰ期17例，Ⅱ期40例，Ⅲ期34例，Ⅳ期9例。选取同期本院健康体检的100例育龄妇女为健康组，年龄21-51岁，平均(38.16±6.86)岁。两组受试者年龄、体重、基础病等方面比较，差异不显著(P>0.05)，具有可比性。本研究由医院伦理道德委员会审核通过，所有受试人员均知情同意。

1.2 观察指标与方法

两组受试者均于治疗前非经期抽取空腹肘静脉血5 ml，室温静置10 min，采用低速离心机以3 500 r/min进行离心10 min，小心吸取上清于干净EP管中，-80℃保存待检。血清VEGF、HE4及MMP-9水平采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测，其中VEGF试剂盒购自武汉博士德公司，HE4试剂盒购自上海裕平生物公司，MMP-9试剂盒购自深圳晶美生物公司。检测仪器为Multiskan MK3型全自动酶标仪(芬兰Labsystem公司)。所有试验操作均由专人按说明书执行。

1.3 统计学方法

采用SPSS19.0软件进行统计学分析，研究中所有计量资料以均值±标准差(x—±s)表示，多组数据比较采用单因素方差分析，两组数据比较采用t检验；计数资料以率(%)表示，采用χ2检验；采用Pearson法分析EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9之间的相关性；采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各指标对EMT的诊断价值；P<0.05表示差异具有显著性。

2 结果

2.1 两组血清VEGF、HE4及MMP-9水平表达

EMT组患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平均明显高于健康组，差异具有显著性(P<0.05)。见表1。

2.2 血清VEGF、HE4及MMP-9对EMT的诊断价值

见表2、图1。

表1 两组血清VEGF、HE4及MMP-9水平比较(x—±s)

表2 血清VEGF、HE4及MMP-9对EMT的诊断价值

图1 血清VEGF、HE4及MMP-9诊断EMT的ROC曲线

2.3 不同分期EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平表达

随着EMT分期的升高，患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平也明显升高；不同EMT分期患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平比较，差异具有显著性(P<0.05)。见表3。

表3 不同分期EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平比较(x—±s)

2.4 EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9的相关性分析

EMT患者血清VEGF、HE4与MMP-9水平呈显著正相关，且VEGF与HE4之间也呈显著正相关(P<0.05)。见表4。

表4 EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9的相关性分析[r(P)]

3 讨论

EMT是育龄女性常见的慢性疾病，虽然其在组织形态学方面属于良性病变，但EMT却具有侵袭、浸润、转移以及粘附等恶性肿瘤相似的生物学行为，存在一定的恶变趋势。EMT是导致女性不孕的重要原因之一，约有0.7%-1.0%的EMT患者会发生恶性转变[7]。早期诊断和治疗有助于提高EMT患者预后情况和改善生活质量。目前，腹腔镜检查是EMT诊断的主要方法，但腹腔镜手术创伤较大，费用高且并发症多，给患者身心带来较大压力。因此，寻找一种简单易行、灵敏度和特异度较高的EMT诊断方法成为临床研究的热点[8]。

随着对EMT发生机制研究的深入，国内外学者关于EMT提出了遗传学说、子宫内膜种植学说、环境与激素学说等多个学说，其中较为主流的学说是子宫内膜种植学说，即子宫内膜腺上皮细胞或间质细胞经血逆流，在卵巢和附件盆腔黏膜上定植，并生长蔓延[9]。研究[10]发现，脱落的子宫内膜在卵巢等处定植过程中需要新生大量血管来提供充足血供，可见新血管的形成在EMT的发生和发展中起重要作用。VEGF是最近发现的强效血管生长因子，作为特异性内皮细胞的有丝分裂原，通过与血管内皮细胞结合，刺激血管内皮细胞的增殖、分化、迁移，增大血管的通透性，从而促进皮下血管网络的形成[11]。近年来研究[12]表明，血清VEGF表达量升高会促进EMT患者病灶处血管新生，加快异位内膜的生长和增生，造成病情加重。HE4是近些年发现的新型肿瘤标志物，能够促进肿瘤细胞的浸润、转移以及血管生成，是卵巢癌与子宫内膜癌等恶性疾病的重要标志物[13]。EMT具有侵袭、转移和易复发等肿瘤样疾病特征，因此HE4可能参与EMT疾病的发生和发展过程[14]。MMP-9是一种大分子胶原酶，可降解基质膜、纤维连接蛋白、明胶等胞外基质，诱导血管内皮细胞出芽，加快新血管形成，促使肿瘤细胞向周围浸润和转移[15]。胞外基质的降解是EMT患者子宫内膜细胞转移和定植的重要步骤，王平[16]等研究发现，MMP-9通过降解胞外基质膜，加强细胞间黏附作用，从而促进子宫内膜细胞的异位黏附和定植生长。本研究中，EMT组患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平明显高于健康组，说明三种因子可能参与EMT的发病过程；而随着疾病分期的升高，EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平也显著提高，证实了VEGF、HE4及MMP-9的高表达可促进以为内膜细胞的转移、黏附和生长，进而破坏周围组织，导致病情加重，血清VEGF、HE4及MMP-9可作为判断EMT患者病情的重要标志物。相关性研究发现，EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9之间均呈显著正相关，推测三种细胞因子在EMT的发病和发展过程中发挥着协同作用。

采用ROC曲线分析VEGF、HE4及MMP-9检测对EMT的诊断价值，三者的ROC曲线下面积分别为0.861、0.816、0.793，说明三项血液指标在EMT临床诊断方面具有较高应用价值；其中HE4诊断灵敏度最高，VEGF和MMP-9诊断的特异性较好，故检测血清VEGF、HE4及MMP-9水平有助于EMT的早期诊断。

综上所述，VEGF、HE4及MMP-9水平与EMT的发生和发展密切相关，临床上可通过检测血清VEGF、HE4及MMP-9水平来诊断EMT和评估患者病情。