C4d和CD3对IgA肾病预后的预测价值

杨永林

(商洛市中心医院 肾脏内科,陕西 商洛726000)

IgA肾病(Immunoglobulin A nephropathy，IgAN)是世界上最常见的原发性肾小球肾炎，以IgA在肾小球系膜区沉积为主要特征[1,2]。有研究表明，约有30%的IgAN患者将进展为终末期肾病，需要透析治疗[3,4]。目前认为，高血压，起病时肾小球滤过率(GFR)降低，系膜增生、节段坏死、小管萎缩-间质纤维化均与患者预后不良有关[5,6]。近年研究表明许多分子可能与IgA肾病的发病和进展有关，这表明生物标志物可成为预测IgA肾病进展的有力工具[7,8]。有研究表明，C4d和CD3均与IgAN预后不良有关[9]。本研究探讨肾脏C4d沉积和CD3表达对IgAN患者预后的作用。

1 资料与方法

1.1 病例资料

2010年1月至2012年12月，我院收治经肾脏穿刺活检病理确诊IgA肾病患者80例，其中男性56例，女性24例；年龄18-78岁，中位年龄39岁。均经HE染色、免疫组化IgG、IgM、C1q染色，以及投射电镜检查，并按IgA肾病牛津分型进行评分。

1.2 免疫组化检测C4d、CD3

采用免疫组化试剂盒说明书进行操作，石蜡切片脱蜡水化后，灭活内源性过氧化物酶，PBS冲洗，抗原修复，加入山羊血清封闭，加入兔抗人C4d和CD3 37℃孵育2 h，聚合物增强剂37℃孵育20 min，标记二抗，AEC显色。用TBS缓冲液代替第一抗体作为阴性对照。高倍镜下(×400)随机选取4个视野，计数细胞总数及核阳性数，按阳性细胞所占的百分比(P)计分：<10%为1分，10%-50%为2分，50%-75%为3分，>75%为4分；同时根据染色的强弱程度积分：阴性1分，弱染色2分，中等程度染色3分，强染色4分。以两者乘积判断结果：1-8分为阴性；8-16分为阳性。

1.3 观察指标

通过电话或门诊对患者进行随访，随访终点为末次随访或进展期肾病(随访期间肾小球滤过率下降50%或进展至终末期肾病)[10]。根据随访结果将患者分为进展期肾病和非进展期肾病。比较C4d、CD3、患者临床病理特征(高血压，肉眼血尿等)与预后的相关性；比较两组IgA肾病患者肾脏存活率。

1.4 统计学分析

应用SPSS 19.0软件进行分析，患者间一般资料比较采用Pearsonχ2检验或fisher精确检验；肾脏存活率采用Kaplan-Meier分析并log-rank检验；多变量logistic回归分析影响进展期肾病的相关因素。P<0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者一般资料比较

24例患者(30%)随访期间发展为进展期肾病。对两组患者临床病理因素进行分析，发现进展期肾病与年龄、性别、肉眼血尿、免疫沉积物(IgM、IgG、C1q)及牛津病理分型M1，S1，E1无统计学差异(P>0.05)。高血压、eGFR、蛋白尿、牛津病理分型T1-2、C4d、CD3与进展期肾病相关(P<0.05)。见表1，图1。

表1 患者一般资料比较

注：与非进展期肾病比较，①P<0.05。

肾间质浸润性T细胞CD3染色，a，严重；e，轻度b,C4d阳性；f,C4d阴性

2.2 C4d对患者肾脏存活率的影响

患者出院后进行为期4年的随访，中位随访时间为3.4年。C4d阳性患者肾脏存活率显著低于C4d阴性患者(45.8% vs 69.6%，11/24 vs 39/56，P<0.05)。

2.3 影响肾脏存活率回归分析

对患者的临床病理资料如年龄、性别、高血压、牛津病理分型及C4d，CD3积分等进行分析，结果表明，eGFR、C4d、CD3水平均为影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)，见表2。

表2 影响肾脏存活率的回归分析结果

3 讨论

本研究证实一些危险因素如eGFR降低、高蛋白尿、高血压和牛津病理分型T1-2[11]对IgA肾病的预测作用，临床病理参数的多变量分析结果表明，蛋白尿和高血压与疾病进展有相关性，这与Espinosa M和Myllymaki J M等研究结果一致[12,13]。此外，我们对两组患者临床病理因素进行分析，发现进展期肾病与M1，S1，E1无相关性，与彭用华[14]的研究结果一致，与Masutani等[15]的研究相反，我们对此进行了分析，认为有以下几个原因：①本研究样本量小，且排除了儿科患者；②本研究中患者病情较严重，表现为更高的蛋白尿和更低的eGFR。

IgA肾病已被证实是一种免疫复合物介导的肾小球肾炎，越来越多的证据证实补体激活参与 IgA肾病的疾病进展，现多认为IgA肾病补体启动是从C3旁路途径开始，表现为系膜C3、IgA、IgM、IgG沉积；除此还存在甘露糖结合凝集素(MBL)补体启动途径，表现为系膜C4d沉积，检测C4d在肾脏沉积情况可能有助于预测 IgA肾病患者肾脏疾病的进展及预后[16]。本研究中，C4d阳性患者肾脏存活率显著低于C4d阴性患者，证实了肾小球C4d沉积可作为IgA肾病补体凝集素途径激活的标志物，能够反映IgA肾病疾病进展；肾小管间质损伤，特别是炎症损伤，是影响IgAN肾病预后的重要因素。典型的T细胞表达抗原CD3多用于量化组织炎症的程度，并可作为肾小管间质损伤标志物预测疾病进展。本研究结果也证实CD3与进展期肾病相关。

综上所述，我们证实C4d和CD3可预测IgAN的疾病进展，该方法具有廉价方便，敏感性和特异性良好等优点，可将其作为预测疾病临床进展的指标。