上海地区儿童肾功能生化项目参考区间的建立

2018-11-05陈时维叶志成

检验医学 2018年10期

陈时维，叶志成，付盼，李巍，杨丹，徐锦

（复旦大学附属儿科医院临床检验中心，上海 201102）

检验项目参考区间是疾病诊断、检验结果分析与解释的重要依据。因此，实验室为临床提供一个准确、可靠的参考区间极为重要[1]。目前，临床实验室中大多数检验项目的参考区间引用自行业指南、仪器试剂说明书或国内成人标准，这些参考区间大多不分年龄、性别，且较少针对儿童群体。由于儿童和成人在免疫状态、生长发育水平等方面均有差异，因此成人参考区间无法适用于儿童。儿童各项指标的参考区间亟待建立并规范，以利于儿童疾病的有效诊治。为此，本研究按照美国临床实验室标准化协会（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）及国际临床化学和检验医学联合会（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）联合发布的C28-A3文件标准[2]，建立上海地区儿童肾功能项目[尿素、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（uric acid，UA）、总蛋白（total protein，TP）、白蛋白（albumin，Alb）]的参考区间，填补本地区儿童肾功能项目参考区间的空白。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2015年7月—2017年5月复旦大学附属儿科医院特需门诊体检中心进行健康体检的儿童。排除标准：（1）正在治疗性服药；（2）近1个月内有发热、感染、创伤的情况；（3）近6个月内有住院史，近4个月内有输血史；（4）儿童常规体检的各项身体指标及体重指数不在参考区间内。入组儿童进一步进行血常规、尿常规和粪常规检测，结果均正常。共纳入满足上述条件的儿童1 038名，其中男543名（52.31%）、女495名（47.69%），年龄3～17岁。按年龄分为3组：3～6岁组（345名，其中男147名、女198名）、7～12岁组（434名，其中男267名、女167名）、13～17岁组（259名，其中男129名、女130名）。本研究经复旦大学附属儿科医院伦理委员会批准，由接诊医生当面告知儿童家长本研究的相关情况并签署知情同意书。

1.2 仪器与试剂

采用日立7180全自动生化分析仪（日本日立公司）及配套试剂、校准品检测尿素（尿素酶紫外波长测定法）、Cr（酶法）、UA（尿酸酶-过氧化物酶法）、TP（双缩脲比色法）、Alb（溴甲酚绿法）。质控品（2015年批号为M401011、M401012、M401013，2016年批号为M407081、M407082、M407083，2017年批号为M507471、M507472、M507473）由美国Beckman-Coulter公司提供。

1.3 方法

采集所有研究对象安静状态下的坐姿空腹12 h静脉血3 mL，2 h内以2 200×g离心5 min分离血清，4 h 内完成检测。所有样本均无溶血、黄疸和脂血。严格按标准操作规程进行操作，在质控在控的情况下进行样本检测。每年进行1次仪器校准，试剂更换批号或仪器校准后进行留样复查及质控品检测。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0软件和Excel 2007软件进行统计分析。离群值的判断方法参照CLSI C28-A3文件[2]，将各项目的数据按男、女升序排列，检测数据中若有疑似离群值，则将疑似离群值与相邻值的差值（D）和数据全距（R）相除，若D/R≥1/3则为离群值，应剔除。采用 K-S检验进行正态性检验。呈正态分布的数据以s表示，多组间比较采用单因素ANOVA分析，两两比较采用q检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄组之间肾功能项目的比较

不同年龄组之间除血清尿素差异无统计学意义（P＞0.05）外，血清Cr、UA、TP、Alb水平差异均有统计学意义（P＜0.05），且随年龄的增长，血清Cr、UA、TP、Alb水平呈上升趋势。见表1。

表1 不同年龄组尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比较

注：与7～12岁比较，*P＜0.05；与13～17岁比较，#P＜0.05

2.2 不同性别之间肾功能项目的比较

在3～6岁组中，男、女童之间尿素、Cr、UA、TP、Alb水平差异均无统计学意义（P＞0.05）；在 7～12岁组中，男、女童之间血清UA、Cr水平差异有统计学意义（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差异均无统计学意义（P＞0.05）；在13～17岁组中，男、女童之间血清Cr、UA水平差异均有统计学意义（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表2～表4。

表2 3～6岁儿童不同性别之间尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比较

表3 7～12岁儿童不同性别之间尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比较

表4 13～17岁儿童不同性别之间尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比较

2.3 上海地区儿童肾功能项目参考区间的建立

表5 不同年龄儿童Cr、UA、TP、Alb的参考区间

3 讨论

参考区间在临床疾病的诊断中起重要的指导作用，判断检测指标的测定结果有无临床意义通常是基于其与参考区间的比较。儿童作为一个特殊的群体，由于其生理特性使得某些检测项目的测定结果与成人相差较大，导致成人的参考区间在儿童群体中应用有一定的局限性，而目前国内尚未建立一套针对儿童检验项目的参考区间，因此实验室为临床提供正确、适用的儿童参考区间显得极为重要。近年来，国内学者对此作了一些研究[3-4]，并建立了某些项目的参考区间，但大样本、多项目的系统研究仍然是空白。为此，本研究建立了上海地区健康儿童肾功能多种生化指标的参考区间。

将本研究结果与国内同类研究[5-6]进行比较，5项参考区间的结果并不完全一致，特别是血清UA和Cr水平在7～12岁组和13～17岁组中呈现出明显的性别差异。导致参考区间出现差异的原因可能是：（1）仪器检测方法或原理不同；（2）研究对象年龄、地域不同。目前，我国尚未发布全国性的儿童检验项目的参考区间，因此临床实验室有必要建立本地区的儿童检验项目参考区间。进行标准化设计的大样本参考区间调查是建立参考区间的理想方法[5]，但由于需要大量的人力、物力而不易开展，而利用已有的实验室信息系统数据库建立参考区间是值得探索的替代方法[7]。本研究利用实验室信息系统数据库导出2015年7月—2017年5月筛查组合结果，根据筛选标准得到1 038名健康儿童作为本研究的入组人群。因1 038名儿童在需要区分性别和年龄的情况下样本还不够大，所以本研究还存在一定的局限性，需在以后的研究工作中进一步细化和完善。