黑龙江省3个哨点医院2010—2015年细菌性痢疾监测结果分析

苏 怡，白 晶，张 雷，任启智

细菌性痢疾（菌痢）是由志贺菌引起的一种急性肠道传染病，是我国法定乙类传染病。该病发病率高，主要传染源为患者和病菌携带者，主要传播途径是粪-口传播，人群普遍易感。为掌握我省细菌性痢疾发病情况，了解发病的主要特征、病原菌的菌型分布、流行菌株的变迁和耐药谱的变化，我中心自2005年起，根据《全国细菌性痢疾监测方案》要求，结合我省实际，开展痢疾监测工作。现对2010—2015年在哈尔滨市儿童医院、佳木斯市中心医院、佳木斯大学附属第一医院3个哨点医院采集的4182份疑似痢疾样本进行分析，将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本 采自2010—2015年哨点医院（哈尔滨市儿童医院、佳木斯市中心医院、佳木斯大学附属第一医院）肠道门诊就诊患者。

1.2 方法

1.2.1 填写病例个案调查表 主要内容包括病例一般情况、发病情况、临床症状、诊断依据、流行病学调查（发病前1周内）等。

1.2.2 标本采集 采集腹泻病例标准：大便次数每日≥3次，粪便的性状异常者；疑似病例，有脓血便或粘液便或水样便或稀便，或伴有里急后重症状，并除外其他原因腹泻病例。采用肛拭或便盒留便，2 h内送到实验室进行检验。

1.2.3 分离培养及鉴定 用接种环多点沾取样本，直接划线分离于SS、EMB（或HE、麦康凯）琼脂平板，37 ℃培养24～48 h，观察挑选形态为无色、半透明、圆形、湿润、光滑、突起、直径大小为1～2 mm可疑菌落，转种于克氏双糖铁斜面和葡萄糖半固体培养基，37 ℃培养18～ 24 h后，采用法国生物梅里埃肠道菌试剂鉴定条API 20E进行鉴定，并用志贺菌免疫血清进行凝集分型鉴定。

1.2.4 药物敏感试验 根据临床与实验室标准化协会推荐的K-B琼脂法进行实验。将含有定量抗菌药物的纸片贴在覆盖测试菌的琼脂平板上，37 ℃培养16～18 h后取出。纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围扩散，形成递减的浓度梯度。在纸片周围抑菌浓度范围内测定菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即抑菌圈。用游标卡尺测量抑菌圈直径，从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录，抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的药物敏感（药敏）性。每次药敏试验须用ATCC 25922大肠杆菌做质控。只有当质控菌株的抑菌圈直径在允许范围内测试菌株的结果才可以报告。

1.2.5 材料与试剂 实验所使用的培养基及药敏试验MH平板由北京陆桥技术股份有限公司提供；志贺菌免疫血清由宁波天润生物药业有限公司提供；药敏纸片由赛默飞世尔科技（中国）有限公司提供；标准质控菌株大肠埃希菌ATCC 25922由中国生物制品检定所提供。

1.3 统计学处理 采用描述性流行病学分析方法，计算相应的频数或者率。

2 结 果

2.1 疑似痢疾样本采集时间、人群分布 病例全年散发，各月均有病例发生，有明显的季节高峰，每年5月开始发病人数明显上升，在6—9月达到高峰，占总病例数的56.67%，分离得到的志贺菌均集中在此期间。10月后逐步下降，次年1—2 月达到最低点。

2.2 菌株检出情况 从采集的4182份样本中，共分离到32株志贺菌，分离率为0.77%。其中福氏志贺菌21株，宋内志贺菌11株。血清学分型与生化反应鉴定结果一致。菌株分离得到的时间集中在每年的5—10月，其中8—9月最多，共计20株，占62.5%。病例多发于0～10岁儿童，共计28例，占87.5%；29～40岁有3株，75岁1株。见表1。

2.3 药敏结果 对监测方案要求的10种抗生素进行药敏检测。分离得到的32株志贺菌对头孢噻吩、头孢噻肟、庆大霉素及环丙沙星敏感，敏感率分别为71.7%、75.5%、84.7%及71.4%；对利福平、萘啶酸、氨苄西林、四环素及复方新诺明耐药，耐药率分别为100%、80.5%、82.4%、90.3%及95.1%。见表2。

表1 2010—2015年黑龙江省3个哨点医院志贺菌株分离情况（株）Table 1 Isolates of Shigella in 3 sentinel hospitals in Heilongjiang Province from 2010 to 2015 (strains)

3 讨 论

细菌性痢疾仍是全球性的公共卫生问题，全球每年发病人次达1165亿，死亡约110万例。本研究对2010—2015年在我省3个哨点医院采集的4182份疑似痢疾样本进行分析，共分离志贺菌32株，其中以福氏志贺菌为主（21株），宋内氏志贺菌次之（11株），与全国大多数省份国家级监测点得到的数据一致[2，4]。

细菌性痢疾具有明显的季节性，6—9 月达到高峰，研究中志贺菌分离时间均集中在5—10月，其中8—9月最多，共计20株，占62.5%。与当地该时间段气温高、居民对生冷的果蔬和饮料进食量增大、苍蝇密度增高等因素有关。

0～10岁儿童多发为人群流行特征。本研究中0～10岁儿童28例，占检出菌株者中的87.5%。其原因与幼儿胃肠道菌群和免疫系统功能尚未健全，家庭食品加工、喂食过程中的不良卫生条件和饮食习惯有关。

抗生素的广泛使用，使志贺菌的耐药菌株逐年增加。将分离的32株志贺菌进行10种抗生素药敏试验发现，对利福平、萘啶酸、氨苄西林、四环素及复方新诺明耐药，对头孢噻吩、头孢噻肟、庆大霉素及环丙沙星敏感，与国内相关文献报道大体吻合[4-5，13]。

本研究中检出2010—2015年志贺菌32株，阳性检出率低于全国检出率，可能受以下因素影响：①我省地处东北地区，适合病原菌生存的气候条件如温度、湿度、降雨等夏季高温天气时间较短，病例和疫情的发生相比我国西南省份及东南沿海地域要低很多。②随着人们生活理念的变化，到医院就诊的腹泻病人已经有逐年减少的趋势，而即使去医院，多数病例在就诊前也已自主服用过抗生素，因此严重干扰采集样本的实验室检验结果。③由于资金人员等因素匮乏，监测点的设置很有局限性，覆盖面较小，同时不同地市病例报告的准确性又存在误差。④在对病例样本采集、保存运送等环节也存在不及时不规范等问题，从而影响病例样本的阳性检出率。

表2 32株志贺菌株药敏试验结果（株）Table 2 Results of drug sensitive test of 32 strains of Shigella (strains)