三唑磷对鲻鱼的急性毒性和分布规律研究

金衍健 应忠真 朱剑 李子孟 王范盛

(浙江省海洋水产研究所， 农业部重点渔场渔业资源科学观测实验站，浙江省海洋渔业资源可持续利用技术研究重点实验室， 浙江舟山 316100)

三唑磷(triazophos)是一种广谱杀虫、杀螨剂，具有较强的触杀作用，对鱼类、甲壳类和软体动物具有高毒性[1，2]。近年来养殖户为提高经济效益，保护养殖产品不受敌害生物的侵害，使用其清除敌害生物，不仅容易导致水域生态环境污染并对水生生物造成负面影响，而且污染水体排入开放水域后，对其他水体中的养殖生物产生毒杀作用，引起污染事故，产生经济纠纷[3]；然而由于三唑磷在环境中高毒且易降解，引起鱼类等经济生物死亡后，一般从取样到实验室需经过相对较长的时间，对证据的保留和检测比较困难。一般目前针对污染事故鱼类样品，前处理基本都是取其肌肉检测，存在很大程度上的假阴性的可能，而且目前对三唑磷在急性毒性死亡后鱼体不同组织内残留并没有相应的报道。本次实验通过人工染毒，造成鲻鱼三唑磷急性中毒死亡，取不同组织的样品，研究其不同组织内三唑磷残留含量，为以后由三唑磷引起渔业污染事故的样品检测提供技术支持。

1 实验材料与方法

1.1 仪器与试剂

气相色谱仪(安捷伦7890B，配NPD测器，美国)，旋转蒸发仪，固相萃取装置，氮吹仪，涡旋振荡器( IKA vortex genius3型，德国)，碱性氧化铝固相萃取柱(2.5g/6mL，CNW)，丙酮(色谱纯)、二氯甲烷(色谱纯)、正己烷(色谱纯)。

1.2 色谱条件

色谱柱为HP-35(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度260℃，柱流速为2.0mL/min，柱温箱升温程序条件如表1所示。

表1 柱温箱升温程序条件

1.3 样品的来源

样品来自舟山岱山海域，因三唑磷农药污染致海洋中鲻鱼急性毒性死亡，鱼样分别取其脑、肠、肝脏、皮、鳃、血、性腺、胰脏和肌肉共9个部位，切碎匀浆，立刻取样进行前处理。

1.4 样品处理方法

取适量的样品，置于50mL离心管内，加入20mL乙酸乙酯涡旋振荡提取2min，收集于旋转蒸发瓶中，重复提取一次，合并提取液，旋转蒸发至近干，加入2mL正己烷洗脱，取上层正己烷过活化好的碱性氧化铝柱(2.5g/6mL，CNW)，不收集流出有机相，重复加正己烷2mL洗脱旋转蒸瓶。再用5mL二氯甲烷洗脱碱性氧化铝柱，收集流出有机相于15mL离心管中，氮吹至干，加丙酮定容至1mL，供气相色谱氮磷检测器分析。

2 结果与讨论

通过GC-NPD测得不同组织三唑磷含量特征的结果如表2所示。

表2 不同鱼体组织中三唑磷含量

结果测得数值在2.04～114.42μg/kg之间，脑中含量最高，肌肉中含量最低，总体趋势分为三个阶梯，脑>血、性腺>鳃、胰脏、肝脏、肠、皮和肌肉，脑的残留量是鳃、胰脏、肝脏、肠、皮和肌肉等的13.8～56.0倍，是血、性腺的1.45～2.07倍。

三唑磷为有机磷酸酯类化合物，其中毒机制主要是抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性，使其失去水解乙酰胆碱(ACh)的能力，造成胆碱能神经末梢释放的ACh大量蓄积，兴奋ACh的毒蕈碱型受体(M受体)和烟碱型受体(N受体)，产生毒蕈碱样和烟碱样作用及中枢神经系统症状[4-6]。

有机磷农药毒性主要是对乙酰胆碱酯酶的抑制，本次实验测得脑、血和性腺中三唑磷含量比较高，可能原因是三唑磷通过鳃的快速吸收[7，8]，进入鱼体内，由于神经中枢和血液中含有大量乙酰胆碱酶，快速与其结合，引起乙酰胆碱蓄积，使胆碱能神经持续冲动后死亡。本次研究发现性腺内三唑磷浓度相对较高，可能由于性腺脂类物质含量很高，而且三唑磷是脂溶性很强的物质，在乙酸乙酯中溶解度可达到500000mg/L，所以三唑磷可能通过血液快速地积蓄在性腺中。

由于我们检测鱼体中药残传统方法通常是取其肌肉检测，但通过本文对因三唑磷急性毒性死亡鲻鱼的研究发现三唑磷积蓄含量最高的组织主要为脑、血和性腺，其肌肉和鱼皮中含量最低。从实验结论可以得出，本研究对检测急性毒性死亡的鱼体中三唑磷含量具有指导意义，对其他有机磷引起的污染事故取样具有参考价值。