儿童手术应激升高血清髓样相关蛋白8/14的表达

严伟玲，郭剑毅，张 奇

(浙江大学医学院附属儿童医院 1.血液内科； 2.SICU；3.浙江大学医学院附属妇产科医院 NICU， 浙江 杭州 310000)

髓样相关蛋白8 (myeloid-related protein，MRP 8，又称S100A8或calgranulin A)和髓样相关蛋白14 (MRP 14，又称S100A9或calgranulin B)是两种Ca2+结合蛋白，属于Ca2+结合蛋白S100家族，并且MRP8和MRP14通常以MRP8/14复合物的形式存在[1]。其主要在单核细胞和巨噬细胞等髓系来源的细胞中表达，比如中性粒细胞和单核细胞。MRP8/14复合物占中性粒细胞胞质蛋白的40%，也见于上皮细胞、角质化细胞、血小板、平滑肌细胞和心肌细胞。在未被激活的细胞，MRP8、MRP14和MRP8/14存在于胞质中，而当细胞被激活后，MRP8、MRP14和MRP8/14被释放到细胞外。MRP8/14被证实在多种疾病中高表达，包括感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等，参与调控肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)- 1、IL- 8、IL- 12和IL- 16等细胞因子。

手术创伤后，机体内过高水平的TNF-α和IL- 6可作用于多种细胞，作为重要的始发因子在细胞和亚细胞水平上激发一系列级联反应，诱生其自身及其他细胞因子，导致机体内细胞因子的紊乱，抑制IgG和IgM的产生，而且还影响某些克隆细胞的分化，使T淋巴细胞不能正常地发挥免疫效应，造成患儿术后感染和炎性反应并发症的增加[2]。本研究旨在观察MRP8/14在儿童手术应激过程中的变化规律，探讨其临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料:本研究经浙江大学医学院附属儿童医院和附属妇产科医院伦理委员会批准并获得患者的知情同意。选择2015-2016年在浙江大学医学院附属儿童医院择期手术患儿41例，其中男性19例，女性22例，年龄4个月至9岁。根据Anand 和 Aynsley-Green 手术应激评分系统，分为中度应激(6～10分)组25例和重度应激(11～20分)组16例(表1)。

1.2 方法:于术前(dp)、术后即刻(d0)、术后1 d(d1)、术后3 d(d3)及术后7 d(d7)分别采集患儿外周静脉血，分离血清并保存于-20 ℃；采用MRP8/14、IL- 6和TNF-α酶联免疫吸附 (enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)试剂盒(Alpco公司)分别定量检测MRP8/14、IL- 6和TNF-α水平。

表1 手术患儿一般资料Table 1 General data of n=41)

*P<0.05 compared with medium stress.

2 结果

手术应激后，各组MRP、IL- 6和TNF-α表达水平均较术前升高(P<0.05)；重度应激组表达水平较中度应激组升高(P<0.05)(表2)。

3 讨论

应对微生物的侵袭，促炎细胞因子产生，诱导炎性反应来减少入侵部位感染的危险性。除了局部的炎性反应，这些介质还释放进入血液，导致全身反应，称之为全身炎性反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)。过度的全身炎性反应有时破坏免疫系统的正常功能并导致细胞和器官的损伤。手术应激可导致促炎细胞因子的产生， 过度的抗炎反应可抑制机体的免疫反应，增加感染的危险[3]。MRP8和MRP14一般被认为是致炎因子[4]，MRP8和14水平升高，可能使炎性反应加剧。实验结果表明手术后MRP水平较术前明显上升，且持续时间较长，至术后7 d尚未恢复术前水平。且应激程度越重，MRP表达越高，提示手术应激程度的强弱在一定程度上会影响手术患儿外周血MRP的表达。

表2 儿童手术前后各时间点MRP、IL- 6、TNF-α表达水平变化Table 2 The expressions of MRP, IL- 6, TNF-α before and after n=41)

*P<0.05 Compared with pre-operation;#P<0.05 Compared with medium stress.

多种细胞因子如IL- 1、IL- 6、IL- 8和TNF-α均能参与感染、休克、创伤及手术引发的全身炎性反应。有报道外科手术应激后机体血清中上述细胞因子水平均显著增高[5]。本研究分析了IL- 6及TNF-α这两个经典的炎性因子。从实验结果看出，术后这些因子表达水平均较术前明显上升，且重度应激较中度应激升高明显，提示应激严重程度影响炎性因子的表达。尽管应激程度影响细胞因子水平的表达，但此效应持续时间较短，术后1 d即恢复至正常水平。而MRP表达时间较长，至术后7 d仍未恢复术前水平，相较于传统炎性因子，或许能更好地预示手术应激程度的远期影响，评估远期并发症。

综上所述，手术后儿童外周血MRP表达水平均较术前上升明显。手术应激程度影响MRP表达，程度越重，表达水平越高，对预后影响越大(并发症发病率增多，住院时间延长等)。因此，降低手术应激程度有利于减少术后并发症，缩短住院时间。