绵羊不同途径免疫S2株、Rev.1布鲁氏菌病活疫苗后抗体消长规律
2018-10-22张洪军王会敏张秀丽李秀慧赵晓光刘国臣王佩琪路广计
张洪军,王会敏,张秀丽,李秀慧,赵晓光,刘国臣,王佩琪,路广计
(1.河北省承德市围场满族蒙古族自治县动物疫病预防控制中心,承德 068450;2.河北省动物疫病预防控制中心,石家庄 068450)
0 引言
布鲁氏菌病是一种世界性的人畜共患病,对经济和公共健康都有重大影响。牛、羊感染流产布鲁氏菌和羊种布鲁氏菌,是人类疾病的共同来源,该病主要危害人畜生殖系统,人与人之间几乎不传播,患病动物是主要的传染源,其中病羊感染人的比例较高。目前疫苗免疫是布鲁氏菌病防控的重要手段之一,尤其布鲁氏菌病高发地区。我国在《国家布鲁氏菌病防治计划 (2016—2020年)》中明确提出一类地区对羊采取全面免疫措施。
我国羊使用的布鲁氏菌病疫苗主要有Rev.1羊种和S2猪种。羊种Rev.1是应用最广泛的羊种布病活疫苗,可对羊实施有效的免疫[1]。猪种的S2株弱毒疫苗具有良好的免疫效果,但目前仍无法判断区分野毒及接种疫苗产生的抗体,主要从抗体在体内存续时间的长短判断,存续时间短的是疫苗免疫,时间长的为野毒感染[2]。M5菌株是一株由我国从羊种布鲁氏菌中分离并自行培育致弱的菌株,对牛、羊均可产生较好的免疫力[3]。由于该菌株毒力较强且存在毒力返强的风险,同时因其对妊娠动物有毒力增强的现象,更不能用于怀孕羊,目前市场已经不进行生产销售[4]。
1 试验材料
1.1 样品
琥红平板凝集试验和试管凝集试验结果均为:阴性的健康羊血清样品212份,采自河北省境内某地区规模化养殖场,均免疫过布病疫苗S2株,但已超过18个月。
1.2 试剂
布病阴性羊40只(20只/组),猪种布鲁氏菌S2弱毒疫苗(中牧)、Rev.1疫苗(国外小量购进)。
2 试验方法
使用布鲁氏菌S2疫苗以口服方式对羊进行免疫,使用Rev.1疫苗以滴眼方式对羊进行免疫,免疫后分别在特定时间点使用虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)对羊群抗体阳性率进行监测[5]。
3 结果与分析
应用RBT及SAT试验方法检测羊免疫后在第14、21、28、58、90、122天的血清40份,免疫后不同天数布病特异性抗体检出率见图1、图2。
3.1 S2口服免疫羊群后抗体消长规律
S2口服免疫羊群后,抗体阳性率在免疫后21 d内持续升高,随后下降,并在122 d后降到10%以下(图1)。
图1 S2疫苗口服免疫羊群抗体消长规律
3.2 Rev.1滴眼免疫羊群抗体消长规律
Rev.1疫苗滴眼免疫羊群后,抗体阳性率在免疫后14 d内持续升至100%,免疫后28 d开始下降,免疫后122 d抗体阳性率降至10%以下(图2)。
图2 Rev.1疫苗滴眼免疫羊群抗体消长规律
4 讨论
从检测方法上分析,RBT同时期检测S2免疫羊与Rev.1免疫羊,14 d时Rev.1抗体阳性率达到最高(Rev.1为100%,S2为65%)。S2免疫抗体阳性率继续小幅上升,直到21 d时达到最高值70%,此时Rev.1免疫抗体阳性率依然保持100%。随着时间的推移,S2免疫抗体阳性率开始急速下降,约58 d时免疫抗体阳性率减半(35%),而Rev.1免疫抗体阳性率一直到28 d时才出现下降趋势,并在90 d时减半(50%),此时Rev.1免疫抗体阳性率仍然大于S2的免疫抗体阳性率。而两者均在122 d时免疫抗体阳性率达到20%。
SAT同时检测S2免疫羊与Rev.1免疫羊,S2与Rev.1同在14 d检测到最高的抗体阳性率(Rev.1为100%,S2为70%)。S2最高的抗体阳性率一直持续到21 d,而Rev.1最高的抗体阳性率一直持续到28 d。S2仍在58 d免疫抗体阳性率减半(35%),Rev.1在90 d时减半(50%)。122 d时免疫抗体阳性率降至10%以下。
通过对两种检测方法比较发现,SAT检测S2与Rev.1时,14 d均能检测到最高阳性率,之后抗体阳性率均下降,RBT检测和SAT检测比较无太大差别,结合操作方法分析,RBT检测方法更简单、快速。
通过对S2株免疫与Rev.1免疫后的免疫效果比较发现,Rev.1的免疫效果高于S2,14 d时抗体阳性率100%,S2仅为70%。Rev.1抗体阳性率100%持续到28 d,而S2仅持续到21 d。122 d时,两者抗体阳性率均降至10%以下。因此Rev.1可作为绵羊布病免疫的首选疫苗。
5 结论
大规模进行羊布鲁氏菌病的免疫宜采用Rev.1滴眼方式进行,而筛选宜采用RBT检测的方式。