生津片对口干症模型大鼠唾液分泌的影响

张燚曼，冯 青，吕宏亮，王 云，于智莘

（长春中医药大学，长春 130117）

口干症是一种多以口干为主的自觉病症[1]，而其唾液分泌减少主要原因是由于分泌唾液腺体出现异常，常见口腔干燥并伴有舌部烧灼感、口唇干裂、表面结痂等[2]。临床统计显示，口干症患者以老年人居多，并且在大于65岁的老龄人群中，口干症患者的比率约为30%～40%[3-4]。由于口干症病因较为复杂，现代医学主要以局部对症治疗为主[5-6]。中医治疗口干症有养阴活血生津法、气阴双补法、调理阴阳法等[7-9]，疗效显著。生津片中主药为麦冬，具有益胃生津、滋阴润燥的功效[10]。本实验主要通过建立免疫诱导模型，观察生津片对口干症大鼠模型所致口干症的治疗作用。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂 清洁级SD大鼠（2月龄）60只，SD大鼠（8月龄）5只，雌性，由吉林大学实验动物中心提供，SCXK（吉）2009-0006。生津片，由长春中医药大学研发中心制备，弗氏完全佐剂（Sigma公司），考马斯亮蓝G-250（上海赫彭生物有限公司），卡介苗（长春生物制品研究所），小牛血清（上海依赫科技有限公司），强的松（浙江仙琚有限公司，批号：20160321）。

1.2 造模方法与分组给药 将大鼠随机分为 6 组，正常对照组（生理盐水 20 mL/kg），模型组（生理盐水20 mL/kg），生津片低、中、高12、24、36 g/（kg·d）剂量组，可的松组（0.30 mg/d）。将5只SD大鼠（8月龄），取颌下腺，将其中的组织和包膜取0.1 g 放入10 mL无菌试管中，加入氯化钠注射液2 mL，在冰水浴下匀浆，4 ℃低温离心机离心后通过考马斯亮蓝比色法对蛋白含量进行测定。将上清液加至灭菌生理盐水中配制浓度为0.4 g/L，再与弗氏完全佐剂混合，制成质量浓度为0.3 g/L乳化抗原液。于大鼠后足足趾部及两侧腹股沟注射乳化抗原，每只0.2 mL（含卡介苗3.25 g/L），同时注射百日咳疫苗，每只0.3 mL。在免疫后的第3、7、21天时，用抗原对模型组及各给药组进行二次免疫，用量与首次一致[11-14]。

1.3 检测指标

1.3.1 唾液分泌量 给药后一定时间间隔测定各组大鼠的唾液分泌量。测量前称量棉球干重，测定唾液分泌时将称重后的棉球塞至各组大鼠口颊内，3 min后称取湿重[15-18]。 湿重-干重=唾液分泌量（mg）

1.3.2 颌下腺指数的测定 首次免疫31 d后颈动脉放血处死动物，取出大鼠的颌下腺，称重，计算颌下腺指数。 颌下腺指数=颌下腺的重量（mg）/体质量（g）。

1.3.3 组织形态学观察评价（HE染色） 将大鼠颌下腺制成切片，HE染色。通过光镜观察颌下腺的病变情况[19]。病变类型共分4个等级，参照文献[20]方法评价：0分，颌下腺体正常，几乎无淋巴细胞浸润；1分，腺体稍有萎缩，并有少量淋巴细胞浸润；2分，腺体萎缩至正常形态三分之一左右，淋巴细胞轻度浸润；3分，腺体中度萎缩，腺泡部分坏死并伴有中度损伤；4分，腺体重度萎缩，腺泡完全坏死并伴有重度损伤。

1.4 统计学方法 全部数据均用SPSS 21.0统计软件进行处理。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠唾液分泌量变化比较 见表1。

表1 各组大鼠唾液分泌量变化比较（x± s ，n = 10）

2.2 各组大鼠颌下腺指数变化比较 见表2。

表2 各组大鼠颌下腺指数变化比较（x± s ，n = 10）

2.3 各组大鼠组织形态学变化比较 造模31 d时，将大鼠颈动脉放血处死，光镜下观察一侧颌下腺形态特征。结果表明，正常对照组的颌下腺无变化，淋巴细胞无浸润，腺泡正常，未见病理变化。模型组有多数腺体发生病理收缩，半数以上淋巴细胞异常且腺泡出现坏死情况。组织学评分为（2.89±0.64）分。给药中、高剂量组及强的松组腺体萎缩程度减轻，颌下腺腺体轻度萎缩，腺泡周围组织有轻度淋巴细胞浸润，3组比较，差异无统计学意义。

3 小结

生津片由党参、麦冬、山豆根、天花粉、生地黄、射干、甘草7味药组成，功能清热降燥，增液生津，能调节体内阴阳失衡，补充体内津液来源，促进口鼻等腺体分泌[21]，进而治疗口干症。

本实验采用免疫诱导法对大鼠进行造模，通过观察与唾液分泌有关腺体病理状态，检测各组大鼠唾液分泌量动态变化以及颌下腺指数变化探究生津片治疗口干症的作用机制。实验表明，与模型组相比，生津片中高剂量组能促进大鼠唾液的增加，并减轻颌下腺损伤程度，说明生津片具有治疗口干症的疗效。本实验为今后探究生津片激动受体的途径及作用位点打下基础，为进一步研究生津片涉及的信号传导通路提供了有力证据。