灵芝新品种康定灵芝选育研究*

唐明先，陈 杭，罗孝贵，何晓兰，羊玉蓉，马 薇，戴旭光，降初拉尔布

（1．甘孜州农业科学研究所，四川 康定 626000；2．四川省农业科学院土壤肥料研究所，四川 成都 610066）

灵芝（Ganoderma lucidum） 为大型药用真菌，古代医书《神农本草经》将灵芝列为上品，现代中医认为，灵芝具有强心、保肝、镇静的功效[1]。甘孜州灵芝栽培起步晚，面积小、品种单一，因市场及品种原因，迫切需要驯化选育出产量高、商品性好的新品种来促进甘孜州灵芝等食用菌产业的发展。2012年上半年，课题组走访菇农，发现了与目前市场上的灵芝品种不同的1种野生灵芝，菇农俗称为藏灵芝。调查中发现，藏灵芝市场需求量大，价格是市场赤芝或紫芝的10倍～20倍。由于菇农常年过度采摘，致使野生藏灵芝资源逐年减少，甚至面临枯竭的危险，因此为了保护这一珍稀野生资源，在四川省食用菌创新团队项目支持下，课题组从2012年上半年起开始了野生藏灵芝的驯化选育工作，以期选育出高产、优质、商品性好的藏灵芝新品种。

1 材料与方法

1.1 菌株

2012年5月8日，课题组在海螺沟景区海拔2 200 m的阔叶林下，采集到生长在青杠腐木桩上的野生藏灵芝菌株并编号。

1.2 培养基

母种培养基：PDA培养基。

原种和栽培种配方：木屑78%、麦麸20%、石膏1%、糖1%，含水量60%～65%。

1.3 组织分离

采收的子实体带回室内摊晾，通过无菌操作，提取生长点，在PDA培养基上培养，培养温度23℃～25℃，待长出菌丝后分离、纯化。

1.4 菌种的系统选育

将纯化的菌株进行ISSR聚类分析，鉴定菌株的遗传特异性。将分离、纯化的菌株进行出芝筛选试验，选择遗传稳定性高且具有优良商品性的菌株。

1.5 区域试验

2014年～2016年在泸定县田坝乡上松基地和磨西新兴点安排试验，以川芝6号作为对照，采用灵芝短段木熟料栽培方法进行栽培。供试菌株接种发菌结束后，及时覆土出芝管理，每个菌株设为1个处理，3次重复，每个重复200 kg（段木截段装袋处理）。每袋约2 kg，每小区100袋，面积6 m2。

1.6 生产试验

2015年～2016年在泸定县田坝乡上松基地进行试验，以川芝6号作为对照，采用灵芝短段木袋装熟料栽培方法进行栽培。供试菌株接种发菌结束后，及时覆土出芝管理，每个菌株设为1个处理，3次重复，每个重复2 000 kg（段木截段装袋处理）。每袋约2 kg，每小区1 000袋，面积60 m2。

2 试验结果与分析

2.1 系统选育结果

2013年将分离获得的3个菌株在袋料上接种，进行初筛试验，通过观测记录其朵型、产量等指标，最后筛选出优良菌株G31，暂定为“康定灵芝”。该菌株菌丝体无色、透明，薄壁，有隔，直径2 μm～5 μm，具分枝和锁状联合。在PDA培养基上菌丝呈白色绒毛状，纤细、整齐，菌落表面形成淡黄色韧性菌膜，子实体形成的菌盖为肾形或半圆形，菌盖大小为 （7～9） cm× （5～18） cm，厚 1．5 cm～2．8 cm。菌盖表面有同心环纹和放射性条纹，菌肉为白色，有特殊香味，味微苦；菌柄长11 cm～15 cm，直径2 cm～3 cm，组织紧密。康定灵芝特征性状详见图1、图2。

图1 康定灵芝子实体

图2 康定灵芝菌落特征

2.2 分类学鉴定

经广东省微生物分析检测中心对康定灵芝驯化栽培样品进行分子学鉴定，确认筛选出的康定灵芝菌株为白肉灵芝[2]（Ganoderma leucocontextumT．H．Li,W．Q．Deng,Dong M．Wang＆H．P．Hu）。

2.3 药效成份分析

康灵芝1号标本经四川省中医药科学院检测，检测结果显示，总灰分含量为3．42%，水溶性浸出物含量为6．94%，多糖含量为1．16%，三萜和甾醇成分含量为0．89%，经与《中国药典》2015版对比，这四类成分分别比赤芝或紫芝增加6．9%、131．3%、28．9%、78%。

2.4 产量结果

2．4．1 区域试验产量结果

康定灵芝的区域试验产量结果见表1和表2。

表1 2014年～2015年度康定灵芝与对照产量结果比较

表2 2015年～2016年度康定灵芝与对照产量结果比较

由表1和表2可以看出，不同点区域试验结果趋向一致，平均每100千克菌材干芝单产达4．36kg，与川芝6号（CK） 相比增产差异明显，增产幅度达13．1%。

2．4．2 生产试验产量结果

康定灵芝的生产试验产量结果见表3。

表3 康定灵芝生产试验与对照产量结果比较

由表3可以看出，每100千克菌材康定灵芝菌株单产达4．04 kg，比菌株川芝6号（CK） 平均增产10．7%，增产效果显著。

2.5 主要农艺性状分析

康定灵芝的主要农艺性状比较结果见表4。

由表4可以看出，康定灵芝与川芝6号（CK）相比，新鲜的康定灵芝子实体个体较大，出芝整齐，形态美观，朵型为肾形或半圆形，菌肉白色，有特殊香味，味微苦，发菌期153 d左右，每100千克菌材生产干芝4．04 kg，孢子粉弹射较强。

表4 康定灵芝与CK的主要形态特征及农艺性状比较

2.6 适应地区和栽培技术要点

适宜种植区域为川西高原，海拔1 500 m～2 500 m。栽培原料的主料为壳斗科栎属青杠段木，辅料为麦麸。大田覆土栽培。出芝期间温度控制在18℃～30℃，空气相对湿度85%～90%，光照强度1 000 lx～15 000 lx，通风良好，保持空气清新。泸定县自然条件下接种时间适宜安排在11月～12月，下地覆土出芝时间为次年4月下旬。

3 结论

康定灵芝属于白肉灵芝，该菌株子实体为肾形或半圆形，菌盖表面具同心环纹和放射性条纹，幼嫩子实体有漆样光泽，成熟子实体皱褶，黄褐色，菌肉白色，有特殊香味，味微苦，组织紧密。其菌丝体生长温度8℃～34℃，最适生长温度22℃～25℃；子实体形成和发育温度18℃～30℃，最适温度23℃～25℃，发菌期153 d左右。多点试验结果表明，该菌株出芝整齐、农艺性状稳定，每100千克菌材干芝单产达4．04 kg，比对照菌株川芝 6号增产10．7%。同时，其功能成分含量较高，是不同于现有栽培品种的灵芝新菌株。2016年12月31日获得四川省农作物品审委品种审定证书，定名康定灵芝，品种审定编号为川审菌2016002。