4种常用水产药物对大鳞鲃的急性毒性试验

于振海，朱永安，孟庆磊，朱树人，王锡荣

( 山东省淡水渔业研究院，山东省淡水水产遗传育种重点实验室，山东 济南 250013 )

大鳞鲃(Barbuscapito)属鲤科、鲃亚科、鲃属，体质量可达5～10 kg，具有耐盐碱、食性广、生长速度快、肉质鲜美、抗逆性强等优良特性[1-5]。大鳞鲃主要分布于西亚的里海和咸海水域，是当地名贵的大型经济鱼类之一，为促进盐碱水域的开发和利用，2003年引入我国，旨在增加内陆盐碱地水域的养殖种类。

大鳞鲃为引进种，在我国养殖的时间较短，关于大鳞鲃疾病的报道极少，仅有2016年天津天祥水产有限公司出现的不明原因极度贫血而大量死亡的个例[6]。大鳞鲃虽未出现大规模疾病爆发，但对于疾病应防重于治。随着大鳞鲃人工繁育技术成熟，养殖规模逐渐扩大，苗种的抗病力低于成鱼，更易染病。药物防治病害是有效且经济的方法[7]。针对鱼类常见的锚头鳋(Lernaea)、中华鳋(Sinergasilus)、车轮虫、指环虫、线虫幼体等寄生虫性疾病和弧菌(Vibrio)、嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)、爱德华氏菌(Edwardsiella)等细菌引起出血、烂鳃、疖疮、腐皮等细菌性疾病，笔者选用阿维菌素、敌百虫作为抗寄生虫药物，选用聚维酮碘、三氯异氰尿酸作为杀菌药物[8]，通过急性毒性试验确定药物的安全用量和毒性等级，为大鳞鲃养殖中合理用药、安全用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用鱼体长(17.9±1.6) cm、体质量(63.4±19.3) g，试验前在试验条件下暂养3 d，日投喂1次。试验开始前24 h停食，选游泳活泼，无病、无伤、无畸形的鱼进行试验。试验用药分别为阿维菌素、聚维酮碘、三氯异氰尿酸和敌百虫，药品规格及生产厂家等见表1。

表1 4种试验药物的规格与成分

1.2 方法

2017年6月，采用静态试验法[9]，在80 cm×60 cm×45 cm、容水100 L的白色塑料箱内放鱼10尾，进行试验。每个周期4 d。试验用水为池塘养殖用水，水质符合渔业水质标准(GB 11607—89)，水温(24.1±1.5) ℃、pH 8.41±0.12、溶解氧(6.1±0.9) mg/L。每日测1次水温、pH、溶解氧含量。试验期间不投饵。

先采用静态方式进行预试验，每个预试验质量浓度组放入5尾鱼，不设平行组，持续48～96 h。每日至少记录2次各容器内的死亡鱼数，并及时取出死亡个体。

根据预试验结果，参照《水和废水监测分析方法》[10]，每种药物设5个梯度组(表2)和一个空白对照组，每个梯度组设2个平行。溶液调节至相应质量浓度后，从驯养鱼群中随机取出试验鱼迅速放入各试验容器中。试验鱼在20 min内分组完毕。

24、48、72、96 h后检查试验鱼状况，以试验对象失去活力、对外界刺激无反应为死亡标准[11]。试验开始后8 h连续观察各处理组鱼的状况，记录24、48、72 h和96 h的死亡数，记录异常行为，及时清除死鱼。

1.3 数据处理

半致死质量浓度(LC50，mg/L)、安全质量浓度(SC，mg/L)[12]按下式计算:

logLC50=xm-d(∑ωB-0.5)

SC=ρ1×0.3/(ρ2/ρ1)2

式中，xm为死亡组最大剂量的对数，d为相邻质量浓度的对数差，ωB为各组的死亡率(%)，∑ωB为各组死亡率之和(%)；ρ1为48 h半致死质量浓度(mg/L)；ρ2为24 h半致死质量浓度(mg/L)。

2 结 果

整个试验过程中，对照组大鳞鲃无死亡。阿维菌素、聚维酮碘、三氯异氰尿酸和敌百虫药物组大鳞鲃的毒性结果见表2。

2.1 阿维菌素试验结果

阿维菌素急性中毒的大鳞鲃，少动，对外界刺激反应迟钝，游动时身体会失去平衡。阿维菌素质量浓度为1.496～5.000 mg/L的试验组，随着质量浓度的增加，大鳞鲃的死亡率也逐渐增大。对照组和质量浓度为1.000 mg/L试验组未见非正常现象，二者96 h死亡率均为0；当质量浓度为5.000 mg/L时，约6 h出现死亡，24 h死亡率为100%。阿维菌素对大鳞鲃的24、48 h和96 h的半致死质量浓度分别为3.340、2.840 mg/L和2.621 mg/L，安全质量浓度为0.616 mg/L(表3)。

表2 4种药物对大鳞鲃的致死率

2.2 聚维酮碘

在聚维酮碘质量浓度为17.800～100.000 mg/L组中大鳞鲃反应迟钝，游泳能力和呼吸能力减弱，最后死亡，而且随聚维酮碘质量浓度的升高，死亡率也逐渐升高，而对照组和质量浓度为10.000 mg/L试验组未出现不正常现象。100.000 mg/L试验组的24 h死亡率为100%。聚维酮碘对大鳞鲃的24、48 h和96 h半致死质量浓度分别为74.967、63.077 mg/L和50.106 mg/L，安全质量浓度为13.397 mg/L(表3)。

2.3 三氯异氰尿酸试验结果

在三氯异氰尿酸质量浓度为10 mg/L组中，约10 min大鳞鲃浮在上层，吞食空气，类似浮头现象，游泳动作缓慢，约20 min失去平衡，腹部朝上，对外界刺激反应迟钝，约30 min开始死亡。质量浓度5.623 mg/L组大鳞鲃24 h死亡率达到90%，48 h和96 h的死亡率均为100%。三氯异氰尿酸对大鳞鲃的24、48 h和96 h的半致死质量浓度分别为4.466、3.758 mg/L和3.548 mg/L，安全质量浓度为0.798 mg/L(表3)。

2.4 敌百虫试验结果

在敌百虫质量浓度为0.356～2.000 mg/L试验组中，大鳞鲃不安地乱窜，时而箱底时而浮上水面，后期扭曲翻滚，抖动，最后死亡。试验组的药品质量浓度与大鳞鲃的死亡率呈正相关，对照组和质量浓度为0.200 mg/L组未出现非正常现象，96 h死亡率为0，质量浓度2.000 mg/L试验组24 h死亡率为100%。敌百虫对大鳞鲃的24、48 h和96 h的半致死质量浓度分别为1.191、1.061 mg/L和0.709 mg/L，安全质量浓度为0.253 mg/L(表3)。

表3 4种药物的的半致死质量浓度及安全质量浓度

3 讨 论

3.1 4种药物毒性评价

半致死质量浓度是衡量药物对试验对象毒性的指标，其值越小，药物毒性越大；其值越大，毒性越低[13-14]。以96 h半致死质量浓度为鱼类急性毒性分级标准，分为极高毒(<1 mg/L)、高毒(1～10 mg/L)、中毒(10～100 mg/L)和低毒(>100 mg/L)4个等级[10]。本试验中4种药物对大鳞鲃的96 h半致死质量浓度为聚维酮碘>三氯异氰尿酸>阿维菌素>敌百虫，按照药物对其毒性依次为敌百虫>阿维菌素>三氯异氰尿酸>聚维酮碘。本试验结果表明，敌百虫对大鳞鲃是极高毒药物，三氯异氰尿酸和阿维菌素是高毒药物，聚维酮碘是中毒药物。4种药物对大鳞鲃的半致死质量浓度呈24 h半致死质量浓度>48 h半致死质量浓度>96 h半致死质量浓度(表3)，说明随时间的延长，4种药物对试验鱼的毒性效应相应增加。

3.2 4种药物用药安全性

阿维菌素对锚头鳋、中华鳋、纤毛虫、指环虫和线虫等寄生虫均有极强的驱杀作用，广泛应用于水产动物体内外寄生虫病的防治[15]。周帅等[16]评价了阿维菌素水乳剂对鲢鱼(Hypophthalmichthysmolitrix)、异育银鲫(Carassiusauratusgibelio)、草鱼(Ctenopharyngodonidellu)的安全性和药效，表明该制剂可有效防治锚头鳋、中华鳋等寄生虫病。阿维菌素常用量为0.037～0.045 mg/L，本试验中阿维菌素的安全质量浓度为0.616 mg/L，高于常用量，说明阿维菌素能够用于大鳞鲃寄生虫疾病的防治。

聚维酮碘又名聚乙烯吡咯烷酮碘，对鱼体无刺激性，体表存留时间较长，可保持长久的抑菌杀菌能力，促进鱼类皮肤机械损伤愈合，为广谱、高效消毒杀菌剂，防治水产动物烂鳃、疖疮、腐皮等细菌性疾病的效果很好，是水产养殖中广泛使用的消毒杀菌剂[17]。聚维酮碘常用量为0.03～0.04 mg/L，本试验中聚维酮碘的安全质量浓度为13.394 mg/L，高于同为鲃亚科的光倒刺鲃(Spinibarbushollandi)的10.3 mg/L[18]，也远高于常用量，在大鳞鲃养殖过程中可作为消毒杀菌剂使用，也可作为浸泡药物治疗细菌性疾病。

三氯异氰尿酸水解生成次氯酸,具有稳定杀菌作用，是生产上用以防治细菌性疾病的常用药物，常用量为0.4～0.5 mg/L[19]。孙翰昌等[19]研究发现，三氯异氰尿酸对中华倒刺鲃(S.sinensis)的安全质量浓度为0.53 mg/L，虽易刺激鱼体，但可用于鱼病防治。本试验中，三氯异氰尿酸的安全质量浓度为0.798 mg/L，药品的有效成分为50%(有效氯计)，因此三氯异氰尿酸的安全质量浓度为0.399 mg/L，略低于常用量，高于光倒刺鲃的0.05 mg/L[18]。大鳞鲃和光倒刺鲃异氰尿酸反应强烈，建议生产中谨慎使用三氯异氰尿酸。

敌百虫为胆碱酯酶抑制剂，能将胆碱酯酶的活性点磷酸化而抑制其活性。敌百虫在鱼体内残留量少、残留时间短而被广泛用于防治体外寄生甲壳类、单殖吸虫及部分肠内寄生蠕虫，常用量为0.2～0.5 mg/L[20]。敌百虫对光倒刺鲃的安全质量浓度为1.1 mg/L[18]，对中华倒刺鲃安全质量浓度为0.164 mg/L[20]，对黑脊倒刺鲃(S.caldwelli)安全质量浓度为50 mg/L[21]。试验中敌百虫的安全质量浓度为0.253 mg/L，介于常用量之间，因此敌百虫可以作为大鳞鲃的疾病防治药物。水产药物对鱼类的急性毒性因鱼的种类、规格而异，对药物的安全质量浓度也不同[22]。

生产中，药物的毒性往往受水温、水质、pH、各种水生生物和有机物等诸多因子影响。例如，敌百虫是极高毒农药，在碱性条件下可水解成毒性增加10余倍的敌敌畏[23]。除了从药物的半致死质量浓度和安全质量浓度上考虑，在生产中选用药物还需结合药物的常用量、用药时间及用药环境综合考虑，同时密切观察鱼的活动情况，防止鱼类中毒。