1例人类免疫缺陷病毒感染早期人类免疫缺陷病毒抗体检测的动态变化

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）初筛实验室应具备较高的敏感性，尽可能早期发现HIV抗体阳性者，确证实验具备较高的特异性，保证HIV感染诊断的准确性。但是，由于检测方法及试剂的不同，可能导致检测结果出现假阳性或假阴性。

1 临床资料

患者，男，20岁，于2016年8月27日以“发热20余天，加重伴咳嗽、咳痰4 d”为主诉入大连医科大学附属第一医院。患者20余天前无明显诱因出现发热，体温最高可达39.5 ℃，发热多于夜间出现，伴头痛、大汗，为求诊治于开发区医院就诊，给予相应对症治疗后效果不明显，后患者因学业缘故未继续就诊，在校期间仍存在发热，并于4 d前出现咳嗽、咳痰等症状。咳嗽为间断性，咳痰为白色黏痰，为求诊治就诊于大连市第五人民医院，完善相关检查后，建议患者转入我院治疗。既往史：既往鼻窦炎4个月，否认肝炎、结核、疟疾病史，间断吸烟3年，否认家族遗传病、传染病史。

入院查体：体温37.9 ℃，心率84次/min，呼吸22次/min，血压120/80 mmHg。神志清醒，精神萎靡，查体基本合作，全身皮肤未见黄染及出血，淋巴结未触及肿大，头颅未见明显异常，双肺呼吸音稍粗，未闻及肺部其他分布杂音及胸膜摩擦音。余查体无阳性体征。急诊检查：（1） 白细胞19.38×109/L、中性粒细胞比例为22.8%、淋巴细胞比例为67.7%；（2） 谷丙转氨酶145 U/L、谷草转氨酶189 U/L、肌酸激酶42 IU/L、钠离子136 mmol/L、白球比1.07；（3） 肺炎支原体阳性；（4） 胸部CT未见明显异常，脾脏增大。初步诊断：（1） 发热待查 （支原体肺炎可能性大）；（2） 脾大待查；（3） 急性肝功能损伤；（4） 电解质紊乱、低钠血症。诊疗计划：患者此次支原体感染可能性大，但同时不能排除病毒感染，继续完善相关检查，并给予对症治疗。

免疫室血清检验结果显示，8月28日HIV抗体无反应性 （3代A厂家） ，因本例患者临床疑似诊断获得性免疫缺陷综合征，且流行病学调查承认有过男男性行为。检验科再次用3代B厂家重新检测，结果为有反应性，乳胶法 （定性） 结果为阳性。确证试验为HIV抗体不确定。针对此病例本实验室追踪检测结果见表1，复检实验结果见表2。

9月4日重新采血，检测HIV抗体筛查阳性。确证结果只有2条特异性条带gp160和p24，报告HIV抗体不确定，建议半个月复查。将此标本做核酸定量检测显示1.45×106IU/mL，结果为阳性。

2 讨论

追踪检测结果（表1）显示，8月初筛结果一阴一阳，9月确证结果为HIV抗体不确定，9月核酸定量结果为阳性，10月确证结果带型已出现3条带，据此推断该病例为HIV早期感染者［1］，属HIV-1型p24抗原阳性的“窗口期”病例。初筛试验阳性而确证试验不确定结果的主要原因是HIV早期感染和非特异性反应［2］。

表1 追踪检测结果

表2 应用第4代试剂追踪复检结果

目前，国内检测HIV抗体最常用的检测方法有酶联免疫吸附法、快速检测、免疫印迹试验及核酸检测等。由于其敏感性不同，造成了试剂检测“窗口期”的不同，易造成漏检现象。针对本病例8月第1份标本初筛试验A厂家ELISA阴性结果，S/CO值0.28呈浅黄色。按照《全国艾滋病检测技术规范》“使用抗体检测试剂的抗体筛查检测流程”试剂1无反应，应报告HIV抗体阴性。但与临床诊断不符，随即再用B厂家试剂盒进行复查实验，S/CO值7.738，报告HIV抗体有反应性，同时应用金标快速检测法复检阳性。呈现出两厂家试剂检测结果不一致的情况，排除实验操作过程的误差，两厂家重复检验检测结果分别为A厂家S/CO值0.46，呈浅黄色，按照判定标准仍为HIV抗体阴性。B厂家S/CO值6.338，按照判定标准仍为抗体阳性。分析其原因，由于不同厂家生产的初筛试剂其抗原成分、生产工艺、判定标准等均可能不同，试剂的灵敏度及特异性会有所差异，可造成检测结果的差异。本文追踪比较了第3代A厂家和第3代B厂家初筛结果，该病例前者的S/CO值均低于后者，这可能与抗原包被比较多样，但纯度相对低，因此相对敏感性低有关［3］。

笔者应用第4代ELISA试剂和化学发光法抗原抗体联合检测试剂将标本做了相应的追踪复检实验，检测结果均为阳性。因优于第3代HIV抗体试剂的灵敏度，第4代试剂的优势是抗原抗体联合检测，较单纯的抗体检测可缩短“窗口期”约5～7 d［4］。所以，在应用第3代HIV抗体试剂进行初筛试验时，在某一厂家HIV抗体检测试剂测定结果可疑阳性时应及时用另一种厂家的试剂或另一种方法学试剂进行复检，或应用第4代试剂进行初筛，以弥补不同试剂灵敏性差异的缺陷。对不确定或可疑的检测结果不应轻易报告阴性，要及时与临床沟通了解病史、临床表现以及流行病学调查结果，采用不同厂家试剂和不同方法学试剂进行复检。无论何种方法初筛有反应性，均要进一步用蛋白印迹法或核酸检测进行补充试验。建议有条件的实验室尽早应用核酸检测，对患者早期确诊、早期治疗。本实验室将根据《全国艾滋病检测技术规范》应用化学发光4代检测试剂进行初筛实验，再应用第3代ELISA或乳胶法进行抗体检测复检。最终初筛阳性病例送往疾控中心进行确证实验。此方法能更早期初筛出p24抗原阳性患者，缩短窗口期，有利于早期筛查诊断。本报道仅为个案例，初筛试剂之间的差异与检测流程的差异还有待于进一步全面评估。