血小板参数在判断慢性丙型肝炎RNA水平中的价值

张 夏，杜丹丹，翟志敏，郭进京

持续的丙肝病毒(hepatitis C virus ，HCV)感染引起的丙型肝炎易导致肝脏纤维化，进而发展成肝硬化，约20%患者转化为肝癌(hepatocellular carcinoma ，HCC)[1]。肝炎患者有较高的血小板减少的发生率，由于肝炎病毒感染和血小板的减少密切相关，美国血液学会免疫性血小板减少性紫癜诊疗指南推荐长期血小板减少的的患者，应常规检测肝炎病毒[2]。该研究旨在分析丙型肝炎患者RNA的载量和血小板相关参数的关系，为临床治疗方案的选择、病情疗效监测提供一定的参考依据。

1 材料与方法

1.1病例资料回顾性分析2014年1月～2016年12月阜阳市人民医院住院期间检测出丙肝抗体阳性并做丙肝RNA检测的患者78例。其中男32例，女46例，年龄21～82岁，中位年龄54岁，排除能引起三系减低的血液系统疾病及病例资料不完全的患者。按照参考文献[3]HCV-RNA载量高低分为三组：<500 IU/ml定义为HCV-RNA阴性组，500～105IU/ml定义为低载量组，≥105IU/ml为高载量组，低载量组和高载量组定义为HCV-RNA阳性组。

表1 HCV-RNA阴性组和HCV-RNA阳性组各血小板参数的比较

表2 低载量HCV-RNA组和高载量HCV-RNA组各血小板参数的比较

1.2试剂和仪器血小板计数(platelet count，PLT)，血小板分布宽度(platelet distribution width，PDW)，平均血小板体积(mean platelet volume，MPV)及血小板压积(platelet volume，PCT)由BC-6800血细胞分析仪测试，仪器及配套试剂均购自中国深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；HCV-RNA载量由LineGeneⅠ基因扩增仪检测，其配套检测试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司。

1.3方法以乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝用于血小板参数检测，HCV-RNA载量采用RT-PCR法，严格按照实验室标准操作程序(SOP)规范操作完成各参数测试。

2 结果

2.1HCV-RNA阴性组和HCV-RNA阳性组血小板参数的比较HCV-RNA阴性组和HCV-RNA阳性组相比年龄差异无统计学意义，有可比性。与HCV-RNA阴性组比较，HCV-RNA阳性组PLT和PCT水平明显减低，PDW和MPV水平明显增高(P<0.01)，见表1。

2.2血小板的PLT、PDW、MPV、PCT参数判断HCV-RNA阴性情况由于PDW、MPV和HCV-RNA阴性呈负相关性，故在做ROC曲线时，取其倒数。PLT判断HCV-RNA阴性的ROC曲线下面积(area under curve，AUC)为0.903(95%CI：0.837～0.970，P<0.001)；PDW判断HCV-RNA阴性的ROC曲线的AUC为0.847(95%CI：0.763～0.913，P<0.001)；MPV判断HCV-RNA阴性的ROC曲线的AUC为0.888(95%CI：0.817～0.960，P<0.001)；PCT判断HCV-RNA阴性的ROC曲线的AUC为0.821(95%CI：0.792～0.913，P<0.001)。见图1。

图1 PLT、PDW、MPV、PCT判断HCV-RNA阴性的ROC曲线

图2 PLT、PDW、MPV、PCT和HCV-RNA载量的线性分析

2.3HCV-RNA阳性组中HCV-RNA低载量组和HCV-RNA高载量组血小板的PLT、PDW、MPV、PCT参数的比较低HCV-RNA载量组和高HCV-RNA载量组相比年龄差异无统计学意义，有可比性。与高HCV-RNA载量比较，低HCV-RNA载量组有着更高的PLT和PCT水平，差异有统计学意义(P=0.001,P=0.005)，同时低HCV-RNA载量组有着更低的PDW和MPV水平，差异有统计学意义(P=0.028,P=0.047)，见表2。

2.4HCV-RNA载量和血小板的PLT、PDW、MPV、PCT参数相关性分析以HCV-RNA载量科学计数法数量级为自变量，血小板的PLT、PDW、MPV、PCT参数分别为因变量，在53例HCV-RNA阳性的患者中，与HCV-RNA载量呈正相关且有统计学意义的参数为MPV(r=0.306,P=0.026)，呈负相关且有统计学意义的指标有：PLT(r=0.493，P<0.001)、PCT(r=0.444，P=0.001)。PDW和HCV-RNA载量相关性分析无统计学意义(r=0.258,P=0.063)。见图2。

3 讨论

血小板是血细胞中最小的细胞，其大小数量及分布宽度与骨髓中巨核细胞的增生速度、代谢情况、促血小板生成素等因素有关[4]。血小板相关参数PLT、PDW、MPV、PCT可反应血小板的生成及功能状态。PDW反应血小板体积大小的离散程度。MPV即血小板平均体积，MPV增大，提示血小板内致密颗粒增多，是巨核细胞增生及血小板活化的标志，可辅助鉴别血小板减低的原因及评估骨髓造血功能；其增高和骨髓受到抑制、血小板破坏过多、机体高代偿状态有关，与PLT呈负相关。PCT可间接反应血小板活性物质及所含颗粒的多寡，与PLT呈正相关性[5]。丙肝病毒感染除引起肝脏的损害，也能引起肝外组织的损伤[6]，肝炎患者有较高的血小板减低的发生率，研究[7]表明HCV比HBV更易发生血小板的减低。其引起血小板减低的机制可能如下：HCV感染可导致全身免疫系统的紊乱，产生自身抗体导致血小板的破坏[8]；慢性HCV感染患者往往伴有不同程度的脾功能亢进，尤其是发生肝硬化时，脾功能亢进时能分泌某些激素，影响骨髓的造血同时加速血细胞的破坏[9]；血小板生成素由主要由肝细胞合成，HCV感染所致的肝功能受损会导致血小板生成素水平的下降，进一步加速血小板的减少和影响巨核细胞的分化[10]；此外，丙肝病毒对骨髓的抑制作用和血管内皮功能障碍也可导致血小板减少[11]。

丙肝病毒感染主要依赖血清学抗体的检测，但由于“窗口期”使得抗体检测有一定的假阴性的可能，另一方面丙肝抗体阳性不代表病毒是否复制，而HCV-RNA的检测是诊断丙肝是否复制的有力证据，其载量的高低和肝功能的损伤程度有一定的相关性。本研究证明PLT和PCT水平的减低、PDW和MPV的增高在判断HCV-RNA是否阴性的ROC AUC均大于0.5，对HCV-RNA是否复制的判断有着积极的意义，同时本研究也证实上述4个参数在判断HCV-RNA载量的高低中也有一定的预测价值，与HCV-RNA载量的线性分析提示除PDW外，PLT、MPV、PCT水平均和HCV-RNA载量的高低相关。血小板参数是血常规中的常规检测项目，经济、简便、易得是其特点，在有些无分子生物学实验室的地方，血小板4个参数可作为辅助判断丙肝病毒复制和病毒载量高低。临床医师在抗病毒治疗的同时动态监测丙肝患者血小板水平及其参数能更有效的判断病毒复制的严重程度，及时为患者制定最佳的治疗方案，同时和HCV-RNA载量监测相互补充。