血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9、亲环素A与冠心病影响因素及冠状动脉病变的关系

潘广杰 李松森 陈 艳 陈绘丽 梁 爽

(郑州大学附属洛阳中心医院心血管内科，河南 洛阳 471000)

冠心病(CHD)发病机制仍是近年来国内外临床研究的重点〔1，2〕。前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9作为一种丝氨酸蛋白酶，可能直接参与CHD发生发展，PCSK9抑制剂或可作为CHD治疗药物处于研发过程〔3〕。亲环素(Cyp)A作为一种炎症蛋白在动脉粥样硬化斑块中大量表达，提示CypA可能参与了CHD患者动脉粥样硬化斑块的形成过程〔4〕。本课题分析血清PCSK9、CypA水平与CHD影响因素及冠状动脉病变程度的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 经院内伦理委员会同意，选取2013年4月至2016年2月洛阳中心医院治疗的106例因胸痛或胸闷且经冠状动脉造影确诊的CHD患者为研究组，男69例，女37例，年龄56～79岁，平均(73.5±12.4)岁。同期健康体检志愿者34例为对照组。两组年龄、体重指数(BMI)及性别比差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2排除标准 合并扩张型心肌病、风湿性心脏病；6个月内有急性心肌梗死及脑血管意外发作史；存在严重的肝、肾、脑和内分泌功能障碍，严重的心功能不全；合并感染、肿瘤或免疫系统疾病；3个月内接受过降脂、降压或降糖治疗。

1.3CHD影响因素及判断标准 收集性别、BMI、是否存在高血压、糖尿病、是否吸烟、是否存在冠心病家族史和高血脂。BMI<24.0 kg/m2为正常，24.0～27.9 kg/m2为超重，≥28.0 kg/m2为肥胖。吸烟史：烟龄5年，每日平均吸烟≥10支，既往有规律吸烟史，但现在已戒烟<6个月者视为吸烟。CHD家族史：患者一级亲属中有CHD，包括有心绞痛、心肌梗死和曾经行冠脉搭桥或介入手术。高血脂：胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白(LDL)任何一项升高者为血脂异常。

1.4CHD病变 CHD病变范围：冠脉受累、单支、双支、三支〔4〕。CHD狭窄程度：以美国心脏病学会和美国心脏病学院指南为诊断标准，主要冠状动脉左主干、左前降支、左回旋支或右冠状动脉单支或以上管腔直径狭窄≥50%诊断为CHD，依狭窄程度分类：狭窄<50%为轻度狭窄，狭窄50%～74%为中度狭窄，狭窄75%～99%为重度狭窄，狭窄100%为闭塞病变〔5〕。

1.5血清PCSK9、CypA的检测 收集清晨空腹静脉血3 ml，置于普通试管中，离心得分离血清，检测血清PCSK9和CypA，检测采用双抗夹心酶联免疫吸附法，试剂盒由上海朗顿生物科技有限公司提供。

1.6统计学方法 采用SPSS20.0统计软件进行t、χ2、单因素方差分析、Spearman相关分析。

2 结 果

2.1血清PCSK9、CypA水平与CHD影响因素的关系 影响CHD的各种因素中，高血压、糖尿病和高血脂者PCSK9和CypA水平显著高(P<0.05)，性别、体重指数、是否吸烟和存在CHD家族史对PCSK9和CypA水平影响不大(P>0.05)，见表1。

表1 血清PCSK9、CypA水平与CHD影响因素的关系

2.2血清PCSK9、CypA与冠状动脉病变的关系 随着冠状动脉病变范围和冠状动脉狭窄程度的增大，血清PCSK9和CypA明显增高(P<0.05)，见表2。

表2 血清PCSK9、CypA与冠状动脉病变的关系

3 讨 论

CHD是多个危险因素影响的疾病，大量研究显示CHD的危险因素有性别、BMI、是否存在高血压、糖尿病、是否吸烟、是否存在CHD家族史和高血脂等〔5〕。

PCSK9是一种前蛋白转化酶，其基因突变可导致严重的家族性高胆固醇血症。PCSK9作为一种分泌性蛋白存在于血液中，本课题结果显示PCSK9一定程度可用于评估CHD患者代谢状况，其解释可能有以下几点〔3，6～11〕：①PCSK9可通过功能获得性基因突变方式增强降解LDL受体(LDLR)的能力，从而使血脂尤其是LDL胆固醇(LDL-C)不能有效清除而升高；②当颈动脉血流速度降低，血流剪应力也显著降低，血流剪应力异常处的氧化应激明显增加，血管内皮细胞及平滑肌细胞PCSK9表达增加(平滑肌细胞是唯一表达和分泌活性PCSK9 的血管细胞)，该部位更容易形成动脉粥样硬化，促进血管狭窄，在人动脉粥样斑块中可检测到PCSK9表达，同时PCSK9在糖尿病患者动脉粥样硬化发生过程还起着长期的贡献作用；③PCSK9参与血管壁炎症反应，促进血管内皮细胞及单核巨噬细胞的凋亡。PCSK9 siRNA可有效抑制清道夫受体CD36表达及氧化型LDL诱导的人外周血单核细胞系(THP)-1源性巨噬细胞及脐静脉内皮细胞凋亡。

CypA属于高度保守的蛋白质，在生物界广泛存在，生物学功能及活性多种多样。与PCSK9相似，本课题结果显示CypA在预测CHD的病变程度方面具有重要价值，原因在于〔4，8，12～14〕：①CypA能趋化并活化炎性细胞，趋化中性粒细胞、单核/巨噬细胞、T淋巴细胞等聚集于炎症反应部位，将上述炎性细胞活化所产生多种炎性因子如白细胞介素(IL)-8、IL-6、基质金属蛋白酶(MMPs)、肿瘤坏死因子(TNF)-α等用于加强血管内皮的炎症反应，例如MMP-9可以破坏血管内皮完整性，为炎性细胞浸润、迁移提供一定基础，形成动脉粥样硬化斑块；②CypA诱导血管壁的巨噬细胞大量摄取氧化LDL转化为泡沫细胞，沉积在血管壁，为CHD发生提供脂类物质基础；③CypA还可以通过激活细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、蛋白激酶B(Akt)、非受体酪氨酸激酶(JAK)通路促进血管平滑肌细胞的增殖和迁移，血管平滑肌细胞从中膜迁移入内膜，在内膜增殖和分泌细胞基质成分，参与血管狭窄和动脉粥样硬化过程，进一步的研究也提示血清CypA水平还可作为糖尿病患者血管炎症病变程度的指标。

本课题局限在于标本数量较少，女性受试者以绝经后女性为主，绝经后女性雌激素分泌减少，是否对PCSK9或CypA水平产生影响，仍需要进一步研究。