免疫组织化学检测在乳腺病理疾病中的临床诊断作用和准确度探讨

杨丽英　朱杰

【摘要】 目的：探討免疫组织化学检测在乳腺病理疾病中的临床诊断作用和准确度。方法：选取2010年7月-2017年12月在本院就诊的乳腺癌患者50例为恶性组和乳腺良性增生患者50例为良性组，其中乳腺癌或良性增生患者标本组织中所带的正常乳腺组织者50例为对照组。三组均接受乳腺穿刺活检或外科手术切除，采集乳腺组织标本。采用免疫组织化学染色技术对组织标本进行染色处理，分析乳腺癌的巨检、镜检、免疫组织化学检测结果，分析各免疫组化检测指标对乳腺癌的诊断准确率，比较三组CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67、PTEN检测结果，分析不同免疫组化检测指标与乳腺癌的相关性。结果：乳腺癌巨检可见肿瘤切面为灰黄色或灰白色，存在边界不清晰的实性区，部分切面可见黄色坏死物；镜检可见乳腺癌细胞呈不规则分布，细胞形态多样，细胞质较少，细胞核级别低，极少核分裂现象，细胞周围可见胶原化或成纤维母细胞增生；免疫组化检测结果显示，50例乳腺癌患者中，CK5/6（+）、CK34βE12（+）、EGFR（+）、HER-2（+）、P16（+）、P63（+）、Ki67（+）、PTEN（-）分别为48、41、45、44、39、40、42、17例，其诊断准确率分别为96%、82%、90%、88%、78%、80%、84%、34%；恶性组CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67阳性率均高于良性组、对照组，PTEN阴性率均低于良性组、对照组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）；而良性组与对照组免疫组化检测指结果比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；经相关性分析，CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67的阳性表达与乳腺癌呈正相关（P<0.001），而PTEN阳性表达与乳腺癌呈负相关（P<0.001）。结论：免疫组织化学检测可对不同乳腺病变予以准确鉴别区分，可将免疫组化指标CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67、PTEN等作为乳腺癌生物学行为的辅助判断指标。

【关键词】 乳腺癌； 诊断； 免疫组织化学

Clinical Diagnostic Value and Accuracy of Immunohistochemical Detection in Breast Pathological Diseases/YANG Liying，ZHU Jie.//Medical Innovation of China，2018，15（13）：010-013

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical diagnostic value and accuracy of immunohistochemistry in breast pathological diseases.Method：A total of 50 patients with breast cancer admitted to our hospital from July 2010 to December 2017 were selected as malignant group and 50 patients with benign breast hyperplasia as benign group，among them，50 cases of normal mammary gland organizer in breast cancer or benign hyperplasia as control group.They underwent breast biopsy or surgical resection，and breast tissue samples were collected.Immunohistochemical staining was used to stain the tissue specimens，the results of giant，microscopic and immunohistochemical detection of breast cancer were analyzed，the diagnostic accuracy of each immunohistochemical detection index for breast cancer was analyzed，the detection results of CK5/6，CK34βE12，EGFR，HER-2，P16，P63，Ki67，PTEN were compared between three groups，the correlation between immunohistochemical markers and breast cancer.Result：There was a lack of clear boundary of breast tissue sections in mammary cancer giant examination，and there was no capsule in tumor tissue，the section was gray yellow or gray white，and there were solid areas.Microscopic examination showed that breast cancer cells were irregular in distribution，various in morphology，few in cytoplasm，low in nuclear grade，few in mitosis，collagenization or proliferation of fibroblasts around the cells.The results of immunohistochemical detection showed that in 50 cases of breast cancer，CK5/6（+），CK34βE12（+），EGFR（+），HER-2（+），P16（+），P63（+），Ki67（+），PTEN（-） were 48，41，45，44，39，40，42 and 17 cases respectively，the diagnostic accuracy was 96%，90%，88%，88%，78%，96% respectively.The positive rates of CK5/6，CK34βE12，EGFR，HER-2，P16，P63 and Ki67 in malignant group were all higher than those of benign group and control group，the negative rate of PTEN was lower than that of benign group and control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The each result of immunohistochemical examination in benign and control groups were compared，the differences were not statistically significant（P>0.05）.By correlation analysis，the positive expression of CK5/6，CK34βE12，EGFR，HER-2，P16，P63 and Ki67 were positively correlated with breast cancer（P<0.001），but the positive expression of PTEN was negatively correlated with breast cancer（P<0.001）.Conclusion：Immunohistochemical examination can be used to distinguish the different breast lesions accurately，and the immunohistochemical index CK5/6，CK34βE12，EGFR，HER-2，P16，P63，Ki67，PTEN and so on may be used as an auxiliary index to judge the biological behavior of breast cancer.

【Key words】 Breast cancer； Diagnosis； Immunohistochemistry

First-authors address：The First Peoples Hospital of Honghe Prefecture，Mengzi 661199，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.13.003

乳腺癌属于常见恶性肿瘤，在女性人群中发病率较高，其发病机制尚未明确，但其对广大女性的身体健康造成损害，故临床上需对其进行早期诊断和治疗[1-2]。免疫组织化学检查是一项病理诊断手段，被广泛用于恶性肿瘤诊断中，本研究旨在探讨免疫组织化学检测在乳腺病理疾病中的临床诊断作用和准确度，为此选取50例乳腺癌患者、50例乳腺良性增生患者进行研究。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年7月-2017年12月在本院就诊的乳腺癌患者50例为恶性组和乳腺良性增生患者50例为良性组，其中乳腺癌或良性增生患者标本组织中所带的正常乳腺组织者50例为对照组。纳入标准：恶性组、良性组分别对应乳腺癌病灶组织、乳腺良性增生病灶组织，对照组则为乳腺癌或乳腺良性增生患者的正常乳腺组织；对研究知情同意，签署知情同意书。排除标准：合并其他恶性肿瘤、严重器质性病变者。本研究获医院伦理学委员会批准。

1.2 方法 三组均接受乳腺穿刺活检，受检者平卧于手术台，将上身衣物脱下，充分暴露乳房，采用美国GE公司生产的Logiq C2型彩色多普勒超声诊断仪对受检者乳腺进行多切面扫描，根据超声实时监控图像，对受检者乳腺病变进行定位，采用14G穿刺针刺入乳腺，启动穿刺枪，采集乳腺组织标本；或者患者接受外科手术切除标本，乳腺组织标本采集后，采用浓度为10%的甲醛溶液固定标本，行常规脱水、石蜡包埋处理，将组织标本切成4 μm厚的切片，采用免疫组织化学染色技术对组织标本进行染色处理，选用免疫组化S-P法检测试剂盒和DAB显色试剂盒，按照试剂盒说明书进行操作，测定其CK5/6、CK34βE12、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）、人表皮生长因子受体-2（Human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）、P16、P63、Ki67、PTEN的阳性率。其中阳性判定标准采用双评分法对各免疫组化检测指标的阳性表达进行判定[3]，即阳性细胞占比（A）：5个高倍镜视野内的阳性细胞占比<25%得1分，占比25%～50%得2分，占比>50%得3分；（2）染色强度（B）：未着色得0分，浅黄色得1分，棕黄色得2分，棕褐色得3分。A+B>2分则为阳性，反之则为阴性。

1.3 觀察指标 分析乳腺癌的巨检、镜检、免疫组织化学检测结果，分析CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67、PTEN等免疫组化检测指标对乳腺癌的诊断准确率；比较三组CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67、PTEN检测结果；采用皮尔逊（Pearson）相关系数分析法，分析不同免疫组化检测指标与乳腺癌的相关性。

1.4 统计学处理 使用SPSS 19.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验；相关性分析采用Pearson相关系数分析法，r为正数即正相关，反之则为负相关。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组基线资料比较 恶性组均为女性；年龄25～67岁，平均（46.19±18.73）岁。良性组均为女性；年龄23～66岁，平均（45.52±17.14）岁。对照组均为女性，年龄20～70岁，平均（45.23±19.64）岁。三组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 乳腺癌巨检情况 乳腺癌巨检可见肿瘤切面为灰黄色或灰白色，存在边界不清晰的实性区，部分切面可见黄色坏死物。

2.3 乳腺癌镜检情况 镜检可见乳腺癌细胞呈不规则分布，细胞形态多样，细胞质较少，细胞核级别低，极少核分裂现象，细胞周围可见胶原化或成纤维母细胞增生，见图1、2。

2.4 乳腺癌免疫组化检查情况 免疫组化检测结果显示，50例乳腺癌患者中，CK5/6（+）、CK34βE12（+）、EGFR（+）、HER-2（+）、P16（+）、P63（+）、Ki67（+）、PTEN（-）分别为48、41、45、44、39、40、42、17例，其诊断准确率分别为96%、82%、90%、88%、78%、80%、84%、34%。

2.5 三组免疫组化检测结果比较 恶性组CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67阳性率均高于良性组、对照组，PTEN阴性率均低于良性组、对照组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）；而良性组与对照组免疫组化检测结果比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.6 不同免疫组化检测指标与乳腺癌的相关性分析 经相关性分析，CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67的阳性表达与乳腺癌呈正相关（P<0.001），而PTEN阳性表达与乳腺癌呈负相关（P<0.001），见表2。

3 讨论

乳腺病变在女性人群中的发生率较高，且近年来其发病率出现增高趋势[4]。乳腺病变可分为良性乳腺增生、乳腺癌，其中，良性乳腺增生存在一定的恶变风险，在未及时治疗的情况下可能会发展为乳腺癌，而乳腺癌是当前女性恶性肿瘤中发病率最高的一种恶性肿瘤，在全球范围内的发病率均较高，对广大女性的生命健康构成严重威胁，已经成为全球范围内妇女健康方面的重点问题[5-7]。临床上针对乳腺病变多采取手术治疗，但不同性质病变的手术方案存在差异，术前需对乳腺病变性质进行明确，故临床上需针对乳腺病变的诊断方法进行积极探讨[8-9]。

乳腺癌、乳腺良性增生具有相同的症状和体征，其鉴别区分难度较大，临床上多通过免疫组化技术对其进行确诊，且免疫组化往往被临床作为诊断恶性肿瘤的金标准，主要是针对肿瘤相关细胞因子表达情况进行检测，对其是否为恶性肿瘤进行判断[10-12]。本研究中选择的免疫组化检测指标中，CK5/6、CK34βE12属于细胞角蛋白，可对细胞成分和生物学活性予以反映，通常在癌变组织中会出现强阳性表达[13]；EGFR、HER-2属于酪氨酸激酶受体，参与到多种肿瘤的发生、发展过程中，当人体内出现癌变时，EGFR、HER-2往往呈現出高表达状态，其表达水平增高，对肿瘤细胞的增殖、血管再生、淋巴结的转移均有促进作用，同时还可对肿瘤细胞的凋亡进行有效抑制[14]；P16、P63参与到细胞周期的调控过程中，对肿瘤细胞增殖和分裂起到负向调节作用，可对肿瘤细胞的复制进行抑制，可参与多种肿瘤发生、发展过程中；Ki67属于新型细胞增殖核抗原，其往往会在增殖的细胞中呈高表达水平，参与到肿瘤细胞的增殖过程中，促进肿瘤细胞的有丝分裂；PTEN基因是一种具有磷酸酶活性的抑癌基因，其在人类肿瘤中发生缺失和突变的概率极高，一旦人体中的PTEN基因表达缺失或发生突变，表示人体中出现新的信号转导途径，意味着人体组织可能发生癌变[15]。

本研究结果显示，恶性组CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67阳性率均高于良性组、对照组，PTEN阴性率均低于良性组、对照组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）；经相关性分析，CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67的阳性表达与乳腺癌呈正相关（P<0.001），而PTEN阳性表达与乳腺癌呈负相关（P<0.001）。充分说明免疫组织化学检测各项细胞因子指标可对乳腺恶性病变、良性病变予以准确区分。

综上所述，免疫组织化学检测可对不同乳腺病变予以准确鉴别区分，可将免疫组化指标CK5/6、CK34βE12、EGFR、HER-2、P16、P63、Ki67、PTEN等作为乳腺癌生物学行为的辅助判断指标。

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（收稿日期：2018-02-09） （本文编辑：董悦）